C -hepatiidi PCR

Materjalis tavaliselt HCV sisaldus puudub.

Erinevalt seroloogiliste diagnoos hepatiit C viiruse meetodid, kus antikehade avastamiseks HCV, PCR abil avastada HCV RNA ja vahetult kvantifitseerida selle kontsentratsioon materjalis. Katsel on spetsiifiline spetsiifilisus ja kõrge tundlikkus: uuritavas materjalis on kümme HCV RNA molekule selle avastamiseks piisavad. Vastaste antikehade määramine HCV ainult kinnitab fakti infektsiooniga patsiendil kuid ei võimalda hinnata aktiivsuse infektsiooniprotsess (viiruse replikatsiooni) ja prognoosi haigus. Lisaks antikehade HCV tuvastasime Veres ägeda ja kroonilise hepatiidi, samuti neil patsientidel, kes on haigestunud ning taastunud, kuid sageli antikehad ilmuvad verre vaid mõni kuu pärast algav kliinilist haigust, mistõttu on raske diagnoosida. HCV-de tuvastamine veres, kasutades PCR-i, on informatiivsem diagnostiline meetod. Määramine HCV RNA PCR tõendeid vireemia, näitab viiruse replikatsiooni kehas ja on üheks kriteeriumiks tõhususe seisukohalt viirusevastase ravi. HCV RNA tuvastamine PCR-ga viirusliku nakkuse tekkimise varases staadiumis seroloogiliste markerite täieliku puudumise taustal võib olla kõige varem infektsiooni tunnuseks. Kuid HCV RNA isoleeritud detekteerimine muude seroloogiliste markerite täieliku puudumise taustal ei saa täielikult kõrvaldada PCR-i valepositiivseid tulemusi. Sellistel juhtudel on vaja kliiniliste, biokeemiliste ja morfoloogiliste uuringute igakülgset hindamist, korduvalt kordades kinnitades PCR-nakkuse esinemist.

Äärmiselt oluline on PCR-meetodi kasutamine kroonilise viirusliku hepatiit C patsientidega, kuna enamikul neist ei esine viiruse replikatsiooni olemasolu ja maksaensüümide aktiivsuse vahelist korrelatsiooni. Sellistel juhtudel võimaldab ainult PCR-i abil hinnata viiruse replikatsiooni esinemist, eriti kui lõpptulemus on väljendatud kvantitatiivselt. Enamikul juhtudest esineb HCV RNA kadumine vereseerumist hiljem kui maksaensüümide normaliseerumine, seega ei saa nende normaliseerimine olla viirusevastase ravi peatamiseks.

HCV RNA tuvastamiseks on praktiliselt oluline PCR meetodil mitte ainult seerumi, vaid ka lümfotsüütide, hepatobiobaptiimi uurimine. Viirusi saab maksakudest 2-3 korda sagedamini tuvastada kui seerumis. HCV RNA vere seerumi uuringu tulemuste hindamisel tuleb meeles pidada, et vireemia võib kõikuda looduses (nagu ka ensüümi aktiivsuse muutus). Seetõttu saab pärast PCR-uuringu positiivsete tulemuste saamist negatiivset tulemust ja vastupidi. Sellistel juhtudel on tekkivate kahtluste lahendamiseks parem uurida hepatobiobaths.

HCV RNA tuvastamist PCR-i kasutavas materjalis kasutatakse järgmistel eesmärkidel:

• seroloogiliste uuringute küsitavate tulemuste lahendamine;
• viirusliku hepatiidi C eritumine teistest hepatiidi vormidest;
• haiguse ägeda faasi tuvastamine ülekantud nakkuse või kontaktiga võrreldes; vastsündinute infektsioonide staadiumist seropositiivsetest HCV emadest;
• viirusevastase ravi efektiivsuse jälgimine.

Patsiendid, kellel on kahtlane viirushepatiit C:

• doonorid;
• riskifaktoriga isikud;
• ALT aktiivsuse tõusuga inimesed;
• ägeda hepatiidiga patsiendid

Kõik ülejäänud HCV diagnoosimise tulemuste ja lähenemisviiside hindamise funktsioonid, mis kasutavad PCRi, kehtivad ka muude infektsioonide korral.

PCR-meetod võimaldab mitte ainult HCV RNA tuvastamist katsematerjalis, vaid ka selle genotüübi kindlakstegemist. Viiruse genotüübi määramine on väga tähtis kroonilise viirushepatiidi C patsientide valimisel interferoon-alfa ja ribaviriini raviks. Laboratoorsed andmed kroonilise viirushepatiidi C ja alfa-interferooni raviks on järgmised:

• transaminaaside aktiivsuse suurenemine;
• HCV RNA olemasolu veres;
• genotüüp 1 HCV;
• kõrge vireemia veres (rohkem kui 8 × 10 ⁵ koopiat / ml).

Praegu võib HCV RNA sisaldust vereseerumis kvantitatiivselt määrata PCR-ga, mis on alfa-interferooni ravi seisukohast väga tähtis. Vireemia taset hinnatakse järgmiselt: HCV RNA puhul 10 ² kuni 10 ⁴ koopiat / ml - nõrk; 10 ⁵ kuni 10 ⁷ koopiat / ml - sööde, üle 10 ⁸ koopiat / ml - kõrge. Tõhusa ravi korral väheneb vireemia tase.

[1], [2], [3], [4]