Ilma tablettide ja immuunsupressioonita: maailma esimene β-rakkude siirdamine diabeedi raviks

Ainulaadsel juhul siirdati 42-aastane mees, kellel oli 37 aastat olnud raske 1. tüüpi diabeet, doonorilt geneetiliselt muundatud saarekeste β-rakud ilma ühegi tilga immunosupressante võtmata. Rootsi ja Norra teadlased kasutasid CRISPR-Cas12b-d oluliste HLA I ja II markerite eemaldamiseks ning seejärel võimendasid „mitte-ise“ CD47 ekspressiooni, et rakud „sulanduksid“ retsipiendi kudedega ja väldiksid nii adaptiivset kui ka kaasasündinud hülgamisreaktsiooni. Uuring avaldati ajakirjas NEJM.

Kuidas see korraldati?

1. Isoleerimine ja redigeerimine

• Doonori saarekeste rakud "purustati" üksikuteks β-rakkudeks.
• CRISPR-Cas12b „välja lõi“ B2M ja CIITA geenid (HLA-I ja HLA-II alus).
• Lentiviiruse transduktsioon sisestas rakkudesse CD47 geeni, blokeerides makrofaagide ja NK-rakkude rünnakuid.
• Lõplik UP421 produkt sisaldas ~86% HLA I-negatiivseid, 100% HLA II-negatiivseid ja peaaegu 50% CD47-võimendatud rakke.

2. Siirdamine

• Küünarvarre lihasesse süstiti intramuskulaarselt 79,6 miljonit redigeeritud β-rakku – 17 väikest "helmeste" süsti mööda kiude.
• Patsient ei saanud steroide, anti-CD3 ega tsüklosporiini.

3. Immuunsuse kontroll

• Tavapärased (mitteredigeeritud) saarekeste rakud ja topeltväljalülitused kutsusid esile tugevad T-rakkude ja kaasasündinud vastused: maksimaalne aktiivsus 7.–21. päeval, selge IgM→IgG lüliti ja tsütotoksilisus PBMC+seerumkokteilis.
• Hüpoimmuunsed (HIP) rakud elasid 12 nädalat ilma äratõukereaktsiooni, antikehade või tsütotoksilisuse tunnusteta.

4. Pankrease funktsiooni taastamine

• 0. nädalal C-peptiid puudus, kuid 4–12 nädalat pärast siirdamist tekkis patsiendil toidu tarbimisega glükoosist sõltuv C-peptiidi suurenemine.
• Samal ajal vähenes EHD 42% ja eksogeense insuliini päevaannust suurendati, et vältida "hüperspike" ja kaitsta uut siirikut.
• PET-MRI kinnitas lihases olevate "saarte" säilimist ja vaskularisatsiooni.

Ohutus ja kõrvaltoimed

12 nädala jooksul registreeriti ainult 4 kõrvaltoimet (kerge tromboflebiit ja käte paresteesia), millest ükski ei olnud tõsine ega seotud geneetiliselt muundatud rakkudega.

Uuringu olulisus

• Maailma esimene inimene, kellele tehti hüpoimmuunne allogeenne saarekeste siirdamine ilma immunosupressioonita.
• On näidatud, et CRISPR-Cas12b + CD47 üleekspressioon kaitseb T-rakkude, NK-rakkude, makrofaagide ja antikehade eest.
• Kliiniline teostatavus on kinnitust leidnud: insuliini stabiilne ja füsioloogiline sekretsioon siirdatud rakkudest.

„See on kontseptsiooni tõestus, et geneetiliselt muundatud „nähtamatud” β-rakud võivad päästa patsiente elukestvast tablettide ja immunosupressantide tarvitamisest,“ kommenteerib dr Johan Schön.

Järgmised sammud

Suurendades rakkude annust tasemeni, mis tagab täieliku insuliinist sõltumatuse, ja pikendades vaatlusperioodi, võiks selliste siirdamiste seeria pakkuda tulevikus reaalset võimalust miljonitele 1. tüüpi diabeediga inimestele „ravimiseks“.