Artikli meditsiiniline ekspert
Uued väljaanded
Southern blotting
Viimati vaadatud: 05.07.2025
Kõik iLive'i sisu vaadatakse meditsiiniliselt läbi või seda kontrollitakse, et tagada võimalikult suur faktiline täpsus.
Meil on ranged allhanke juhised ja link ainult mainekate meediakanalite, akadeemiliste teadusasutuste ja võimaluse korral meditsiiniliselt vastastikuste eksperthinnangutega. Pange tähele, et sulgudes ([1], [2] jne) olevad numbrid on nende uuringute linkideks.
Kui tunnete, et mõni meie sisu on ebatäpne, aegunud või muul viisil küsitav, valige see ja vajutage Ctrl + Enter.
Southern blotting (mille töötasid välja E. Southern ja R. Davis 1975. aastal) on peamine meetod, mida praegu kasutatakse konkreetse haiguse geenide tuvastamiseks. Selleks ekstraheeritakse patsiendi rakkudest DNA ja töödeldakse seda ühe või mitme restriktsiooniendonukleaasiga. Saadud fragmentidele tehakse elektroforees, mis võimaldab neid suuruse järgi eraldada (väiksemad fragmendid liiguvad geeli pooridest kiiremini läbi). Seejärel kantakse (trükitakse uuesti) fragmendid nitrotselluloosfiltrile, millele kihitakse radioaktiivselt märgistatud sond. Sond seondub ainult komplementaarse järjestusega. Seejärel määratakse autoradiograafia abil soovitud genoomse DNA fragmendi asukoht elektroferogrammil.
Tahkele maatriksile tilkhaaval ilma eelneva piirangu ja elektroforeesita tahkele maatriksile kantud märgistatud DNA-sondiga hübridiseerimist nimetatakse punkt- või piluhübridisatsiooniks, olenevalt filtril oleva DNA-täpi konfiguratsioonist (vastavalt ümmargune või piklik).
[