A-vitamiin veres

A-vitamiini (retinool) kontsentratsiooni kontrollväärtused (norm) vere seerumil: lastel 1-6 aastat - 0,7-1,5 μmol / l, 7-12 aastat - 0,91-1,71 μmol / l, 13 -19 aastat - 0,91-2,51 μmol / l; täiskasvanutel on 1,05-2,09 μmol / l.

Vitamiin A käsitleb rasvlahustuvaks ja esineb kahes vormis - tegeliku vitamiini või retinool (leidub ainult loomakasvatussaadused) ja pro-vitamiin A, mida tuntakse karoteen (valmistati loomse või taimse päritoluga), mis võib muuta retinool seintes seedetrakt. Ligikaudu 50-90% toiduga võetud retinoolist imendub peensooles ja transporditakse kompleksina, mis seondub külomikronidega maksa, mida säilitatakse retinoolpalmitaadi kujul. Vajadusel vabaneb see retinooli vormis vereringesse, mis on kombineeritud vitamiin A-ga seonduva valguga. Seerumis seostub vitamiin A-ga seonduv valk + retinooli kompleks transtüretiiniga. Seerumist hõivatakse retinooli sihtrakud, näiteks võrkkesta fotoretseptorid ja epiteel.

Kui A-vitamiin siseneb kehasse, mis ületab nõudeid (180-430 μg retinooli päevas sõltuvalt vanusest, soost ja füsioloogilisest seisundist), on selle liig ladestunud maksas selle vitamiini depot. Kui retinoolist toidust on vähendatud, vabanevad tema maksapood vereringesse, säilitades seerumis normaalse taseme (üle 0,7 μmol / L) retinooli kontsentratsiooni. Teised A-vitamiini (reetina ja retinoehape) bioloogiliselt aktiivsed vormid esinevad veres väga madala kontsentratsiooniga (alla 0,35 μmol / L); retinooli estritest moodustab umbes 5% kogu A-vitamiini (0,1-0,1 μmol / l) kohta.

A-vitamiinil on oksüdatsiooni-vähendamise protsessis oluline roll. Retinool soodustab glükogeeni moodustumist maksas ja lihastes, parandab vere kolesterooli sünteesis osalevat steroidi ja suguhormoonide. See on vajalik majanduskasvu ja luu moodustumist skelett resünteesi rodopsiini ja aitab kaasa ka normaalset toimimist limaskestade ja epiteeli naha kate, mis takistab selle metaplasia, hüperkeratoodi ja ülemäärase vahetumine. Vitamiin A aitab tugevdada juukseid, hambaid ja igemeid. Viimastel aastatel on see näitab erinev roll A-vitamiini vähi ennetamist ja regulatsioonis immuunsuse (eeterlikud lõpuleviimiseks fagotsütoosi, suurendada sünteesi Ig, stimuleerib ka T-tapjarakud, stimuleerib T-abistaja II tüüpi jt.). A-vitamiin - aktiivne antioksüdant, mis toimib peamiselt E-vitamiini manulusel; see kaitseb C-vitamiini oksüdatsiooni eest. A-vitamiini defitsiiti peetakse pahaloomuliste kasvajate riskifaktoriks. Katseuuringutes selgus, et A-vitamiini sisalduse suurenemine toidus suurendab keskmist eluiga 17,5% võrra. Tsink on A-vitamiini ainevahetuse oluline koostisaine (vajalik vitamiin A-ga seonduva valgu sünteesiks).

Täiskasvanute (20-50-aastased) retinooli keskmine ööpäevane vajadus on 1,2 mg (4000 RÜ, 1 RÜ vastab 0,3 ug retinoolile), rasedatele naistele 1,5 mg (5000 RÜ), rinnaga toitmiseks - 1, 8 mg (6000 RÜ) üle 60 aasta vanustele inimestele - 2,5 mg (10 000 RÜ). Vähemalt kolmandik retinooli igapäevasest nõudlusest tuleb organismile jõuda valmis kujul; ülejäänud võib imenduda karotenoidide kasutamisega, mille retinool moodustab kehas. Tuleb meeles pidada, et umbes 30% retinoolist toiduainetes hävib nende kuumtöötlus. Retinooli aktiivsus on 2 korda kõrgem kui karoteen, lisaks on viimane imendunud soolestikus vaid 30-40%. Seetõttu arvestab toidu annuse hindamisel, et 1 mg retinooli ligikaudu vastab 6 mg karotinoididele.

Retseptori (A-vitamiini) ja karotenoidide määramine seerumis vastavalt Bessey-le LA Anisimova modifikatsioonis

Meetodi põhimõte

A-vitamiini ja karotenoidide määramine põhineb nende hüdrolüüsil leeliselises alkoholilahuses, millele järgneb ekstraheerimine orgaaniliste lahustite segu abil.

Reaktiivid

• 11 M kaaliumhüdroksiidi lahus (KOH).
• 96% etüülalkohol.
• 1 M kaaliumhüdroksiidi (KOH) lahus 96% etüülalkoholis: 1 mahtu 11 M KOH lahust segatakse 10 mahuga 96% etüülalkoholi. Reagent valmistatakse uuringu päeval. Segamise ajal värvumine tuleb enne kasutamist puhastada destilleerimisega.
• Xylol, hj
• Oktan, h.ch.
• Ksüleen-oktaani segu: valmistatakse ksüleeni ja oktaani võrdses mahus segamisel.

Uuringud viiakse läbi spektrofotomeetriga.

A-vitamiini määramise käigus

Tsentrifuugimärgistesse sisestatakse sõrmest võetud (umbes 1 ml) vett ja asetatakse 20-30 minutiks klaaskausse sooja veega (temperatuur 40-45 ° C). Seerumi eraldamiseks hõõrutakse õhukese klaaspulgaga toru serva ümber ja 10 minutit tsentrifuugitakse kiirusel 3000 pööret minutis.

Valige 0,12 ml seerumit ja viige see aglutinatsioonitorusse, seejärel lisage 0,12 ml 1 M alkoholi kaaliumhüdroksiidi lahust. Sisu loksutatakse hoolikalt.

Proovidega katseklaasid asetatakse 20 minutiks veevanni temperatuurile 60 ° C hüdrolüüsi jaoks.

Proovid jahutatakse ja lisatakse 0,12 ml ksüleen-oktaani segu, loksutatakse intensiivselt 10-15 sekundit. Jahutage uuesti ja tsentrifuugige.

Eemaldage hoolikalt ülemine kiht, mis sisaldab A-vitamiini ja karotinoide, kasutades Pasteur pipetti kummikorkidega ja suunake see mikrokuvette.

Proovid on spektrofotomeetrilised lainepikkusel 328 nm, et määrata vitamiin A ja lainepikkusel 460 nm karotinoidide määramiseks.

Pärast spektrofotomeetriliselt uuritud proovis allutatakse ultraviolettkiirgusega hävitamiseks vitamiini A. Selleks vahemaa 15-20 cm kauguselt kvarts mikroküvettides seatud (bakteritsiidne) lamp nii et kiiritamise katmata osa küvetti vedelikuga täidetud; kiiritusaeg on 45-60 minutit.

Proovid korduvad spektrofotomeetriliselt lainepikkusel 328 nm. A-vitamiini sisaldus määratakse ekstinktsiooniväärtuste (optiline tihedus) erinevusest, võttes arvesse Bessey A-vitamiini jaoks arvutatud koefitsienti (tegurit) 637.

Arvutamine toimub vastavalt järgmisele valemile:

X = 637 × (Е328 (1) - Е328 (2)),

Kus X on A-vitamiini sisaldus, μg / dL; 637 on koefitsient, mida Bessey arvutab A-vitamiini määramiseks; Е328 (1) - lahuse optiline tihedus enne kiiritamist; E328 (2) on lahuse optiline tihedus pärast kiiritamist.

Koefitsient A-vitamiini kontsentratsiooni üleviimisel μg / dl μmol / l on 0,035.

Karotenoide sisaldus arvutatakse järgmise valemi abil:

X = 480-Е480,

Kus X on karotenoidide sisaldus, μg / dL; 480 on koefitsient, mille Bessey arvutab karotenoidide määramiseks; E480 on uuritava lahuse optiline tihedus.

Märkus:

Bessey sõnul võib uuringute ajal võtta suuremaid või väiksemaid seerumikoguseid, kuid selle suhe alkoholilahuse mahuni peab olema konstantse ksüleen-oktaani segu igasuguse muutusega.

A-vitamiini sisaldus vereseerumites on: vastsündinutel ja väikelastel 160-270 μg / l; täiskasvanutel 1,05-2,45 umol / l (300-700 μg / l). Täiskasvanud seerumis on karotinoidide sisaldus 800-2300 μg / l.