Artikli meditsiiniline ekspert
Uued väljaanded
In situ hübriidimine
Viimati vaadatud: 04.07.2025
Kõik iLive'i sisu vaadatakse meditsiiniliselt läbi või seda kontrollitakse, et tagada võimalikult suur faktiline täpsus.
Meil on ranged allhanke juhised ja link ainult mainekate meediakanalite, akadeemiliste teadusasutuste ja võimaluse korral meditsiiniliselt vastastikuste eksperthinnangutega. Pange tähele, et sulgudes ([1], [2] jne) olevad numbrid on nende uuringute linkideks.
Kui tunnete, et mõni meie sisu on ebatäpne, aegunud või muul viisil küsitav, valige see ja vajutage Ctrl + Enter.
Hübridisatsiooniprotseduuri saab läbi viia mitte ainult geelil, filtritel või lahuses, vaid ka histoloogilistel või kromosomaalsetel preparaatidel. Seda meetodit nimetatakse in situ hübridisatsiooniks. Meetodi varianti, kus sondidena kasutatakse fluorokroomidega märgistatud DNA- või RNA-preparaate, nimetatakse FISH-iks (fluorestseiini in situ hübridisatsioon). Märgistatud DNA-sond kantakse diferentsiaalselt värvitud ja hübridisatsiooniks ettevalmistatud (denatureeritud) metafaasikromosoomide preparaatidele. Kromosoomide eeltöötlust kasutatakse sondi juurdepääsu hõlbustamiseks genoomsele DNA-le. Pärast seondumata DNA molekulide mahapesemist ja valgustundliku emulsiooni pealekandmist (radioaktiivse märgise kasutamisel) või sobiva töötlemise läbiviimist (biotiini- või fluorestseiiniga märgistatud DNA-sondide kasutamisel) saab kasutatud DNA-sondiga komplementaarsete DNA-järjestuste lokaliseerimiskohti mikroskoobi abil otse tuvastada iseloomulike punktidena teatud kromosoomide vastavate lõikude kohal.
See uurimismeetod võimaldab meil määrata mitte ainult kromosomaalset kuuluvust, vaid ka uuritava geeni intrakromosomaalset lokaliseerimist.
[