B -hepatiidi viirus

B-hepatiit on inimese nakkushaigus, mida iseloomustab maksa selektiivne kahjustus viiruse poolt. See hepatiidi vorm on kõigi teadaolevate viirusliku hepatiidi vormide seas kõige ohtlikum. Selle põhjustajaks on B-hepatiidi viirus (HBV).

Esimese antigeeni B-hepatiidi viirus on avastatud B. Blumberg 1964. Aastal seerumi Austraalia aborigeen ning patogeeni leiti aastal 1970, D. Dane (jt.), Ja sai nime Dane osakesi, kuna puudus kindlus, et , et see on tõesti viirus, mitte selle komponendid. Hiljem kadusid kõik kahtlused, kuna Dane'i osakestes leiti genoomne DNA ja viiruse DNA-sõltuv DNA polümeraas. Virion sisaldab kolme peamist antigeeni, mille jaoks järgmised nimetused lisati 1974. Aastal:

• HBsAg on pindmine või lahustuv või Austraalia antigeen.
• HBcAg on tuumantigeen (kaasantigeen).
• HBeAg - e antigeeni, on lokaliseeritud südamikus virioni ning erinevalt HBcAg mitte ainult esineb virioni, aga ka vereringes vabas vormis või kompleksis anti-HBeAg. HBV aktiivsest replikatsioonist hepatotsüütidega sekreteeritakse verre.

Pinnaantigeen - HBsAg - eksisteerib kolme morfoloogiliselt erineva variandi kujul: 1) esindab kogu virioni superskeemi; 2) suurtes kogustes esineb sfäärilise kujuga 20 nm läbimõõduga osakesi; 3) kiudude kujul pikkusega 230 nm. Keemiliselt on need identsed. Kompositsioon on kokku HBsAg antigeeni ja kaks paari vastastikku välistavad tüübispetsiifilisest määravate: d / y ja w / r, mistõttu on neli peamist alatüüp HBsAg (ja seega HBV): adw, ADR, ayw ja aur. Antigeen a annab üldise rist immuunsuse moodustumise kõigile viiruse alatüüpidele.

Tegelikult on virion, Daini osake, sfääriline ja läbimõõt 42 nm. Virioni supercapsid koosneb kolmest valgust: peamine (peamine), suur ja keskmine. Genoom on ümbritsetud kapsiidiga ja seda kujutab kaheahelaline rõngakujuline DNA massiga 1,6 MD. DNA koosneb ligikaudu 3200 nukleotiidist, kuid selle "pluss" on 20-50% lühem kui miinusmärk. Pika hõõgniidi 5 'otsaga on viiruspetsiifiline valk kovalentselt seotud. Mõlema ahela 5 'otsad on komplementaarsed ja moodustavad kleepuvaid järjestusi pikkusega 300 nukleotiidi, nii et kiud on suletud ringis. Gi + C sisaldus virioni DNA-s on 48-49 mooliprotsenti. Virioni südamikus on peale genoomse DNA-viiruse DNA-sõltuva DNA polümeraasi. HBV-i "miinus" -valik DNA sisaldab ainult neli geeni (S, C, P ja X), kuid need on väga tihedalt organiseeritud. Geenid S, C, P, X kattuvad tihedalt ja kontrollivad järgmiste toodete sünteesi. Gene S koodid peamise kattevalgu sünteesiks ja sisaldab kogu teavet HBsAg pinnaantigeeni kohta. Lisaks kodeerib see keskmise ja suure ümbrise valkude sünteesi. Valgud sisaldavad ühist COOH-terminust, kuid nende tõlge algab kolme erineva initsiaatori koodoniga. Gene C koodid kapsiidi valkude (HBcAg ja HBeAg) sünteesiks; kuigi neid valke kodeerib üks geen, on nende tõlkimise viisid erinevad. Gene P on suurim. See hõlmab osa kõigist kolmest teisest geenist ja kodeerib viiruse replikatsiooniks vajalikke ensüüme. Eelkõige kodeerib see "pöördtranskriptaasi", ensüümi RNA-ase D-d, "miinus" -ahela 5'-terminaalset valku. Geeni X kodeerib valke, mis reguleerivad kõigi viiruse geenide ekspressiooni (ekspressiooni), eriti 17 kDa massiga valku, mis on geeni transkriptsiooni transaktivaator.

Valgud, mis moodustavad pinnaantigeeni, eksisteerivad glükosüülitud (gp) ja mitte glükosüülitud kujul. Glükosüülitud on gp27, gp33, gp36 ja gp42 (numbrid tähistatakse m-des kD-des). Superskeemiline HBV koosneb peamistest või aluselistest S-valkudest (92%); keskmine M valk (4%) ja suur või pikk L-valk (1%).

• Peamine valk, p24 / gp27 või peamine valk (valk S) on HBV ümbrise põhikomponent. Muude koorevalkude puudumisel polümeriseerub ja moodustab sfäärilised osakesed läbimõõduga 20 nm, mis koosnevad 100 polüpeptiidi molekulist.
• Suure valgu, p39 / gp42 või pikk valk (L valk) esineb kõigil kolmel kujul HBsAg-st. See mängib olulist rolli virionide morfogeneesi ja nende väljumisel rakust. L-valk sisaldab järjestust M-valgu, mida täiendavad N-otsas järjestusi 108 (ayw) või 119 (adw, ADR, ayr) aminohappejääke kodeeritud NPE-Sl-S-geeni piirkonnas.
• Keskmine valk - gp33 / gp36 või valk M on olemas ka kõigis kolmes HBsAg morfoloogilises vormis. M proteiin M sisaldab N-otsas 55 geeni S-pre-52-piirkonna poolt kodeeritud 55 aminohappejääki. Eeldatakse, et see ala mängib olulist rolli hepatiit B viiruse tuvastamisel piiratud peremeesorganismi vahemikus (inimese, šimpansi ahv) levinud maksa rakkudes. S-geeni npe-S piirkondade poolt kodeeritud valgujärjestustel on kõrge immunogeensus ja nende determinandid paiknevad virioni pinnal. Seetõttu on nende antigeenide vastased antikehad olulised B-hepatiidi immuunsuse tekkeks.

Viiruslike valkude süntees kontrollitakse tihedalt transkriptsiooni ja translatsiooni tasemel. Viiruse genoomi transkriptsioonis sünteesitakse kahte tüüpi mRNA:

• väiksem - 2100 nukleotiidi - kodeerib membraani peamist ja keskmist valgud;
• suur - 3500 nukleotiidi, st pikem kui genoomne DNA ise; see sisaldab pikkusega 100 nukleotiidi terminali kordusi.

Selline mRNA kodeerib kapsiidi valku ja P geeni tooteid. See on ka viiruse DNA replikatsiooni mall. Genoomi osana on olemas võimendajad (transkriptsiooni võimendajad) - reguleerivad elemendid, mis aktiveerivad kõigi viiruse geenide ekspressiooni ja toimivad peamiselt maksarakkudes. Eriti ekspresseeritakse geeni S väga kõrgel tasemel ainult maksarakkudes ja steroidhormoonide mõju all. See asjaolu selgitab, miks meestel täheldatakse kroonilist B-hepatiidi ja maksavähki (hepatoom) sagedamini kui naistel, kelle steroidhormoonid on madalamad.

B-hepatiidi viiruse teised regulatiivsed elemendid moduleerivad (kontrollivad) üksikute valkude sünteesi taset. Näiteks suures valgus sünteesitakse ainult väikestes kogustes. Enamik neist on nakkavate virionide pinnal. Ja peamine valk ja vähemal määral keskmine valk sünteesitakse suurtes kogustes ja jäetakse rakkudele pinna antigeeni osakesed, mis seerumis sisaldavad palju kordi rohkem kui küpsed virionid. Pinnaantigeeni osakeste arv võib olla 1011 -1013 1 ml vere kohta (mitusada μg).

Hepatiit B viirus on isoleeritud uude viiruste perekonda - Hepadnaviridae, perekond Orthohepadnavirus. Sarnaseid hepadnaviiruseid leiti mitmesugustest loomadest (maapirni valkud, tuhmad, prahtukasid, Pekingi pardid).

Hepadnaviiruste paljunemine toimub ebatavaliselt. Eelkõige toimub genoomse DNA replikatsioon läbi vaheühendi - RNA, st pöördtranskriptsiooni mehhanismiga.

B-hepatiidi viiruse elutsükkel.

• Rakkude adsorptsioon.
• Tungimise kaudu rakkudest retseptor-vahendatud endotsütoosi mehhanismi (piirneb auku -> piirneb viaal -> lüsosoomi -> nukleokapsiidi sisenemisel ja väljumisel viiruse genoomi hepatotsüütilises nucleus).
• Intratsellulaarne reproduktsioon.

Tungides rakku jõuab lühike ("pluss") DNA ahel pikenemas (lõpetab). Tuum raku DNA-sõltuv RNA polümeraas sünteesib RNA suurus 3500 nukleotiidi (pregenom) mRNA ja väiksemate jaoks on viirusvalkude sünteesi. Seejärel pakutakse pregeeni ja viiruse DNA polümeraas uudset sünteesitud kapsiidi, mis viiakse tsütoplasmasse. Siin esineb eelkäppade pöördtranskriptsioon. See sünteesib uut "miinus" -funktsionaalset DNA-d. Pärast minus-DNA-i sünteesi lõppu hävitatakse pregenoomne RNA. Viiruse DNA polümeraas "miinus" ahelal sünteesib "pluss" -ahelat. Viiruslik DNA, mis on nüüd kaheahelaline, võib rakus püsida üsna pikka aega ja naasta järgmise replikatsioonitsükli tuumesse. Kui uue viiruse osakese ei allutata täiendavalt replikatsiooni nukleokapsiidi moodustatud läbiva rakumembraani, kaetud superkapsidom pungade rakust ja siis peatub lühiajalist pikendamist "pluss"-ahela DNA. Selle põhjuse pikkus erineb. Tüüpilise ägeda hepatiidi vorm B-seroloogiline markerid üksteisele järgnevalt ilmub veres: HBsAg, HBeAg ja antikehad (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg ja anti-HBsAg.

Kompositsioon B-hepatiidi viiruse on onkogeen, kuid leidis, et tungimast rakulise kromosoomi (selle erinevates osades), viiruse DNA võib olla põhjustatud nende erineva geneetilise reguleeritav - kustutatud, translokeerumisel amplifikatsiooni, mis võib põhjustada arengut maksavähk - üks viirushepatiidi B kõige tõsisematest tagajärgedest.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

B-hepatiidi viiruse vastupanu

B-hepatiidi viirus on väga vastupidav. Toatemperatuuril jääb see elujõuliseks 3 kuud, külmutatud olekus - juba mitu aastat. Viirus on täielikult inaktiveeritud autoklaavis (120 ° C) tagasijooksu temperatuuril 30 minutit, kuiva soojuse temperatuuril 180 "C juures 60 min, 60 ° C -. Suhe 10 tundi resistentsed happelises keskkonnas, kuid see hävitatakse leeliselise. Viirus sureb, kui seda töödeldakse H202, kloramiini, formaliini, fenooli ja UV-kiirgusega.

B-hepatiidi patogenees ja sümptomid

Viirus on hematogeenne süstimine otse maksa. Hepatiidi patogeneesil on oluline autoimmuunhumoraalne ja rakuline vastus. Oletatakse, et hepatotsüütilises kaotuseriski mitte niivõrd otsese mõju viiruse enda, vaid vastuvõtva immunoloogilised reaktsioonid, mis toimuvad seoses muutmisega rakumembraani viirusvalkude mis indutseerivad välimuse autoantikehade maksarakud. Seetõttu võib kroonilise hepatiidi ja maksa tsirroosi tekkimist pidada autoimmuunhaiguseks.

Hepatotsüütide membraanides sisalduvate viirusvalkude rakutalueelseid autoimmuunreaktsioone vahendavad T-tsütotoksilised lümfotsüüdid ja teised maksa tapjarakud. Seetõttu võib maksa ägavat düstroofiat pidada eritava heterotransplantaadi hülgamisreaktsiooniks.

Inkubatsiooniperiood kestab 45 kuni 180 päeva, keskmiselt 60 kuni 90 päeva. B-hepatiidi kliinilist kulgu iseloomustab suur mitmekesisus; haigus võib esineda: varjatud kujul, mida tuvastatakse ainult laboratoorsete meetodite abil, tüüpilisel icteric kujul ja pahaloomulises vormis, mis lõpeb surmaga. Kriisistunud etapi kestus on üks päev kuni mitu nädalat. Icteric periood on tavaliselt pikk ja seda iseloomustab hästi määratletud sümptomid (kollatõbi, hüperbili, tume uriin, kollatõbi kõvakest). Pikaleveninud kujul täheldatakse 15-20% patsientidest ja 90% neist arendada kroonilise B-hepatiidi Kroonilise vormi sagedamini täheldatud autoimmuunsete protsesside poolt kaasneb kõrge sisaldus protivopechenochnyh antikehad, mis tuvastatakse ensüümi immunosorptsioonimeetodiga (IPM). Lastel on B-hepatiit kerge ja sageli ilma kollatõbe, väikelastel - enamasti asümptomaatiline.

Postinfektsioosne immuunsus (humoraalne ja rakuline) on pikk, eluaegne viiruse neutraliseerivate antikehade (anti-HBsAg) tõttu pinnaantigeeni puudumisel veres. Sageli on täheldatud latentset immuniseerimist, mis on tingitud korduvast kokkupuutest HBV-ga, mis põhjustab laialt levinud viiruse immuunsust elanikkonna hulgas. Tavaliselt leevendavad patsiendid ägeda B-hepatiidi vormiga täielikult, kui sellele antikehad kogunevad. Kuid mõnedel juhtudel, vaatamata viiruse antigeeni kõrgele tasemele veres (asjaolust, mis selgitab, miks parenteraalselt esineb infektsioone kõige sagedamini) ei anta selle antikehi. Viirus jääb maksa ja inimese pikka aega, mõnikord kogu elu, muutub krooniline kandja. See asjaolu on ilmselt seotud nõrga immuunvastusega. Kroonilise B-hepatiidi üks levinumaid tulemusi on tsirroos ja maksavähk, mis areneb pärast latentset perioodi kuni 30-50 aastat.

B-hepatiidi epidemioloogia

B-hepatiidi viirusega nakatumise allikas on ainult inimene. Vastupidiselt eelmisele esindused, et hepatiit B viirus esineb ainult parenteraalselt, on nüüd tõestatud, et leitakse eri ja eritiste :. Sülg, ninaneelu sekreedist, fekaalid, pisaravedeliku, sperma, menstruaalvere jne Seega toimub nakatumine mitte ainult parenteraalselt, vaid ka seksuaalse ja vertikaalsed (emalt lootele), t. E. Praktiliselt hepatiit B viiruse võib mitmel viisil.

Maailma hepatiit B surmatakse nii palju inimesi kui kogu maailmasõja ajal. WHO andmetel on HBV kandjate arv 0,1-20% eri riikide või piirkondade elanikkonnast.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

B-hepatiidi diagnoosimine

Praegu on B-hepatiidi diagnoosimise peamiseks meetodiks viiruse või selle pinnaantigeeni (HBsAg) tuvastamiseks vastupidine passiivne hemaglutinatsioonireaktsioon (ROSGA). Nagu juba märgitud, sisaldab pinnaantigeeni veri palju kordi rohkem kui viirus ise (100-1000 korda). ROPGA reageerimisel sensibiliseeritakse erütrotsüüdid B-hepatiidi viiruse vastaste antikehadega. Kui veres on antigeen, ilmneb hemaglutinatsioonireaktsioon. ROPGA on lihtne, mugav, väga spetsiifiline. HBsAg viiruse antigeeni antikehade tuvastamiseks kasutatakse erinevaid immunoloogilisi meetodeid (DSC, RPGA, IFM, RIM jne). Lisaks kasutatakse HBV ja selle antigeenide tuvastamiseks PCR variante.

Erinevate immunoloogiliste meetoditega võib kasutada antikehade avastamiseks seerumis Patsiendile Viirusantigeeni (HBsAg) (RSK, TPHA, sadestusreaktsioone reaktsiooni IPM jne HLR.).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

B-hepatiidi spetsiifiline ennetamine

Arvestades suurt esinemissagedust hepatiit B, samuti, et maailmas on palju kandjad HBV vastavalt WHO soovitustele vaktsineeritud B-hepatiidi vastu on kohustuslikud ja tuleb läbi viia esimesel eluaastal. Vaktsineerimiseks on pakutud kahte tüüpi vaktsiine. Ühe neist valmistamiseks kasutatakse toorainena viiruse kandjate plasmat, kuna selles sisalduv viiruse antigeen on kogustes, mis on piisavad vaktsiini valmistamiseks. Selle vaktsiinitüübi valmistamise põhitingimus on nende täielik ohutus, see tähendab viiruse täielik inaktivatsioon, mida pakub vaktsiini valmistamise tehnoloogia. Erinevat tüüpi vaktsiini valmistamiseks kasutatakse geenitehnoloogia meetodeid, eriti antigeense materjali valmistamiseks kasutatakse rekombinantset pärmi klooni, mis toodab hepatiit B viiruse pinnaantigeeni.

Mõlemad vaktsiinid on väga tõhusad (kaitse 95% vaktsineeritud). Postvaktsiini immuunsuse kestus on vähemalt 5-6 aastat. Nii täiskasvanutele kui ka imikutele ja väikelastele on loodud vaktsiinid, mis on B-hepatiidi ülemaailmse võitluse kõige olulisem komponent. Vaktsineerimise täielik kursus koosneb kolmest süstimisest:

I doos - kohe pärast sündi; II annus - 1-2 kuud; III annus - kuni esimese eluaasta lõpuni.

Need vaktsiinid lisada laiendatud programmi immuniseerimist WHO ja kooskõlas ajakava selle rakendamiseks (vastavalt WHO soovitused 1. Eluaasta jooksul on tehtud vaktsineerimisi tuberkuloosi, lastehalvatuse, hepatiit B, leetrid, teetanuse, difteeria, läkaköha).

Gammaglobuliini, mis sisaldab HBV-vastaseid antikehi, kasutatakse erakorralise passiivse immunoprofilaktikaga patsientidel, kellel on olnud kokkupuude hepatiit B-ga.

B-hepatiidi raviks (ägedad ja kroonilised vormid) kasutatakse interferooni ja amiksiini (endogeense sünteesi indutseerimiseks). Kroonilise hepatiit B ravis on uus ravimi lamivudiin (sünteetiline nukleosiid) efektiivne.