Trombotsüütide agregatsioon ristotsetiiniga (von Willebrandi faktor )

Von Willebrandi faktori aktiivsuse võrdlusväärtused (norm) on 58–166%.

Von Willebrandi faktorit sünteesivad endoteelirakud ja megakarüotsüüdid. See on vajalik trombotsüütide normaalseks adhesiooniks ja sellel on võime pikendada VIII faktori poolväärtusaega. Plasma hüübimisfaktor VIII – antihemofiilne globuliin A – ringleb veres kolme alaühiku kompleksina, mida nimetatakse VIII-k (hüübimisühik), VIII-Ag (peamine antigeeni marker) ja VIII-vWF (VIII-Ag-ga seotud von Willebrandi faktor). Arvatakse, et von Willebrandi faktor reguleerib antihemofiilse globuliin A (VIII-k) hüübimisosa sünteesi ja osaleb veresoonte-trombotsüütide hemostaasis.

Von Willebrandi tõbi on pärilik haigus, mida iseloomustab pikenenud veritsusaeg, ristotsetiini kofaktori aktiivsuse vähenemine ja VIII faktori koagulandi aktiivsuse vähenemine (erineval määral). Haiguse kliinilised ilmingud on sarnased trombotsütopaatiaga. Siiski võivad patsientidel, kellel on VIII faktori aktiivsus oluliselt vähenenud, esineda hematoomid ja hemartroos.

Laboratoorsete uuringute põhjal, mis võimaldavad meil määrata von Willebrandi faktori struktuuri ja aktiivsust, eristatakse järgmisi haiguse vorme.

• I tüüpi (70% kõigist juhtudest) iseloomustab ristotsetiini kofaktori (von Willebrandi faktor) ja koagulandi aktiivsuse (VIII-k) kerge langus von Willebrandi faktori normaalse makromolekulaarse struktuuriga.
• II tüüp: põhineb von Willebrandi faktori kõrgmolekulaarsete polümeeride selektiivsel defitsiidil, mis on tingitud selle valgu struktuuri häiretest.
  • IIB tüüpi põhjustab von Willebrandi faktori ja trombotsüütide suurenenud interaktsioon ning trombotsüütide agregaatide suurenenud kliirens viib trombotsütopeeniani.
• III tüüpi iseloomustab von Willebrandi faktori raske kvantitatiivne defitsiit, mille tulemuseks on VIII faktori aktiivsuse kliiniliselt oluline vähenemine (VIII-k).

Von Willebrandi faktori sisaldust määratakse juhtudel, kui veritsusaeg on pikenenud, trombotsüütide arv on referentsväärtuste piires ja trombotsüütide düsfunktsiooni ilmseid põhjuseid ei ole. Von Willebrandi faktori hindamiseks määratakse von Willebrandi faktori kvantitatiivne sisaldus (ristotsetiini kofaktori aktiivsuse uuring), uuritakse ristotsetiini poolt indutseeritud trombotsüütide aglutinatsiooni ja VIII faktoriga seotud von Willebrandi faktori antigeenset struktuuri (VIII-vWF).

Von Willebrandi faktori kvantitatiivseks hindamiseks kasutatakse trombotsüütide agregatsiooni määramist ristotsetiiniga plasmas. Ristotsetiini agregatsiooni astme ja von Willebrandi faktori hulga vahel on kindlaks tehtud lineaarne seos. Meetod põhineb selle antibiootikumi (ristotsetiini) võimel stimuleerida von Willebrandi faktori in vitro interaktsiooni trombotsüütide glükoproteiiniga Ib. Enamikul von Willebrandi tõve juhtudest täheldatakse ristotsetiini agregatsiooni häireid normaalse reaktsiooni korral ADP-le, kollageenile ja adrenaliinile. Ristotsetiini agregatsiooni häireid tuvastatakse ka Bernard-Soulier' makrotsütaarse trombodüstroofia korral (ristotsetiini agregatsiooni retseptorite puudumine trombotsüütide membraanil). Diferentseerimiseks kasutatakse testi normaalse plasma lisamisega: von Willebrandi tõve korral normaliseerub ristotsetiini agregatsioon pärast normaalse plasma lisamist, Bernard-Soulier' sündroomi korral aga mitte.

Uuringut saab kasutada ka hemofiilia A (VIII faktori puudulikkus) ja von Willebrandi tõve diferentsiaaldiagnostikas. Hemofiilia korral on VIII-k sisaldus järsult vähenenud ja VIII-fB sisaldus on normi piires. Kliiniliselt avaldub see erinevus selles, et hemofiilia korral esineb suurenenud verejooksuga hematoomi tüüpi ja von Willebrandi tõve korral petehiaalhematoomtüüpi.

Ristotsetiini poolt indutseeritud trombotsüütide aglutinatsioon on enamiku von Willebrandi tõve juhtude puhul vähenenud, välja arvatud IIB tüüp.

VIII faktoriga seotud von Willebrandi faktori (VIII-vWF) antigeenset struktuuri tuvastatakse erinevate immunoloogiliste meetoditega ning von Willebrandi faktori jaotust molekulmassi järgi määratakse agaroosgeelelektroforeesi abil. Neid teste kasutatakse von Willebrandi tõve tüübi kindlakstegemiseks.

Trombotsüütide agregatsiooni uuring erinevate indutseerijatega ei ole mõeldud ainult trombotsüütide agregatsiooni funktsioonide häirete tuvastamiseks. See uuring võimaldab hinnata trombotsüütidevastase ravi efektiivsust, valida individuaalseid ravimiannuseid ja teostada ravimite jälgimist.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]