Nabaväädi vereloome tüvirakud

Hingamisteede veri toimib hematopoeetiliste tüvirakkude allikana hemopoeetiliste rakkude proliferatiivse potentsiaali ja taastumisvõime poolest. Korduvalt näidanud, et sünnituse ajal nabanööri vere sisaldab piisavalt suur hulk nõrgalt pühendunud eellasrakkude vereloomet. Mõned autorid usuvad, et see eelis vereloome tüvirakkude siirdamine Nabaväädivere ole vaja leida doonori ühilduv HLA-antigeenide suhtes. Nende sõnul sealse vastsündinud immuunsüsteemi põhjustab suurendatud funktsionaalse aktiivsuse Immunokompetentsetele rakkudes ja seega väiksem kui luuüdi siirdamist raskekujulist reaktsiooni "transplantaat peremehe". Selles rakusiirikuks ellujäämise Nabaväädivere ei ole madalam kui luuüdi rakkudest, isegi kui kasutatakse väiksemat arvu GSK manustada per 1 kg patsiendi kaalust. Kuid meie arvates optimaalne arv küsimustele siirdatud nabaväädivere vajalike rakkude tõhusaks implanteeritavust kehas saaja, nende immunoloogilised ühilduvuse ja mitmete teiste aspektide siirdamise vereloome tüvirakkude Nabaväädivere nõuab tõsisemat analüüsi.

[1], [2], [3], [4], [5], [6]

Nabaväädivere hematopoeetiliste tüvirakkude saamine

Saamise kord vereloome tüvirakkude arvu Nabaväädivere nõuab selle võtmist kohe pärast sündi ja selle lahutamist platsentast, kui platsenta emakasisese või emakavälised, samuti keisrilõiget, vaid ka emakavälised. On näidatud, et kui sünnitusjärgne aeg on vähenenud kuni vastsündinute eraldamiseni platsentast kuni 30 sekundini, suureneb nabaväädi veri keskmiselt 25-40 ml võrra. Hilisema protseduuriga kaotatakse sama veri. On tõendatud, et lapse varase eraldamise järelpäritoluga ei kaasne vastsündinule mingeid negatiivseid tagajärgi.

Vene Research Institute Hematoloogia Vereülekandeteenistuse töötatud efektiivset ja odavat tehnoloogiat nii nabaväädivere füsioloogilise liini ((70,2 + 25,8) ml) ja keisrilõige ((73,4 + 25,1) ml). Meetod eraldamine nabanööriverest koos piisavalt kõrge saagis mononukleaarrakkude ja tuumaga - (83,1 + 9,6) ja (83,4 + 14,1)% võrra. Parem meetod külmsäilitamisest nabaväädivere, mis tagab kõrge turvalisuse mononukleaarrakkude ja CFU-GM - (96,8 + 5,7) ja (89,6 + 22,6)% võrra. Tõhusust kanalisatsioon nabaväädivere proovivõtu meetodil mahuti "Kompoplast-300" (Venemaa). Fence nabaväädivere autorid läbi kohe pärast sündi ja selle eraldamine platsentast, nii pannes platsenta üsasiseselt või emakavälised. Enne punktsiooni nabaväädiveeni nabanööri kord töödeldi 5% Jooditinktuur ja seejärel kaks korda - 70% etüülalkoholi. Veri voolas ühendusseadmete kaudu konteinerisse spontaanselt. Aia kestus ei kesta kauem kui 10 minutit. 66 Kogutud äravool mahu meetodi nabanööri vereproovid keskmistatud (72 + 28) ml ja leukotsüütide arvu proovis keskmistatud täis - (1,1 + 0,6) x x 107. Analüüsi Nabaväädivere steriilsuse (bakterisaastuse HIV-1 viiruse hepatiit B ja C, süüfilis ja tsütomegaloviirusnakkusega) ainult ühes proovis tuvastati IgG-hepatiidi antikehade C. Teises uuringus kord platsenta pärast sündi loote pinnale pandi eraraame allapoole, juhtmest töödeldi 5% naatriumhüdroksiidi joodi ja 75% etüüliga th alkoholi. Nabavääsi veenid tühjendati transfusioonisüsteemi nõelaga (G16). Veri voolis anumasse spontaanselt. Selliselt võetud vere maht keskmiselt (55 + 25) ml. Dokumendis G. Kogler jt (1996) nabaväädivere võetud suletud viisil ning saadakse suures koguses verd - keskmiselt (79 + 26) ml. Autorid märgivad, et vahel 574 nabaväädivere proovid sisaldavad umbes 7% vähem kui 40 ml verd, mis ei võimalda neid kasutada siirdamiseks. K. Isoyama jt (1996), viies nabaväädivere aktiivse exfusion süstlaid kasutavad saidkeskmiselt 69,1 ml verd (nabaväädivere mahu varieerida 15-135 ml). Lõpuks A. Abdel-Mageed PI kaasautorid (1997) poolt punovinnoy veeni kateeterdamisseadmed saadi keskmiselt 94 ml nabaväädivere (56-143 ml).

Selleks et vähendada riski iatrogeensete infektsiooni ja saastumise emade eritised töötatud suletud süsteemi verevõtmine põhineb laialt kasutusel transfuzioinoy süsteemi Baxter Healthcare Corp., Deerfield, IL (USA), mis sisaldas 62,5 ml CPDA (tsitraat-fosfaat-dekstroosi adeniiniga) nagu antikoagulant. Valmistamise tehnoloogiat materjal on ülimalt tähtsad valmistamiseks kvaliteedi proovi suhtes sisuhulgaga ja puhtust rakususpensiooni. Olemasolevate meetodite nabaväädivere kogumise, kotoryeuslovno liigitatakse suletud, poolavatud ja avatud süsteemis sleduetotdavat eelistust esiteks nii suletud süsteemis vähendab olulisel mikroobse materjali saastumist, samuti saastumise rakususpensioon emarakus.

A. Nagler ja kaasautorid (1998) viisid läbi kõigi kolme nabaväädi proovivõtusüsteemide efektiivsuse võrdleva analüüsi. Esimeses variandis viidi protseduur suletud süsteemis läbi verepritsimise otse anumasse. Teises variandis saadi nabaväädi vereringe aktiivne vere väljavoolu meetod 1 platsentaenide veenide edasiseks pesuks ja üheaegse vereavastamisega mahutisse (avatud meetod). Kolmandas variandis eemaldati veri osaliselt avatud süsteemis, aktiivselt ekstraheerides seda süstlate abil ja pühkides nabaväädi arteri koos samaaegse väljapuhumisega mahutisse. Esimeses versioonis said autorid nabaväädivere koguses (76,4 + 32,1) ml leukotsüütide arvuga (10,5 + 3,6) x 10 ⁶ 1 ml veres. Teises variandis olid vastavad indeksid (174,4 + 42,8) ml ja (8,8 + 3,4) x 10 ⁶ / ml; kolmas - (173,7 + 41,3) ml ja (9,3 + 3,8) x 10 ⁶ / ml. Avatud süsteemi kasutamisel märgiti sagedasemat nabaväädi vereproovide nakatumist. Tehakse kindlaks otsene korrelatsioon platsenta massi ja ekstraheeritud vere koguse vahel - suurenev platsenta mass, suureneb veres kogutud kogus.

Pärast kogumist nabaväädivere järgneb etapp lahutamist - mononukleaarrakkudc eraldamise ja puhastamise rakust erütrotsüütsuspensioonile. Eksperimentaalsetes tingimustes tuumadega rakud eraldati nende settimine metüültselluloosi erütrotsüütide lüüsi ammooniumkloriidi. Kuid kliinilistel eesmärkidel ei tohiks kasutada metüültselluloosi, kuna hematopoeetiliste tüvirakkude kaotus ulatub 50-90%. Lüüsima punaste vereliblede seoses suurtes mahtudes töölahusega kliinikus ka vaevalt läbi, kuigi protsent eraldatus sel viisil tuumadega rakkude fenotüübile CD34 + ja eellasrakkude CFU-GM funktsioonid ja CFU-GEMM märgatavalt suurem. On teatatud uuest ainest mononukleaarsete rakkude eraldamiseks tiheduse gradiendi ostja tiheduslahuses (BDS72). Sellel ainetel on järgmised füsioloogilised parameetrid: pH - 7,4, osmolaalsus - 280 mosmi / kg, tihedus - 1,0720 g / ml. Autorite sõnul on selle abiga võimalik eraldada kuni 100% CD34-positiivsetest rakkudest ja eemaldada 98% punalibledest. Kuid kliinikus ei rakendata veel BDS72-d.

Separeerimine meetodeid testiti tuumadega rakke nabanööriverest kasutatakse tüüpiliselt 10% HES lahuse või 3% želatiini lahus. Erütrotsüütide sadenemise efektiivsus ja nukleaarsete rakkude isoleerimine mõlemal juhul on ligikaudu võrdne. Siiski puhul kasutamiseks settimiseta agent želatiini võimalik saada mõnevõrra suurema arvu CFU-GM, kui siis, kui lehe HES. Oletatakse, et erinev tulemuslikkus CFU-GM ebavõrdse kiiruse tõttu ladestumine üksikuteks fraktsioonideks või tuumadega rakud võime HES molekulide absorbeeritakse vereloomeraku pinnaretseptorid ja blokeerivad seega nende tundlikkust kolooniat stimuleerivad faktorid, mida kasutatakse siis, kui kultiveerimist CFU-GM in vitro. Ent mõlemad sedimenter võib hästi sobida isoleerimisest tuumadega rakkude loomine suuremahuliste nabaväädivere pangad.

Meetodid eraldatus ja külmsäilitamisest nabaväädivere põhimõtteliselt ei erine mis kehtivad vereloome tüvirakkude arvu perifeerse vere ja luuüdi täiskasvanutelt doonorid. Kuid pankade suurt arvu nabaväädi vereproovide ettevalmistamisel tuleb eraldamise meetodid kõigepealt odavad. Seetõttu on praegusel ajal kahjuks vajadustele kliiniliseks kasutamiseks on osutunud rutiinne eraldamise meetodid ja külmsäilitamisest nabaväädivererakkude ja tõhusamaks, kuid meetodid jäävad palju finansovoemkie katsetajad.

Üldine hindamiskriteeriumid end tõestanud vereloomeraku arvu nõuetele ja uuringu nabanööri vereproovid, et tuvastada infektsioonitekitajaid. Hematopoeetiliste närvisüsteemi vereliblede siirdamise tagamiseks tuleb kõiki vereproove uurida peamiselt hematogeensete nakkuste ja geneetiliste haiguste puhul. Mõned autorid soovitavad täiendavaid erimeetodiga uuring Nabaväädivere eesmärgil diagnoosimiseks geneetiliste haiguste nagu thalassemia ja sirprakuline aneemia, adenosiindeaminaas defitsiit, agammaglobulineemiga Bruton, haiguse Harlera ja Vedonlyöjä.

Soovituste kohaselt Ticheli L. Jt (1998), igas proovis Nabaväädivere on vaja kindlaks teha mitmeid tuumadega rakkude SB34-positiivsete rakkude ja CFU-GM, HLA-kirjutades määramiseks veregrupi ABO ja Rh selle koosseisu. Lisaks külv viiakse bakteriaalne seroloogiliste testide tulemused HIV ja CMV infektsioon, HBsAg, hepatiit C, HTLY-I ja HTLV-II (T-rakuline leukeemia, inimene), süüfilis, toksoplasmoos. Polümeraasi ahelreaktsioon tsütomegaloviiruse ja HIV-nakkuse suhtes on kohustuslik.

Nabaväädivere saamise kord peaks toimuma rangelt meditsiinieetika põhimõtete kohaselt. Enne vere kogumise algust on vaja raseduse nõusolekut selle rakendamiseks. Esialgne vestlus raseda patsiendi informeeritud nõusoleku täita kõiki manipulatsioone, kuna vere exfusion täitmine ja viimistlemine dokumendid viiakse läbi ainult tervishoiutöötajad. Igal juhul vastuvõetamatu täidab kõik need protseduurid personali bioloogiliste, keemia-, farmaatsia- ja muude meditsiiniline haridus, pidades silmas, eirates kehtestatud normide bioeetika ja inimõiguste. Suhe proovid positiivsed kandjat HBsAg, antikehade haigustekitaja hepatiit C, HIV ja süüfilis nabaväädivere ei võeta ja kogutud vereproovid on juba ära ja hävitatakse. Tuleb märkida, et kelgu varjatud nakatumiste vastsündinutel esineb harvemini kui täiskasvanutel seetõttu tõenäosus hematogenous üleandmise ja arengu nakkusliku komplikatsioonide vereloome infusiooni nabaväädivererakkude on oluliselt väiksem kui juhul, luuüdi siirdamist täiskasvanutelt doonorid.

Oluliseks kohaldamispunkti nabaväädivere kliinikus on hindamise implantaandi mis põhineb kvantitatiivne vereloome tüvirakkude arvu proovis nabaväädivererakkude ja annused vaja siirdamist. Siirdamiseks vajalike nabanööri vererakkude optimaalse arvu standardid pole veel välja töötatud. Puudub üldtunnustatud vaatenurk isegi selliste rutiinsete parameetrite puhul nagu CD34-positiivsete rakkude arv ja CFU-GM. Mõned autorid hinnati potentsiaali Vereloomerakkude analüüsimisega pikaajalise Kultuuride sisalduse määramisega kolooniaid moodustavate ühikute ühesugustest granulotsüüdid, erütrotsüüdid, monotsüüdid ja Megakarüotsüütides - CFU-GEMM.

Kuid kliinilistes tingimustes sisaldab nabaväädivere siirdamise standardne hindamine tavaliselt ainult tuumade või mononukleaarsete rakkude arvu määramist.

Nabaväädivere hematopoeetiliste tüvirakkude säilitamine

Hematopoeetiliste nabaväädi vererakkude säilitamise tehnoloogias esineb mõningaid probleeme. Kui külmsäilitamisest vereloome tüvirakkude arvu, et saavutada nende optimaalne külmutamist režiim peab minimaliseerimaks nabaväädivere ja punaste vereliblede varem eemaldatud hemolüüsi vältimiseks ning ohtu vastuolu reaktsiooni Erütrotsüütide antigeenide (ABO, Rh). Nendel eesmärkidel sobivad mitmesugused nukleaarsete rakkude eraldamise meetodid. 90-ndate alguses eelmise sajandi levinuim eraldamise meetodit tuumadega rakkude tihedusgradienti põhineb Ficoll- tihedusega 1,077 g / ml, või perkolatsioonil tihedus 1,080 g / ml. Separation nabaväädivere tihedusgradiendis võimaldab valida valdavalt ühetuumalised rakkudes, kuid viib oluliselt väheneda vereloome eellasrakkude - kuni 30-50%.

Hüdroksüetüültärklise settimise efektiivsust nabaväädi vererakkude eraldamise protsessis hinnatakse erineval viisil. Mõned autorid osutavad halb kvaliteet abil eraldades selle meetodi teised uurijad, vastupidi, nende hulgas kõik võimalikud viisid eelistada eraldamine nabaväädivere HSC kasutab 6% hüdroksüetüültärklist lahusega. See toob esile hemopoeetiliste rakkude sadestumise kõrge efektiivsuse, mis vastavalt mõnedele andmetele ulatub 84% -lt 90% -ni.

Toetajad teisest vaatenurgast arvavad, et peaaegu kõik fraktsioneerimisprotsesside kaasata suured kaod yadrosoderzhashih rakkudes ja nimeta teha eraldamine tsentrifugaaljõu, eraldav nabaväädivere viiakse 3 fraktsiooni: erütrotsüütide, leukotsüütide ja plasma tsükkel. Rakkude eraldamise sellisel viisil, on leiutajad leidnud, et sisu mononukleaarrakud varase vereloome rakkudes ja rakkude CD34 + immuunfenotüübi lõppkokkuvõttes olid vastavalt 90, 88 ja 100% esialgsest tasandil. Sarnased kogused puhastati kasv sellel meetodil Nabaväädivere marjast saadud teiste uurijate poolt: pärast settimist tuumadega eraldatud 92%, 98% - ühetuumalised, 96% - CD34-positiivsete rakkude ja 106% kolooniaid moodustavate ühikute.

1990-ndate aastate lõpul kasutas želatiini setitusainena. Kliinilises praktikas lehe želatiini vereloome tüvirakkude arvu isoleeriti nabanööriverest alates 1994. 3% -lise želatiini lahuse kasutamisel ulatub nukleaarsete rakkude eraldamise efektiivsus 88-94%. Laialdast kasutamist želatiini loomisel nabaväädivere pank on kinnitanud oma eeliseid võrreldes teiste vahenditega setteid. Võrdlev analüüs kõikide ülaltoodud meetodi isoleerimise tuumadega rakud poolest järjestikuseks kasutamiseks iga testitava nööri vereproovid näitasid, et optimaalne sedimenter-out ühetuumalised rakkude fenotüübile CD34 + / CD45 +, samuti mitmeid CFU-GM ja CFU-GEMM on 3% želatiinilahus. See osutus oluliselt vähem tõhusad meetodid Ficoll tihedusgradienti ja kasutamise metüültselluloosi ja hüdroksüetüültärklis milles vereloomeraku kaotuse jõudis 60%.

Nabaväädivere tüvirakkude siirdamise mahu laiendamine on seotud mitte ainult nende tootmismeetodite väljatöötamisega, vaid ka ladustamisega. Nabaväädivere ettevalmistamiseks pikaajaliseks ladustamiseks ja optimaalse krüokonservatsioonitehnoloogia valimiseks proovide jaoks on palju probleeme. Nende seas on küsimusi, mis puudutab eraldusprotseduuride teostamise otstarbekust, mitmesuguste krüoveerivate keskkondade kasutamist ja sulgunud rakkude ettevalmistamist siirdamiseks. Natiivsete nabaväädi proovide transport toimub sageli hematoloogiliste keskuste kaugematest piirkondadest. Sellega seoses tekib probleem nabaväädivere hoidmise lubamise perioodide kohta alates vastuvõtmise hetkest kuni krüokontrolli alguseni, mis on eriti olulised nabaväädivere pankade arendamisel.

Uuring funktsionaalset aktiivsust vereloome nabaväädivererakkude pärast pikaajalist ladustamist (kuni 12 aastat) vedelasse lämmastikku näitas, et umbes 95% Vereloomerakkude sel ajal ei kaota oma kõrgproliferatiivset võimsust. Dokumendis Yurasova S. Jt (1997) on näidanud, et nabaväädivere säilitatakse toatemperatuuril (22 ° C) või temperatuuril 4 ° C juures 24 ja 48 tunni jooksul ei vähendaks oluliselt elujõulisuse Vereloomerakkude et esialgne määr on sobivalt 92 ja 88%. Kui aga säilitusaega pikendatakse kolme päeva võrra, vähendatakse märkimisväärselt elujõuliste nukleaarsete rakkude arvu nabaväädi veres. Samal ajal kui teised uuringus leiti, et säilitamise ajal 2-3 päeva temperatuuril 22 ° C või 4 peamiselt mõjutatud elujõulisust küpse granulotsüüdid, kuid mitte vereloome rakkudes.

Elujõulisusele nabaväädivere vereloome tüvirakkude arvu võib avaldada negatiivset mõju süsteemi komponentide kogumist. Analüüs toime erinevate antikoagulante, mis toimemehhanism on tingitud siduva Katsiumiioonide (ACD, EDTA, XAPD-1) Hematopoeetilistele tüvirakkude nabaväädivere säilitamistingimused 24-72 tundi näitas negatiivset mõju elujõulisust tuumadega rakkudes. Seoses sellega autorid soovitavad kasutada PBS (fosfaatpuhvrilahuse) lisandiga native hepariini ei sisalda säilitusainet kontsentratsioonis 20 U / ml, mis nende arvates võimaldab suurendada ladustamise kestus mittefraktsioonitud nabaväädivere kuni 72 tundi ja säästab funktsionaalset aktiivsust kolooniat moodustavat ühikut. Kuid uuring kaitse- CFU-GM ja CFU-G näidanud, et nabanööri verest säilitamise ajal enne külmsäilitamisest tohiks ületada üheksat tundi. Ilmselt sel juhul peaks tegutsema põhimõttel, et kui on olemas andmed vastuolulised peaksid kasutama minimaalset soovitatav nabaväädivere -aeg ja alustada programmeeritav külmutamine eraldatud rakud nii kiiresti kui võimalik.

Nabaväädi vereloome tüvirakkude külmutamisel kasutatakse tavaliselt krüoprotektorina 10% DMSO lahust. Kuid lisaks ekspresseeritud krüoprotektiivsele mõjule on sellel kontsentratsioonil dimetüülsulfoksiidil otsene tsütotoksiline toime ka nabaväädivere vere moodustavate rakkude minimaalse kokkupuute korral. DMSO tsütotoksilise mõju vähendamiseks, null-kokkupuutetemperatuur, rakendatakse kõigi manipulatsioonide kiirust ja korduv pesemist pärast nabaväädi proovide sulatamist.

Ukraina Meditsiiniteaduste Akadeemia Hematoloogia ja Transfusiooloogia Instituut on alates 1995. Aastast arendanud teaduslikku suunda, mille eesmärgiks on uurida nabaväädi verd kui varre hemopoeetiliste rakkude alternatiivset allikat. Eriti on välja töötatud uued tehnoloogiad fraktsioneerimata ja fraktsioneeritud nabaväädi vererõhu madalate temperatuuride krüokonservatsiooniks. Krüoprotektorina kasutatakse madala molekulmassiga meditsiinilist polüvinüülpürolidooni. Fraktsioneerimata nabaväädivere krüokonservatsiooni meetod tugineb rakkude ettevalmistamise originaaltehnoloogiale külmutamiseks ja rakususpensiooni eritöötluse tehnikale vahetult enne siirdamist.

Üks kriitilisi hemopoeetiliste tüvirakkude funktsionaalse aktiivsuse taset mõjutavaid tegureid on raku suspensiooni jahutuskiirus, eriti kristallimisfaasi ajal. Külmutamise kiiruse ja aja probleemi lahendamise tarkvara lähenemine pakub suurepäraseid võimalusi lihtsate ja väga efektiivsete krüokonservatsioonimeetodite loomiseks, ilma et enne transplantatsiooni pesuks rakususpensiooni krüoprotektoritest.

Vahetu külmutamise ja sulatamise etapid on nende valmistamise ajal rakkude elujõulisuse seisukohalt kõige ohtlikumad. Kui hemopoeetilisi rakke külmutatakse, võib märkimisväärne osa neist hävitada rakuvälise keskkonna siirdumise hetkel vedelast tahke faasi kristallimiseni. Raku surma vähendamiseks kasutatakse krüoprotektante, teaduslikus kirjanduses on piisavalt hõlmatud toimemehhanismid ja krüprotektiivne tõhusus.

Paljulubavat suunas optimeerimine tehnikat külmsäilitamise luuüdi ja nabaväädi vererakud on kombineerida samas lahuses madala kontsentratsiooniga Krüoprotektantide mitmete erinevate toimemehhanismide näiteks toimivad rakusisese taseme DMSO ja hüdroksüetüültärklis või albumiin millel rakuvälise sulgemissurvega efekti.

Külmsäilitamiseks nabaväädivererakkude traditsiooniliselt kasutatavate 20% DMSO lahus, mis on püsivalt mehaaniliselt segada jäävannis, valati aeglaselt rakususpensiooni saavutada võrdseid (1: 1) mahuline suhe rakususpensiooni ja Külmakaitsevahendite. Dimetüülsulfoksiidi lõppkontsentratsioon on 10%. Rakususpensioon jahutati programmi kiirusega krioustanovke HS / min kuni -40 ° C, pärast mida jahutada kiirusega tõsteti 10 ° C / min. Pärast jõudmist -100 ° C Rakususpensioonidele konteineri paigutatud vedela lämmastikuga (-196 ° C). Selle protseduuri ohutust külmsäilitamisest funktsionaalselt aktiivne ühetuumalised rakud pärast sulatamist jõuab 85% oma algsele tasemele.

Modifikatsioone külmsäilitamisest tehnikate eesmärk on vähendada DMSO kontsentratsioon lisades hüdroksüetüültärklis (DMSO lõplik kontsentratsioon ja hüdroksüetüültärklis on vastavalt 5 ja 6%). Kõrge efektiivsusega käesoleva sidestamise täheldatakse Külmakaitsevahendite külmutamisel läga müeloidrakkude, milles mitte vähem tsütoprotektsiooni kui siis, kasutades ainult ühte 10% dimetüülsulfoksiidi lahust. Arvu elujõulisi tuumadega rakud saavutasid 96,7% esialgsest tase, ja nende funktsionaalset aktiivsust, hinnata mitmeid CFU-GM, oli 81,8%.

Kasutades dimetüülsulfoksiidi lahust kontsentratsioonide vahemikus 5-10% kombinatsioonis 4% hüdroksüetüültärklist (lõplik kontsentratsioon) leidis, et säilitamine CD34-positiivsete rakkude nendes vahemikes dimetüülsulfosiidile praktiliselt samaks. Samal ajal tingimustes kontsentratsiooni alandamine DMSO 5-2,5% täheldatakse mass surma nabaväädivererakkude - arvu elusrakkude ühikut vähendatakse 85,4-12,2%. Teised autorid ka järeldusele, et see oli 5 ja 10% -list lahust dimetüülsulfoksiidis (autoriõiguse teostuses - kombinatsioonis autoloogse seerum) maksimaalse efektiivsusega pakkuda tsütoprotektsiooni ajal külmsäilitamisest nabaväädivere HSC. Lisaks kõrgele ohutuse järjestikku külmutada ja sulatada raku tähistatakse puhul koostisega 5 või 10% DMSO 4% hüdroksüetüültärklist lahusega, eriti ajal juhitav jahutus määr TOS / min. Järgmises kasutatava paberi külmakaitseaine koosnevas lahuses kolmest komponendist juba - DMSO, puhastatud inimese albumiini ja RPMI vahekorras 1: 4: 5, millele lisati rakususpensioonile kuni võrdses mahus suhe (lõplik DMSO kontsentratsioon oli 5%). CFU-GM-i ohutus pärast sulatamist veevannis temperatuuril + 4 ° C ületas 94%.

Mõned autorid soovitavad krüokonserveerimisel kasutada fraktsioneerimata nabaväädi verd, kuna punavereliblede eemaldamisel kaob märkimisväärne kogus vereloome-rakke. Selles teostuses kasutatakse monokroonsete rakkude kaitseks krüokristallimise kahjuliku mõju eest dimetüülsulfoksiidi 10% lahust. Külmutamine toimub konstantse jahutuskiirusega HS / min kuni -80 ° C, mille järel nabaväädi vererakkude suspensioon sukeldatakse vedelasse lämmastikku. Selle külmutamismeetodi abil toimub erütrotsüütide osaline lüüs, mistõttu vereproovid ei vaja fraktsioneerimist. Pärast sulatamist pestakse rakususpensiooni vabast hemoglobiinist ja dimetüülsulfoksiidist inimese albumiini lahuses või patsiendi autoloogses seerumis ja seda kasutatakse siirdamiseks.

Preservation vereloome eellasrakkude pärast sulatamist mittefraktsioonitud nabaväädivere on tõepoolest suurem kui fraktsioneeritud, kuid seoses krioustoychivostyu of punastes verelibledes võib põhjustada tõsiseid probleeme, mis tulenevad Vereülekandega Transfusioonmeditsiini ABO kokkusobimatud punaliblesid. Lisaks sellele suureneb ladustatud fraktsioneerimata vere maht oluliselt. Ühes kliinilises seisukohast veelgi eelistatumalt külmsäilitamisest eelnevalt isoleerida ja puhastada teistest rakufraktsioonides nabaväädivere vereloomerakkudes.

Täpsemalt, meetod on külmsäilitamisest nabaväädivererakkude fraktsioneeriti võimaldades eemaldada erütrotsüütide preparaat külmutamiseks, mis kasutab 6% lahuse Hüdroksüetüültärklise kompositsioonis plazmozameshchath lahendus "Stabizol". Pärast sulatamist on nii saadud rakususpensioon valmis kliiniliseks kasutamiseks ilma täiendavate manipulatsioonita.

Seega on praegu nabanööri vere krüokonservatsiooni jaoks palju üsna tõhusaid viise. Peamine erinevus seisneb selles, et vereproovid külmutati fraktsioneerimata või eraldati preparaadi käigus rakufraktsioonidesse ja koguti tuumata rakud ilma erütrotsüütide segunemiseta.

Nabaväädivere hemopoeetiliste tüvirakkude transplantatsioon

80. Aastate lõpul - eelmise sajandi 90. Aastate alguses leiti, et nabaväädiverest, mis varustab loote raseduse ajal, on hematopoeetiliste tüvirakkude suur sisaldus. Nabaväädivererakkude saamise suhteline lihtsus ja ilmsete eetiliste probleemide puudumine soodustasid nabaväädivere tüvirakkude kasutamist praktilises meditsiinis. Fanconi aneemia lapsel oli esimene nabaväädivere siirdamine lähtepunktina nabaväädivere tüvirakkude siirdamise mahtude laiendamiseks ja pankade pakkumise süsteemi loomiseks. Nabavere pankade globaalses süsteemis on suurim Placental Bloodi New Yorgi keskus, mis on riiklike tervishoiuinstituutide bilansis. Selles pangas salvestatud nabaväädi vereproovide arv läheneb 20-le LLC-le. Samuti suureneb abisaajate arv (peamiselt lapsed) ja edukas siirdamine on toimunud. USA tervishoiuministeeriumi andmetel on HSC-nabavere vereloome retsipientide järgse elulemuse taastekkeeta periood üle 10 aasta.

See ei ole üllatav, kuna mitmed uuringud hemapoeetilise potentsiaali Nabaväädivere on näidanud, et kvaliteedi ja kvantiteedi varaseima tüvirakud mitte ainult ei langeks täiskasvanud inimese luuüdi, vaid ka mõningad meetmed ületa. Kõrgem proliferatiivsete potentsiaali nabaväädivere tüvirakke põhjustatud arengulised rakusignalisatsioonis iseärasusi, esinemine retseptoritega HSC konkreetsetele kasvufaktoreid, suutlikkust nabaväädivere rakkude autokriini kasvufaktorite produktsiooni, suuremõõtmelisuse ja pikkust telomeerid.

Seega genoomse fenotüüpiline omaduste vereloome tüvirakkude arvu nabaväädivere Eelnevalt kvaliteedi implanteeritavust suure potentsiaaliga doonori hematopoeetiliseks taastumine saajale.

Nabaväädivere hematopoeetiliste tüvirakkude eelised

Hulgas tõeline kasutamise eeliseid vereloome nabaväädivere tüvirakkude siirdamine üle muudest allikatest vereloome rakkude tuleb märkida peaaegu null riski doonori tervise (kui mitte pidada näiteks platsenta), samaaegselt kõrvaldades vajadust üldnarkoosi. Nabaväädivere kasutamine laiendab HLA süsteemis osaliselt ühilduva siirdamise tõttu rakkude siirdamise võimalusi (ühest kuni kolmest antigeenist ebasobivus). Tehnikat pikaajaliseks hoiustamiseks vereloome nabaväädivererakkude külmutatult, mis suurendab tõenäosust saada haruldaste HLA-tüüpi ja vähendab otsiaeg HLA sobivusega allogeense siirdamist. Samal ajal väheneb märkimisväärselt ülekandeliini kaudu edastatavate latentsete infektsioonide tekke oht. Lisaks on bioloogilise elukindlustuse odav viis seoses võimalusega kasutada nabaväädi vererakke autoloogse siirdamise jaoks.

Ent kuna väikestes kogustes verd, mis võib koguda platsentast (keskmiselt enam kui 100 ml), et esile probleem oleks maksimaalne võimalik kogus verd nabanööri veeni ranges vastavuses tingimustes minimaalse bakteriaalse saastumise risk Nabaväädivere saadud proovid.

Primitiivne Vereloomerakkude nabaväädiverest üldjuhul eristab juuresolekul oma pinnal glikofosfoproteina CD34, ning võttes aluseks nende funktsionaalseid omadusi uurides klonogeenses testiga või kolooniatemoodustamise in vitro. Võrdlev analüüs näitas, et nabaväädivere ja luuüdi maksimaalne sisaldus CD34-positiivsete mononukleaarsed rakud fraktsioonis on vastavalt 1,6 ja 5,0%, maksimaalne tase kolooniaid moodustavate ühikute alapopulatsioonis CD34 + rakud - 80 ja 25%, kokku kloonimisefektiivsuse CD34 + rakkudes - 88 ja 58%, maksimaalne kolooniat moodustavat rakkude kõrgproliferatiivset potentsiaali (HPP-CFC in -populyatsii CD34 +) - 50 ja 6,5%. Tuleb lisada, et kloonimise efektiivsuse CD34 + CD38-rakud ja võime reageerida tsütokiini stimulatsiooni samuti kõrgem vereloome tüvirakkude nabaväädivere.

Kombineeritud fenotüübilise antigeenide Thy-1, CD34 ja CD45RA kinnitab kõrgproliferatiivset suutlikkust nabaväädivere Vereloomerakkude ja ekspressiooni kolme antigeenide pinnal juhtmest vererakud näitab, et nad kuuluvad tüvirakk. Lisaks on kindlaks tehtud, et nabaväädi veri sisaldab rakke, millel on CD34 + fenotüüp, millel ei ole lineaarse diferentseerumise markereid. Tase nabaväädivere rakkude sub koos fenotüübilise profiil CD34 + / Lin on ligikaudu 1% koguarvust CD34-positiivsete rakkude. Vereloome rakkudes avada nabaväädivere kui lümfoidrakuliinides ning mitmed lineaarne pluripotentsed müeloidraku diferentseerumine, mis näitab, et nad kuuluvad tüvirakke.

Nagu juba mainitud, on olulised erinevused luuüdi ja nabaväädivere vahel siirdamiseks kasutatud vereloome rakkude kogus, mis on saadud ühe protseduuriga. Kui luuüdi siirdamist kaotus rakumassi lahutusprotsessis, külmsäilitamisest, sulatamist ja testimisele on lubatud vahemikus 40-50%, juhtmest vererakud selliseid sündmusi on väga märkimisväärne, kuna kasutamisel vähesuse HSC siirdamist võib olla paika. Vastavalt G. Kogler jt (1998), rakkude siirdamise retsipiendi kehakaalu 10 kg potentsiaali siirdamist (koguarv kogutud nabaväädivere proovid - 2098) võivad kõik olla juhtmest vereproovid, kehakaal 35 kg - 67% ja ainult 25% proovidest suudab tagada efektiivse siirdamise patsientidel kehakaaluga 50-70 kg. See kliiniline olukord viitab vajadusele optimeerida ja parandada nabaväädi vererakkude proovivõtu, paljunemise ja säilitamise olemasolevate meetodite tõhusust. Seetõttu küsimusi standardimise proovivõtu-, katsetamine, eraldamine ja külmsäilitamisest nabaväädivere on nüüdseks laialdaselt arutatud kirjanduses loomiseks vere pangad, selle kasutamine kliinikus, samuti kehtestatakse tingimused ning ladustamise vereloome tüvirakkude nabaväädivere.

[7], [8], [9],

Nabaväädivere hematopoeetiliste tüvirakkude kasutamine meditsiinis

Tavaliselt nabaväädiverest saab eraldada kuni 10 ⁶ vereloome tüvirakkude arvu, harva rohkem. Seega tänase päevani jääb lahtiseks küsimus piisavust kogus nabaväädivere vereloome tüvirakkude arvu taastada vereloomet täiskasvanud saaja. Arvamused sellel teemal olid jagatud. Mõned uurijad usuvad, et see kogus piisav siirdamiseks lapsi, kuid liiga väike siirdamist täiskasvanud inimesele, mille manustamine on optimaalne (7-10) x 10 ⁶ CD34-positiivsete rakkude arv 1 kg kehakaalu kohta - keskmiselt 7 x 10 ⁸ siirdamise kohta. Nendest arvutustest et nabaväädivere proov sisaldab 700 korda vähem kui vereloome tüvirakkude arvu, kui on vaja siirdamiseks üks täiskasvanud patsiendile. Kuid selline kvantitatiivne hindamine toimub analoogiliselt mitmeid luuüdi rakud vereülekandeid ja ignoreerib täielikult arengulised omadused vereloomet.

Eelkõige ei võta arvesse asjaolu kõrgematesse proliferatsioonivõimega vereloome tüvirakkude nabaväädivere võrreldes vereloome rakkudes luuüdi. Need leiud in vitro kolooniat moodustavat potentsiaali viitavad, et ühe annuse võib pakkuda nabanööriverest hematopoeetiliseks lahustamist täiskasvanud saaja. Teiselt poolt, me ei tohiks unustada, et mitmeid HSC väheneb isegi protsessi embrüonaalse arengu: sisu CD34-positiivsete rakkude nabaväädivere on lineaarselt vähendada 5 korda ajavahemiku 20. Nädalat (verd saadi uuringu enneaegse lõpetamise raseduse) 40 rasedusnädalal (Füsioloogilisel tööjõud), millele on lisatud paralellno suurendada pidevalt lineaarne rakudiferentseerumise ekspressiooni markereid.

Puudumise tõttu standardiseeritud lähenemine koguse kindlaksmääramiseks nööri vereproovid eellasrakkude vasturääkivusi optimaalne annus vereloome tüvirakud nabaväädi verest jätkub. Mõned teadlased usuvad, et kui kriteeriumide valiku juhe vereproovid võib kasutada mitmeid tuumaga rakke ja ühetuumalised rakud, ümberarvutamist saaja kehakaalu, mis on nende annus. Mõned autorid usuvad, et CD34 + rakkude minimaalne kvantitatiivne künnis isegi HSC autoloogse siirdamise läbiviimisel on 2 x 10 ⁶ / kg. Kasv annuse Vereloomerakkude kuni 5 x 10 ⁶ rakku / kg (kokku 2,5) annab juba rohkem sobib varase siirdamisjärgseks periood, vähendab haigestumisesündmuste tüsistused ja lühendab perioodi ennetavate antibiootikumiravi.

Vastavalt E. Gluckman jt (1998) hematoloogiaalased edukaks nabaväädi vererakud on sissejuhatuses vähemalt 3,7 x 10 ⁷ tuumadega rakku 1 kg retsipiendi kehakaalu. Vähendades annuse vereloome tüvirakkude 1 x 10 ⁷ või vähem tuumadega rakku 1 kg kehakaalu kohta patsiendi vajadustest ja riski siiriku hülgamiseni korduvad vähkide veres suureneb järsult. Tuleb tunnistada, et pärast GSG allotransplantatsiooni hemopoeesi kiireks taastamiseks vajalik eellasrakkude minimaalne arv ei ole veel teada. Teoreetiliselt on seda võimalik saavutada kasutades üksikut rakku, kuid kliinilistes luuüdi siirdamine kiire ja stabiilne implanteeritavust garanteeritud vereülekande vähemalt (1-3) × 10 ⁸ tuumaga rakku 1 kg patsiendi kehakaalu kohta.

Hiljutine üksikasjalik uuring, mis määrati onkohematoloogias HSC optimaalse hulga määramiseks, hõlmas kolme rühma patsientide vaatlust, mis olid eraldatud transplantaadi materjali CD34-positiivsete rakkude sisaldusest. Esimese rühma patsiendid said (3-5) x ¹⁰⁶ rakku / kg kohta. GSK annuse manustamist teise grupi moodustasid (5-10) x 10 ⁶ rakku / kg ja kolmandasse rühma patsientidest siirdatud rohkem kui 10 x 10 ⁶ CD34 + rakku / kg. Parimaid tulemusi täheldati transplantatsiooni saanud patsientide rühmas, kelle CD34-positiivsete rakkude arv oli võrdne (3-5) x 10 ⁶ / kg. Siirdatud rakkude annuse suurenemine üle 5 × 10 ⁶ / kg ei andnud statistiliselt olulist kasu. Seega väga suur sisaldus HSC siirdamisprotsessis (> 10 x x 10 ⁶ / kg) seostati märkimisväärsel hulgal järelejäänud reinfusiooni kasvajarakkude, mis viib haiguse taastumise korral. Siirdatud allogeensete eellasrakkude arvu ja "transplantaadi ja peremehe" reaktsiooni arengu vahel ei olnud otsest seost.

HSC-i nabaväädi vereringi siirdamise ülemaailmne kogemus kinnitab nende suurt taastumisvõimet. Nabaväädi vereringi siirdamise kiirus korreleerub sisestatud nukleaarsete rakkude arvuga. Parimad tulemused on täheldatud siirdamisel 3 × 10 ⁷ / kg, luuüdi korral on see annus 2 × 10 ⁸ / kg. Koordineerimiskeskuste andmetel tehti maailmas 2000. Aasta lõpus 1000 nabanute vererakkude siirdamist, peamiselt doonorliigetest (83%). Loomulikult tuleks nabaväädi verd hemoblastoosiga patsientidel siirdada luuüdi alternatiivina.

Kuid vastsündinute milline Cordova allikas vereloomekudedega soodustades tingitud juuresolekul funktsionaaltunnustega selle Gcw. Kuid ainult kliiniline kogemus võib anda vastuse küsimusele adekvaatsuse proovi nabaväädivere täiskasvanud vereloome lahustamiseks saajale aplaasia vereloomet. Siirdamine nabaväädivererakkude kasutatakse paljude haiguste ravil kasvaja ja mitte-tuumori milline: leukeemiate ja müelodüsplastiliste sündroomide, mitte-Hodgkini lümfoomi ja neuroblastooma, aplastiline aneemia, kaasasündinud Fancon'i aneemia ja Diamond Black ventilaator, puudust leukotsüütide adhesiooni, Barr sündroom, Gunther haiguse Harlera sündroom, thalassemia .

Tähelepanuväärne tähelepanu ja eraldi uuringud väärivad nabaväädivere verd moodustavate rakkude siirdamise immunoloogilisi aspekte. On näidatud, et kui tegemist on siirdamise nabaväädivere tüvirakke doonoritelt pärit mittetäieliku HLA sobivusega siirdamist Tulemused on üsna rahule, et vastavalt autorid, näidates madalama immunoreaktiivsusest nabaväädivere peale luuüdi.

Üksikasjaliku uuringu rakulise koostise Nabaväädivere näitas omadusi nii fenotüübilise spekter Efektorrakke immuunsüsteemi ja nende funktsionaalset aktiivsust, võimaldades kaaluda nabaväädivere allikana HSC suhteliselt madala riskiga reaktsiooni "transplantaat peremehe". Lisavõimalusi Functional Ebaküpsuse immunokompetentsete nabaväädivererakkude Tuleb märkida tasakaalutus tsütokiini produktsiooni ning väheneb tundlikkus tsütokiinide uue regulatsiooni immuunvastust. Tulenevad sellest, et aktiivsuse pärssimine tsütotoksiliste lümfotsüütide peetakse soodustavaks teguriks teket immunoloogilise tolerantsuse siirdatud vereloomekudedega. Populatsiooni nabanööri vere lümfotsüütidest, vastandina perifeerses veres ja luuüdis täiskasvanutelt doonorid, domineerivad mitteaktiivne, ebaküpsete rakkude ja supressorrakkudeks. See näitab nabaväädivere T-lümfotsüütide vähenenud kättesaadavust immuunvastusele. Oluliseks tunnuseks monotsüütide populatsiooni nabaväädivererakkude on madala sisaldusega funktsionaalselt aktiivne täielik ja antigeeni esitlevate rakkude.

Ühelt poolt, madala küpsuseastmest efektorrakkudes immuunsüsteemi nabaväädivere näidud laieneb selle kasutamine kliinikus, kuna need funktsioonid võimaldavad vähendada intensiivsust immuunsüsteemi konflikt doonori ja retsipiendi rakke. Aga teisest küljest, me teame, et on olemas korrelatsioon reaktsiooniastmele "äratõukehaigus" ja siirdamise kasvajavastane toime, st mõju arengule "siiriku leukeemia". Seoses sellega viidi läbi uuring nabaväädi verre rakkude kasvajavastase tsütotoksilisuse kohta. Tulemused näitavad, et vaatamata tegelikult nõrgenenud immuunvastus nabaväädivere rakkude antigeense stimulatsiooni aktiveeritud esiteks on loomulikud tapjarakud ja killeropodobnymi rakke, mis osalevad aktiivselt mehhanismide rakendamist kasvajavastane tsütotoksilisust. Veelgi enam, nabaväädivere lümfotsüüdi alampopulatsioonidest leiti fenotüübile CD16 + CD56 + ja CD16 "TcRa / p +. Oletatakse, et need rakud on aktiveeritud vormis rakendada reaktsiooni" siiriku leukeemia ".

Instituudis Oncology, Academy of Medical Sciences Ukraina krüosäilitati Vereloomerakkude nabaväädiverest manustati vähipatsiendid püsivad hüpoplaasia vereloomet keemiaravist tingitud ja kiiritusravi. Nendel patsientidel, transplantatsioon vereloome tüvirakkude nabaväädivere efektiivselt taastada vere allasurutuse, mida tõendab püsivalt tõusnud küpse moodustatud elementide arvu perifeerses veres, samuti suurenenud iseloomustavate näitajate rakulise ja humoraalse immuunsuse. Umbroloogilise toime stabiilsus pärast nabaväädi verd sisaldavate vereliblede siirdamist võimaldab jätkata kiiritust ja kemoteraapiat, katkestamata ravikuuri. On tõendeid suurema tõhususe siiriku tüviraku nabaväädivere vähihaiget: igaaastane kordumise oht kasvaja nende kasutamine oli 25% versus 40% patsientidel, kellel on siirdatud allogeense luuüdi geen.

Toimemehhanism külmsäilitatud nabaväädivere tüvirakke tuleks pidada tulemus humoraalse stimulatsiooni vereloomet saajate poolt põhjustatud unikaalne võime vastsündinu rakud autokriini vereloomerakkude produktsiooni kasvufaktoreid, samuti selle tagajärjel ajutise implanteeritavust doonorirakkude (kui kinnitust - märkimisväärne suurenemine sisu perifeerse vere lootehemoglobiini saaja 7-15 päev pärast transfusiooni võrreldes lähteandmetega). Puudub saajate nabaväädivere Vereülekandega reaktsioone - tulemus selle suhteline tolerants immuunrakke, samuti usalduse kriteeriumiks kasulikkust krüosäilitati bioloogilist materjali.

Eellasrakud T lümfotsüütide killer nabaväädivere võimeline aktiveerimise mõjul eksogeense tsütokiini stimulatsiooni, mida kasutatakse, et arendada uusi ex vivo ja in vivo esilekutsumise meetodeid kasvajavastane tsütotoksilist lümfoidrakku järgnevaks siirdamist immuunravi. Lisaks "Ebaküpsuse" genoomi nabanööri vere immuunrakud lahtrisse nende kasutamist, et suurendada kasvajavastane toime molekulaarse modelleerimisega.

Tänapäeval on nabaväädi veri leidnud laialdast rakendust peamiselt pediaatrilises hematoloogias. Lastel ägeda leukeemia allotransplantatsiooniks vereloome tüvirakkude nabaväädivere võrreldes luuüdi allograftide, vähendab oluliselt esinemissagedus reaktsiooni "transplantaat peremehe". Siiski tuleb märkida, pika perioodi vältel neutropeenia ja trombotsütopeenia ja kahjuks kõrgemal tasemel 100 päeva suremuse siirdamisjärgseks. Pikem taastumine perifeersest verest granulotsüüdid ja vereliistakud võiks olla põhjustatud ebapiisavast diferentseerumise üksikute alampopulatsioonidele CD34 positiivsete rakkude Nabaväädivere, millest annab tunnistust madalast imendumist radioaktiivsete rhodamine ja madala ekspressiooni CD38 antigeene oma pinnal.

Samal ajal, transplantatsiooni vereloome tüvirakud nabaväädi verest täiskasvanud patsientidel, teostati puudumise tõttu nii ühilduva sõltumatutele luuüdi doonor, samuti võimalusi mobiliseerida HSC näitas kõrget aastast tagasilanguse elulemus vanustel patsientidel alla 30 aasta (73%) . Abisajate vanusevahemiku (18-46aastased) laiendamine viis ellujäämise vähenemiseni 53% ni.

Kvantitatiivne analüüs Rakkude fenotüübile CD34 + luuüdi ja nabaväädivererakkude oli kõrgem (3,5 korda) nende sisu luuüdis, kuid nabanööriverest ilmnes märkimisväärne ülekaal rakud fenotüübilise profiil CD34 + HLA-DR .Izvestno, chtokletkikrovisimmunologicheskimi CD34 + HLA-DR vohada aktiivsem kui rakkude immuunfenotüübi CD34 + HLA-DR +, nagu seda kinnitas eksperimentaaluuringuid kasvu pikaajalise kultuuri vereloome rakkudes in vitro. Primitiivne tüvirakkude koos fenotüübi CD34 + CD38 sisalduv nabaväädivere ja luuüdi, kuid nabaväädivere rakkude markeri seatud CD34 + CD38 on kõrgem klonogeenses aktiivsus kui Vereloomerakkude sama fenotüübi isoleeritud täiskasvanud doonori luuüdi. Lisaks nabanööriverd rakkude CD34 + CD38 immuunfenotüübi hakkab vohama vastuseks stimulatsioonile tsütokiinide (IL-3, IL-6, G-CSF) ja paljundada 7 korda rohkem kolooniaid pikas perspektiivis kultuurides peale luuüdi rakke.

Nabaväädivere tüvirakkude pangad

Korralikuks arengu uue valdkonna praktilise meditsiini - siirdamise nabaväädivere tüvirakke, samuti teostada siirdamine Vereloome luuüdi tüvirakke, sul peab olema võrk vere pangad, mis on juba asutatud USAs ja Euroopas. Riiklike nabaväädivere pankade võrgustikke ühendab Netcordi pankade ühendus. Loomise teostatavust rahvusvaheline ühendus nabaväädivere pangad on tingitud asjaolust, et teostada sõltumatut siirdamisest vaja suur hulk proove nabaväädivere kirjutatud, võimaldades valida HLA-identne doonori. Ainult selliste pankade süsteemi loomine, kellel on eri HLA-tüüpi vereproovide säilitamine, võib tõesti lahendada vajaliku doonori leidmise probleemi. Sellise nabaväädivere pankade süsteemi korraldamine eeldab eetiliste ja õiguslike normide esialgset väljatöötamist, mida praegu arutatakse rahvusvahelisel tasandil.

Ukraina nabaväädivere pankade loomiseks on vaja välja töötada mitmed sätted ja dokumendid.

Kõigepealt on tegemist nabaväädivere proovide võtmise, fraktsioneerimise ja külmutamise meetodite standardiseerimisega. On vaja reguleerida nabaväädivere kogumise eeskirjad haiglates, vastavalt nõuetele meditsiinieetika, et määrata minimaalne nabaväädivere, mis sätestab edukas siirdamine. Tuleb võrreldes ja standardiseerimisel erinevad kriteeriumid kvaliteedi hindamise ja vereloome eellasrakkude samuti HLA-tüvemääramismeetodite ja diagnoosimeetodite geneetiliste ja nakkushaigused, mida saab edastada infusiooniprotseduurist Nabaväädivere rakud seatud üldised valikukriteeriumid tervetelt doonoritelt. Samuti on oluline arutleda seerumi, rakkude ja nabaväädi verest eraldatud DNA-de jaoks eraldi ladustamisrajatiste loomist.

On hädavajalik korraldada nabaväädivere andmete arvutivõrk, et rakendada suhteid luuüdi doonorite registritega. Rakkude transplantoloogia edasiarendamiseks tuleks välja töötada spetsiaalsed protokollid nabaväädivere ja luuüdi siirdamise tulemuste võrdlemiseks HLA-identsetest sugulastelt ja mitteseotud doonoritelt. Seistes eetilisi ja õiguslikke probleeme kliinilise kasutamise nabaväädivererakkude aitab standardiseerida dokumentatsiooni, sealhulgas teadliku nõusoleku vanemad, samuti teade ema või sugulaste lapse eristab geneetilise ja / või nakkushaiguste.

Määravaks arengu tingimus rakkude siirdamine Ukraina on võtta riikliku programmi annetamise eest tüvirakkude ja rahvusvahelise koostöö arendamine teiste riikide kaudu World Association of doonori luuüdi (WMDA), National US doonori luuüdi programmi (NMDP) ja teiste registritega.

Üldistades endiselt Lühikest aega vereloome tüvirakkude siirdamine Nabaväädivere märgime, et esimene eeldus võimalust kliinilise rakenduse Nabaväädivere, varajastel 70-ndatel, kinnitati 80 aastat tulemused eksperimentaalsed uuringud loomadel ja 1988 aastal läbi viidud maailma esimene siirdamise vereloome tüviraku nabaväädivere ja seejärel hakkas arenema ülemaailmse võrgustiku nabaväädivere pangad. Pärast 10 aastat, patsientide arvu siirdatud Vereloomerakkude nabanööriverd lähemale 800. Nende hulgas oli patsientide erinevate kasvajaliste haiguste (leukeemia, lümfoom, soliidtuumorid) ja mitte-tuumori (kaasasündinud immuunpuudulikkus, aneemia, seotud haiguste ainevahetushäired) iseloomuga.

Nabaväädi veres on varase ja pühendunud rakkude eelkäijate sisu suurem kui täiskasvanu perifeerses veres. Granulotsüütide-makrofaagide kolooniaid moodustavate üksuste ja nende proliferatiivse potentsiaali arvuga ületab nabaväädiver märkimisväärselt ka täiskasvanute perifeerset veri isegi pärast kasvufaktorite kasutuselevõtmist. In vitro pikaajalistes rakukultuurides oli nabaväädi vererakkude suurem proliferatiivne aktiivsus ja elujõulisus kui luuüdi rakud. Kriitiline hetki siirdamise Nabaväädivere tüvirakud on hematopoeetiliseks võimalikku arvu ja tuumaga rakkudes, esinemine tsütomegaloviirusnakkusega, HLA mahutavad doonor ja retsipient, kehakaalust ja patsiendi vanusest.

Kuid siirdamise nabaväädivere tüvirakke tuleks kaaluda alternatiivina luuüdi siirdamine raviks Tugeva verehaigused, eriti lastel. Kliinilised probleemi nabaväädi vererakud järkjärgult lahendatud - on olemas juba üsna tõhusad valimivõtumeetodit, lahutamine ja külmsäilitamisest nabaväädivererakkude eeldusel, et tingimused moodustamise nabaväädivere pangad, katsemeetodite leevenevad tuumadega rakkudes. Optimaalne lahutamise ajal suurte toorikute nabaväädivere vereloome tüvirakkude arvu kehtestamisel pangad tuleks pidada 3% želatiini lahus ja 6% hüdroksüetüültärklist lahusega.

Perehrestenko P. Jt (2001) õigesti märgivad, et siirdamine nabaväädivere tüvirakke peaks langetama õige koha kompleksi ravivõtted ületamiseks depressiooni vereloomet erineva päritoluga, nagu GSK nabaväädivere erine mitmeid märkimisväärseid eeliseid, mille hulgas olulisem on suhteliselt lihtne koristamist mingit ohtu doonorile, neonataalsete rakkude vähene saastatus viirustega ja suhteliselt madal transplantatsiooni maksumus. Mõned autorid arvavad, et nabaväädi vererakud harvemini kui luuüdi rakud kaasneb seotud tüsistuste reaktsioon "transplantaat peremehe", mis on tingitud nende arvates, nõrk ekspressiooni juhtmest vererakud HLA-DR antigeene ja nende ebaküpsus. Siiski Põhipopulatsiooni tuumaga rakkudes Nabaväädivere on T-lümfotsüüte (SDZ-positiivsete rakkude), mille sisu on umbes 50%, mis on 20% vähem kui perifeerses veres täiskasvanu, kuid fenotüübilisel erinevusi alampopulatsioonidele T-rakud nendest allikad on ebaolulised.

Tegurite hulka, mis mõjutavad otseselt ellujäämine tüvirakkude siirdamine Nabaväädivere peaksime märkida ka patsiendi vanusest (parimad tulemused on näha saajate vanuses kuni 5 aastat), varase haigusdiagnoos ja leukeemia vorm (kasutegur on oluliselt kõrgem äge leukeemia). Suur tähtsus on närbikimpumba veritsusjärgsete nukleotiidide annus ning nende HLA ühilduvus retsipiendiga. Ei ole juhus analüüs kliinilist efektiivsust nabaväädivere siirdamise GSK in Oncology ja hematoloogia näitab parimaid tulemusi abil ravimise related siirdamine üheaastane haigusvaba elulemuse sel juhul jõuab 63%, samas kui sõltumatutele siirdamise - vaid 29%.

Seega tekitab suure hulga tüvirakkude nabaväädivere ja kõrge repopulyatsionnaya võimet vastsündinute vereloome tüvirakkude arvu teeb need sobivaks allogeense siirdamise patsientidel hematoloogilise vähiga. Kuid pange tähele, et rekapitulatsiooni vereloomet pärast siirdamist vereloome tüvirakkude nabaväädivere "venitatakse aeg": taastades sisu perifeerses veres neutrofiilid esineb tavaliselt lõpupoole 6. Nädalal ja trombotsütopeenia nähtus kaovad tavaliselt pärast 6 kuud. Lisaks ebaküpse vere moodustavate rakkude Nabaväädivere ei välista immunoloogilise konflikti: raske kuluga ägeda ja kroonilise reaktsiooni "transplantaat peremehe" täheldatud vastavalt 23 ja 25% saajatele. Retsidiividest äge leukeemia lõpuks esimese aasta jooksul pärast nabanööri vererakud leidub 26% juhtudest.

[10], [11]