Närvilised tüvirakud

Eksperimentaalne tõendusmaterjal võimalust taastamine KNS rakud saadi palju varem avastus embrüonaalsete tüvirakkude uurimisele, mis näitasid neokorteksis, hipokampuses ja haistmissibulas ajurakkude täiskasvanud rottide, põnev 3H-tümidiini, see tähendab, et võime sünteesida valku ja jagunemist. Tagasi 60s aasta viimase sajandi arvati, et need rakud on lähteainete neuronite ja on otseselt seotud õppimise ja mäluga. Veidi hiljem paljastanud sünapside moodustatud de novo neuronites ja esimene töö kasutamist embrüonaalseid tüvirakke indutseerida neyronogeneza in vitro. Lõpus XX sajandi eksperimendid suunatud diferentseerumise nõuandekogude viiakse neuraalne eellasrakud, dopamiinergiliste ja serotonergiliste neuronite aitasid toimetamine klassikalise mõisted võime närvirakkude imetajate taastuda. Arvukad uuringud on näidanud veenvalt, kuidas reaalsus rekonstruktsioonid neuronite võrgud ja kättesaadavus neyronogeneza kogu perioodi sünnitusjärgse imetajate organismis.

[1], [2], [3], [4], [5], [6]

Närvisüsteemi tüvirakkude allikad

Neuraalsed tüvirakud eraldatakse operatsioonide ajal subventrikulaarses piirkonda külgvatsakesed ja hambakäärus hipokampuse, mis on rakukultuuri moodustamaks neurosfääridest (neuraalne sfäärid) ning pärast dispergeerivad ja preformirovaniya minevikus - kõigi suuremate rakulise KNS liiki või spetsiaalses keskkonnas uue mikrokerad. Suspensioonkultuuridesse dissotsieerunud koe isoleeriti looteaju lõigud periventrikulaarseid tekivad ka neurosfääridest.

Markerid ebaküpsete ajurakke on nestin, beeta-tubuliini III (neuronite markeri line), vimentin, GFAP ja NCAM jaoks immuuntsütokeemilist identifitseerimise monokloonsete antikehade suhtes, mida kasutatakse. Nestin (vahepealsete IV tüüpi neurofilamentide valk) ekspresseerib multipotentsiaalseid neuroektodermilisi rakke. See valk kasutati identifitseerimiseks ja isoleerimiseks multipotent KNS neuroepithelial eellasrakud monoklonaalsete antikehadega Rat-401, mis suudab tuvastada kuni 95% rakkudest neuraaltoru roti embrüote üheteistkümnendal tiinus. Nestini ei avaldata neuroloogiliste tüvirakkude diferentseeritud järeltulijates, vaid see esineb varajastes närvirakkude eellasrakkudes, postmitotiliste neuronite ja varaste neuroblastide korral. Selle markeri abil on tuvastatud neuroepiteelirakkude eellasrakud ja tüvirakkude esinemine kesknärvisüsteemis. Vimentin (vahepealsete III tüüpi neurofilamentide valk) ekspresseeritakse neuraalsete ja gliaalsete eellasrakkude poolt, samuti neuronite, fibroblastide ja silelihasrakkudega. Järelikult pole mõlemal immunotsütokeemilisel markeril närvi varre ja eellasrakkude eraldi identifitseerimiseks vajalik spetsiifilisus. Beeta-III tubuliini luua neuronite tüvega tüvirakke, arvestades I tüübi astrotsüüdid eristab ekspressiooni GFAP ja oligodendrotsüüdid spetsiifilist ekspressiooni galaktotserebrosiidi (Ga! C).

Mitogccn neuraalne tüvirakud on FGF2 ja EGF, toetada vohamist eellasrakud kultuuris tekkega neurosfääridest. Närilise tüvirakkude jagunemise kiirus suureneb märkimisväärselt FGF2 mõju ja ka kombinatsiooni FGF2 + EGF kasutamisel. FGF2 proliferatiivseid toimeid vahendavad FGF2-R1 retseptorid. Hepariin suurendab FGF2 retseptori seondumise afiinsust ja suurendab oluliselt selle mitogeenset toimet neuroepiteelirakkudele. Algjärgus embrüogeneesi FGF2 retseptorite väljendatud roti telencephalon, hilisematel etappidel nende lokaliseerimise piiratud vatsakese tsooni. FGF2-R1 maksimaalne ekspressioon postmüotiliste rakkude korral täheldati pärast varajase neurogeneesi perioodi lõppu. Telencephaloni esialgset arenguperioodi iseloomustab EGF retseptorite ekspressiooni madal tase, peamiselt ventraalse piirkonna rakkudes. Embrüogeneesi hilisemates staadiumides tõuseb EGF-R ekspressioon seljaosas. Näriliste ajust on kõrge afiinsus EGF retseptori muundamine kasvufaktor beeta (TGF-beeta-R) ja mis seondub eelistatult. Kaudselt funktsionaalne roll EGF-R näitavad andmed ajukoore düsgenees eesaju tekivad hilise perioodi embrüogeneesi ja sünnijärgne ontogeny, funktsiooni alandav eesaju, ajukoores ja ectopia surma hipokampuse rakke knockout hiirtel EGF retseptori geeni. Lisaks sellele on TGF-a esinemine toitainekeskkonnas neutraalsfääri moodustamiseks hädavajalik. Pärast eemaldamist kasvufaktoreid konditsioneeritud raku keskkonnaga stop eraldusjoonte ja läbivad spontaanse diferentseerumise moodustamaks neuronid, astrotsüüdid ja oligodendroblastov.

Arvestades seda, tüviraku reagregatsiooni dissotsieerunud neurosfääridest ning kultiveeriti viiakse läbi kultuuri söötmetes EGF ja aluselised FGF või FGF2, kuid ei ole lisatud seerumit. On näidatud, et EGF indutseerib tüvirakkude proliferatsiooni subependimnoy tsoon külgvatsakesed, ja aluseline FGF soodustab tüvirakkude proliferatsiooni juttkeha, hipokampus, neokorteksist ja nägemisnärv küpse ajus. Kombinatsioon EGF ja aluselised FGF on hädavajalik aktiivse leviku eraldatud tüvirakud ependümaalse kolmas ja neljas vatsakestest eesaju samuti lülisambakanalisse nimmelüli ja rindkere seljaajus.

Pärast peatamise dissotsiatsioon neuraalsed tüvirakud kultiveeriti plastnõudega või auguplaatidel ilma liimi substraat suurendavad uue neurosfääridest moodustatud kulub tavaliselt umbes 3 nädalat. Neurosfääri mitmekordse hajutamise ja paljunemise meetod võimaldab saada piisava arvu lineaalkotentsete tüvirakkude lineaarseid klooni intratserebraalse siirdamise jaoks. See põhimõte põhineb ka inimese embrüonaalse aju isoleeritud tüvirakkude pankade loomisel. Nende pika (mitme aasta pikkusega) kloonimise abil on võimalik saada stabiilseid närvisüsteemi tüvirakkude read, millest tekivad indutseeritud diferentseerumisel katehhoolamiinergilised neuronid.

Kui neurosfääridest ei hajutatult ja kasvatati liimiga substraate söötmes kasvufaktoreid, vohavate tüvirakud hakkavad spontaanselt diferentseeruda neuronite eellasrakud ja gliiarakkude koos markerite ekspressiooni igat liiki närvirakkude: MAP2, Tau-1, NSE, NeuN beta tubuliini III (neuronid), GFAP (astrotsüüdid) ja arvutatud, 04 (oligodendrotsüüdid). Seevastu kultuurides neuraalsed tüvirakud osakaalu neuronite rohkem kui 40% ulatuses diferentseerunud rakke (närilistel - 1-5%) rakud hiirtel ja rottidel, kuid seal on palju vähem oligodendrotsüütide, mis on väga oluline rakuteraapia seisukohast demüeliniseerivast haigused. Probleem on lahendatud, lisades kasvukeskkonda B104 mis stimuleerib moodustumise mielinprodutsiruyuschih rakkudes.

Kui kultiveeritud neuraalne eellasrakkude luuüdirakkudega Inimloodet sisaldavas söötmes EGF, aluselised FGF ja LIF, ridade arvu neuraalse eellasrakud tõusu 10 miljonit korda. In vitro reprodutseeritavatel rakkudel säilib suguüldsetel rottidel siirdamine suguelundite migratsiooniks ja diferentseerumiseks närvide ja gliaalsete rakkudesse. Kuid in vivo on multipotentsete eellasrakkude jagunemiste arv piiratud. Korduvalt märkis, et Hayflicki piirang jaoks "täiskasvanud" närvisüsteemi tüvirakkude (umbes 50 mitoosi) veel kättesaamatu isegi katse - rakkude kujul neurosfääridest säilitavad oma omadused ainult 7 kuud ja ainult 8 lõigud. Usutakse, et see on tingitud tunnustega meetodeid nende hajumist ajal passaažida (trüpsinisatsiooniga või mehaanilise mõju), mis vähendab olulisel määral proliferatiivsete rakkude tegevust tõttu halvenenud rakkudevahelise kontakti. Tõepoolest, kui selle asemel, et hajutada neurosfääri jagamise meetodit 4 osaks, kasutatakse rakkude elujõulisust läbimise ajal oluliselt. See meetod võimaldab inimese närvisüsteemi tüvirakkude kasvatamist 300 päeva. Kuid pärast seda perioodi kaotavad rakud mitootilise aktiivsuse ja degenereeruvad või lähevad spontaanse diferentseerumise staadiumile neuronite ja astrotsüütide moodustumisega. Selle põhjal arvestab autor, et 30 mitoosi on kultiveeritavate närvisüsteemi tüvirakkude piiritletav arv.

Inimese neuraalsete tüvirakkude kasvatamisel in vitro moodustuvad peamiselt GABA-ained. Ilma loomise eritingimused, närvi- eellasrakud tekitada dopamiinergiliste neuronite (vajalik rakuteraapia Parkinsoni tõbi) ainult esimesed kanalid, mille järel kõik neuronikultuuris koosnevad ainult GABA rakke. Närilistel on in vitro dopamiinergiliste neuronite esilekutsumine IL-1 ja IL-11 poolt, samuti närvirakkude membraanide, LIF ja GDNF fragmentide poolt. Kuid see meetod jäi meestele ebaõnnestumiseks. Sellest hoolimata ilmnevad in vivo intratserebraalse GAMK-ergilise neuroni siirdamine mikrokeskkonnategurite mõjul erinevate mediatorfenotüüpidega närvirakke.

Päring neurotroofsed faktorid kombinatsioonid näitasid, et FGF2 ja IL-1 indutseerida dopamiinergiliste Neuroblaste, mis aga ei suuda toota dopamiinergiliste neuronite. Diferentseerumist tüvirakud hipokampuse glutamatergiliste eksitatoorsete ja pärssiv GABAergic neuronid mõjutavad neurotrofiine, EGF ja IGF1 moodustumise indutseerimiseks glutamatergiliste ja GABA neuroneid neuraalne eellasrakud Inimloodet. Järjestikuse lisamisega Retinoolhappe kultuuri ja neurotropiini 3 (NT3) suurendab oluliselt diferentseerumist tüvirakud hipokampuses küps aju neuronites erineva mediaatori milline, samas kasutades kombinatsiooni ajust pärinev neurotroofne faktor (BNDF), NT3 ja GDNF kultuurides hipokampuse ja neokortikaalsetes saadaval püramiidi neuronid.

Seega mitmete uuringute tulemused näitavad, et esiteks tüvirakkudest erinevatest ajustruktuurid mõjul konkreetsete kohalike koefaktorite suudavad diferentseeruda in vivo neuronaalse fenotüüpe omane neid struktuure. Teiseks eesmärgiks indutseeritud diferentseerumine neuraalsed tüvirakud in vitro kloonimisel eellasrakud annab võimaluse saada närvi- ja gliiarakud soovitud fenotüübitunnuste ajusisesteks siirdamise erinevates vormides aju patoloogiat.

Ei ole mingit kahtlust, et pluripotentsed tüvirakud, mis on saadud embrüod või täiskasvanu kesknärvisüsteem võib pidada annavad uusi neuroneid ja ko kliinikusse neuroloogiliste häirete puhul. Kuid peamiseks takistuseks arengule praktilise raku Neurotransplantation on asjaolu, et enamik neuraalsed tüvirakud ei diferentseeruvad neuronite pärast implantatsiooni nonneural küps CNS piirkonnas. In mööda see takistus, siis ettepanek väga originaalne uuenduslikku tehnikat, mis võimaldab in vitro saada puhast neuronite populatsiooni loote neuraalsed tüvirakud pärast siirdamist KNS täiskasvanud rottidel. Autorid väidavad, et diferentseerumine implanteeritud rakkude sel meetodil tulemusel moodustuvad koliinergilise neuronite fenotüüpi, mõjul mikrokeskkonna ümbruskonna tegurid. Pakutud tehnoloogia pakub huvi poolest uute ravimeetodite põhineb tüvirakke ja asendada kahjustatud tõttu trauma või neurodegeneratiivsete haiguste neuronite kolinergiliste neuronite juhtiv roll arengus motoorse funktsiooni, mälufunktsioon ja õppimist. Eelkõige kolinergiliste neuronite pärinevad inimese embrüonaalseid tüvirakke saab kasutada selleks, et asendada motoneuronitele kadunud amüotroofiline lateraalskleroos või seljaaju vigastusi. Praegusel hetkel puuduvad andmed meetodite kohta, millega toodetakse märkimisväärse arvu kolinergilisi neuroneid, mis pärinevad mitogeenist moodustatud tüvirakkude populatsioonist. Autorid ettepaneku küllaltki lihtne, kuid tõhus viis stimuleeriv mitogeen valmismärgised primaarse embrüonaalsete neuraalsed tüvirakud suunas areng praktiliselt puhta neuronite pärast implantatsiooni in nonneural ja neurogeenne KNS täiskasvanud rottidel tsooni. Kõige olulisem oma töö tõttu on muundamisel piisavalt suure hulga siirdatud rakkude kolinergiliste neuronite siirdatutena Keskmine membraani ja seljaajus.

Peale selle preformation närvisüsteemi tüvirakkude aju 8-nädalase inimese embrüo holiyergicheskie neuronite in vitro ajukoore see ettepanek kasutada erinevates kombinatsioonides järgmiste troofiliste tegurite ja kemikaalid: rekombinantse aluselise FGF, EGF, LIF, Aminoterminaalse heli peptiidi hiire (Kuss-N ), tretinoiiniks, NGF, BDNF, NT3, NT4, looduslikud hiire laminiini ja hepariin. Esialgset rida inimese neuraalsed tüvirakud (K048) hoiti in vitro kaks aastat ja talunud 85 läbipääsud muutumatuks proliferatiivsete ja diferentseerumist omadused säilitamisse normaalse diploidne karüotüüp. Disperseerimata neurosfääridest 19-55 teist kanalit (38-52 nädala e) istutati polü-D-lüsiini ja laminiini ja seejärel töödeldi ülaltoodud teguritest erinevates kontsentratsioonides, kombinatsioonid ja järjestused. Kombinatsioon koosneb aluselise FGF, hepariin ja laminiini (akronüüm FHL), antud ainulaadne mõju. Ühe päeva pärast embrüo kultiveerides neuraalsed tüvirakud keskkonnas või ilma FHL Kuss-N (koostisega Kuss-N + FHL in lühend SFHL) täheldati kiiret paljunemist suuremate tasapinnaline rakkudes. Kõik teised päeval protokollile (nt nagu põhiline FGF + laminiini), vastupidi, on viinud piiratud radiaalse levikut spindlikujulise rakud ja need rakud ei jätnud tuum neurosfääridest. 6 päeva möödudes aktiveerimise ja sellele järgnenud kümne Diferentseerumissöötmes sisaldas B27, servas FHL aktiveerimata sfäärides polipolyarnye suurte neuron-like rakke ei leitud. Teistes protokollirühmades jäid enamik neuronitaolistest rakkudest väikesed ja bipolaarsed või unipolaarsed. Immunotsütokeemilised analüüs näitas, et väike (<20 mikronit) või bipolaarne Monopolaarsete rakke või GABA-ergilised või glutamatergiliste arvestades Enamiku suurte polipolyarnyh asuvate rakkude servas FHL aktiveerimata neurosfääridest osutunud koliinergilist väljendatud markerid iseloomulik kolinergiliste neuronite (Islet-1 ja ChAT). Mõned neist neuronite samaaegselt väljendatud sünapsiin 1. Selle tulemusena viie seeria sõltumatus eksperimendis, leidsid autorid, et üldine rakupopulatsioon üksik- alad 45,5% diferentseerunud neuronites TuJl +, samas koliinergilist (ChAT ^) neuronid Alles 27,8 sama rakkudesse kuuluvate rakkude protsent. Pärast veel 10 päeva diferentseerumise in vitro lisaks kolinergiliste neuronite FHL aktiveerimata neurosfääridest olid märkimisväärsed kogused väikesed neuronid - glutamatergiliste (6,3%), GABA-ergilised (11,3%) ja astrotsüütide (35,2% ) ja nestiinpositiivsed rakud (18,9%). Kui kasutatakse muid kombinatsioone kasvufaktoreid kolinergiliste neuronite puuduvad, ja piiri rakkudest moodustunud neurosfääridest või astrotsüüdid või väiksemaid glutamatergiliste ja GABA-ergilised neuroneid. Seire backup ja aktiivse potentsiaalid lehe Koguraku lappklambri tehnikat näitas, et seitsme päeva pärast FHL aktiveeriv polipolyarnyh suur enamus rakkudes puhkasime potentsiaali moodustavaid -29,0 ± 2,0 mV puudumisel aktsioonipotentsiaali. Pärast 2-nädalane puhkeperiood potentsiaali suureneb -63,6 ± 3,0 mV, mis aktsioonipotentsiaalis täheldatud ajal induktsiooni depolariseerimisetappi hoovuste ja 1M tetrodotoksiin blokeeritud, näidates, et funktsionaalset aktiivsust ebaküpsed kolinergiliste neuronite.

Lisaks leidsid autorid, et FHL- ise või SFHL- aktiveerimise in vitro ei põhjusta küpsete neuroneid ning püüdnud kindlaks teha, kas on võimeline valmismärgised via FHL SFHL või tüvirakkude diferentseeruda kolinergiliste neuronite kui siiratakse küpse roti KNS. Sel süstimist aktiveeritud rakkudes neurogeenses piirkonnas viidi läbi (hipokampus) ja nonneural mitmetes valdkondades, sealhulgas sektsioonis prefrontaalkorteksis Keskmine membraani ja seljaaju täiskasvanud rottidel. S implanteeritud rakkude jälgimine viidi läbi CAO-p-vektori abil. On teada, et OCD märgistab üheaegselt nii ultrastruktuur rakkude ja rakuliste protsessidega (molekulaarsel tasandil) ilma leket ja alluvad otseselt visualiseerimine. Lisaks OPP märgistatud neuraalsed tüvirakud toetada neuronite profiile ja gliiarakud diferentseerumise identsed profiil Teisendamata embrüonaalseid tüvirakke aju.

Üks kuni kaks nädalat pärast siirdamist 5 x 10 ⁴ aktiveeritud ja märgistatud neuraalsed tüvirakud leiti seljaajus või rottide ajus, ROC + rakke peamiselt süstekoha lähedal. Rände ja integratsiooni protsesse täheldati juba kuu aega pärast siirdamist. Migratsioon Range varieeruda sõltuvalt süstekoha: kehtestamine portsjoni prefrontaalkoore OCD + rakud paiknevad 0,4-2 mm süstekohal korral siirdamiseks keskelt membraani, hipokampus, või seljaaju migreerunud rakkude palju suurem kaugus -. 1-2 cm poogitud rakud paiknevad kesknärvisüsteemis kõrgelt struktuurid, sealhulgas frontaalkoores keskmine membraani, hipokampuses ja seljaajus. OCD-märgistatud neuronaalseid elemente peeti juba esimesel nädalal pärast siirdamist ja nende arv märkimisväärselt suurenes 1 kuu pärast operatsiooni. Stereoloogiline analüüs näitas implanteeritud rakkude ellujäämise suurenemist aju erinevates struktuurides, võrreldes dorsaaliga.

On teada, et säilitati piirkondliku tüvirakkude populatsioon, muundamise küpseid rakke on reguleeritud spetsiifiliste koefaktorite enamikus täiskasvanud imetajate kudedes. Tüvirakkude proliferatsiooni, diferentseerumist eellasrakud ja moodustamise struktuurile spetsiifilise aju närvirakkude fenotüüpe vivo palju suuremal määral väljendatud looteaju, määratuna juuresolekul kõrgetes kontsentratsioonides morfogeneetilisest tegurid kohalikus mikrokeskkonnas - neurotrofiine BDNF, NGF, NT3, NT4 / 5 ja kasvu FGF2 tegurid, TGF-a, IGF1, GNDF PDGF.

Kus on närvi tüvirakud?

On leitud, et neuraalsed tüvirakud väljendada kiulise happelise gliiavalgu sisaldades küpseid rakke närvi line säilitatakse ainult astrotsüüdid. Seetõttu võib küpse kesknärvisüsteemi varreervand olla astrotsüütsed rakud. Tõepoolest, haistesibulas ja hambakäärus neuronite tuvastati, pärit GFAP-positiivsed eelkäija, mis on vastuolus traditsioonilisi vaateid rollist esiisa Radial gliiarakkude GFAP ei väljendanud hambakäärus täiskasvanueas. On võimalik, et kesknärvisüsteemis on kaks tüvirakkude populatsiooni.

Tüverakkude paiknemise küsimus ka subktrikulaarses piirkonnas ei ole veel selge. Vastavalt mõned autorid, ependümaalsed rakud moodustavad sfääride kultuuris kloonid, mis ei ole tõsi neurosfääridest (subependimy raku kloonid), sest ainult võime diferentseeruda astrotsüüdid. Teiselt poolt, pärast fluorestseeruvat või viiruslike marker märgistamise ependümaalsed rakkudes avastatud rakud subependimnogo kiht ja haistmissibulatest. Sellised märgistatud rakud in vitro moodustavad neurosfääre ja diferentseeruvad neuronite, astrotsüütide ja oligodendrotsüütide hulka. Lisaks on näidatud, et umbes 5% ependyma rakkudes ekspresseeritud markerid varre - nestin, Notch-1 ja Mussashi-1. Oletatakse, et mehhanism asümmeetriliste mitoosi seostatakse ebaühtlane jaotumine Notch-1 membraani retseptor, kusjuures viimane jääb membraanile tütarrakkude lokaliseeritud ependümaalsed tsoonis, arvestades emarakuga migreerunud subependimny kiht kaotab sellise retseptoriga. Seda silmas pidades subependimnuyu tsoonis võib pidada kollektori eellasrakkude neuronite lähteainete ja gliiarakkude genereeritud varras ependümaalsed kiht. Vastavalt teiste autorite kaudaalses subventricular tsoonis moodustatud ainult gliiarakkude ja rakud on allikas neyronogeneza rostral-külgne osakond. Kolmandas variandis antakse külgva ventrikli subventrikulaarse tsooni esi- ja tagaküljele samaväärsed neurogeensed potentsiaalid.

Eelistatult näeb neljandas teostuses korralduse ajutüves reservi kesknärvisüsteemis, kusjuures subventrikulaarses tsoonis on kolm põhilist tüüpi närvirakkude progenitorrrakke - A, B ja C varaseim rakud ekspresseerivad neuronite markerid (PSA-NCAM, TuJl) ja ümbritsetud B-rakud, mis on identifitseeritud antigeenide ekspressioonina astrotsüütidena. C-rakud, millel ei ole neuronite või glia antigeenseid omadusi, on kõrge proliferatiivse aktiivsusega. Autori veenvalt näidanud, et B-rakud on eelkäijate A-rakud ning moodustanud de novo neuronites haistmissibulas. Migratsiooni ajal A-rakud on ümbritsetud lintidega neuraaltoru eellasrakud, mis oluliselt erineb mehhanism postmitootilisteks Neuroblaste rände radiaalselt gliiarakkude embrüonaalsete aju. Migratsioon lõpetab haistmissibulas mitootilise jagunemise nii A- ja B-raku derivaate, mis on inkorporeeritud kihtide granuloosrakkudes glomerulaarse kiht lõhnamärgile ajupiirkondades.

Arengumaades aju embrüotega ei eristata ependümaalsed rakud ja vatsakestes hõlmavad korrutades tüvirakud vatsakese germenativnoy th subventricular tsoonis, mis migreeruvad primaarse neuro- ja glioblastoomi. Selle põhjal mõned autorid usuvad, et piirkonna subependimnaya küps aju sisaldab vähendatud germenativnuyu embrüonaalsete närvikude koosneb astrotsüüdid, Neuroblaste ja tundmatu rakke. Tõeline närvisüsteemi tüvirakud moodustavad külgva ventrikulaarset seina hermeetilist tsooni vähem kui 1% rakkudest. Osaliselt seetõttu, aga ka seoses andmete subependimnoy tsooni astrotsüüdid närvisüsteemi tüvirakkude lähteainete ei välista võimalust Astrotsüütiliste gliiarakkude transdiferentseerumise rakkude omandamine neuronite fenotüübitunnuste.

Peamiseks takistuseks lõpliku otsuse lokaliseerimine neuronaalseid tüvirakke in vivo - puuduvad konkreetsed markerid need rakud. Kuid väga huvitav, praktilisest seisukohast esitatud teateid, et närvitüve rakud eraldati kesknärvisüsteemi osakondade mis ei sisalda subependimnyh tsoonid - kolmanda ja neljanda vatsakestest eesaju, lülisambakanalisse rindkere ja nimmelülidest. Eriti oluline on asjaolu, et seljaaju vigastus tõhustatud vohamist ependümaalsed tüvirakud Keskkanali moodustumisega eellasrakud rändavad ja diferentseeruda astrotsüüdid gliomezodermalnogo vatsa. Lisaks on täiskasvanud rottide kahjustatud seljaajus ka astro- ja oligodendrotsüütide prekursorrakud.

Seega, kirjanduse andmed näitavad kindlalt juuresolekul kesknärvisüsteemi täiskasvanud imetajate, sealhulgas inimeste, piirkondlike tüvirakkude reservi taastav ja plastist, mille võimsus on kahjuks võimalik pakkuda ainult füsioloogilise regenereerimisprotsessid moodustada uus närvivõrgud, kuid ei vasta vajadustele repareerivate regenereerimine. See tõstatab probleemi leida võimalusi suurendada ressursside kesknärvisüsteemi tulenevad eksogeenne viisil, mida ei saa lahendada ilma selge arusaam tekkemehhanisme CNS embrüonaalses jooksul.

Täna me teame, et protsessis embrüonaalse arengu tüvirakke neuraaltoru rakud allikaks on kolme tüüpi - neuronite, astrotsüüdid ja oligodendrotsüüdid ehk neuronid ja neurogliiadest rakud saadakse ühine eellane. Diferentseerumist ectoderm klastritesse neuraalse eellasrakud algab mõjul proneural geenide bHLH tootepered ja blokeerib ekspressiooni transmembraanse retseptorvalk derivaadid Notch geeniperekonnal mis piiravad määramiseks ja varajase diferentseerumist neuraalne eellasrakud. Omakorda Notch ligandid toimida transmembraanvalkude Delta naaberraku tõttu ekstratsellulaarse domeeni, mis on otseselt rakk-rakk kontaktide Induktiivkoormusega vastastikmõju tüvirakke.

Embrüonaalse neurogeneesi programmi edasine rakendamine on mitte vähem keeruline ja tundub, et see peaks olema liikidepõhine. Kuid tulemused neyroksenotransplantatsionnyh uuringud näitavad, et tüvirakud on erinevad evolutsiooniline konservatism, nii neuraalsed tüvirakud on võimelised rännata ja arenevad, kui nad siiratakse roti aju.

On teada, et imetajate kesknärvisüsteemile on väga väikese võimsusega heastamise taastamine, mida iseloomustab vähene küps aju mingeid märke uute rakkude asendamiseks surnud rakkude tulemusena närvikahjustuse. Neuroblasti siirdamise korral elavad, prolifereeruvad ja diferentseeruvad, kuid need on võimelised integreerima aju struktuuridesse ja kaotatud neuronid funktsionaalselt asendama. Kui siirdatud pühendunud neuronaalsete eellasrakkude rakke siirdati, oli terapeutilist toimet oluliselt nõrgem. Sellised rakud näitasid migratsiooni jaoks väikest võimsust. Lisaks sellele ei närvirakkude eellasrakud paljunevad neuronite võrkude arhitektuuri ega funktsionaalselt integreeruvad retsipiendi ajusse. Sellega seoses uuritakse pidevalt-plastilise regeneratsiooni probleeme vormimata multipotentsiaalsete närvisüsteemi tüvirakkude siirdamisega.

Uuringut M. Alexandrova jt (2001) esimeses teostuses, katsed olid saajate küpse emaste rottide doonorid olid 15-päevase embrüo arengut. Vastuvõtjad olid eemaldatud osa oktsipitaalkorteksis ja õõnsuse siirdatud mehaaniliselt peatatud eelmaksustamise embrüonaalsete kortikaalkoes sisaldas multipotent tüvirakud vatsakese ja subventricular piirkonnas. Teises teostuses, teostatud eksperimente siirdamisest neuraalsed tüvirakud 9. Nädala inimloote aju polovozrelh rottidel. Alates periventrikulaarseid area embrüote autorid isoleeritud ajukoe viilud asetati kasvukeskkonnast ja F-12 saadi korduval pipeteerida rakususpensiooni ja seejärel kultiveeritakse eriline keskmise NPBM täiendatud kasvufaktoreid - FGF, EGF ja NGF. Rakke kasvatati suspensioonkultuuris enne moodustav neurosfääridest et hajutati ja sadestati jälle kultuurist. Pärast 4 passaaži, mille kogu kultiveerimisperiood oli 12-16 päeva, kasutati rakke siirdamiseks. Saajad olid desyatisutochkye küpse rotid ja kahekuulise Wistar rotid, mis piirkonnas külgvatsakese süstiti 4 ui peatamist inimese neuraalsed tüvirakud ilma immunosupressioon. Tulemused näitavad, et rakud dissotsieerub vatsakese ja subventricular tsooni embrüonaalsete ajukoorde järjehoidja roti siiriku täiskasvanud aju areneb, see tähendab, tegureid diferentseerunud saaja mikrokeskkonda ajus ei blokeeri kasvu ja diferentseerumist neuraalsed tüvirakud embrüo. Varajane perioodil siirdamise järel multipotent rakud jätkati mitootilise jagunemise ja aktiivselt rännanud alalt koetransplantatsioonimudelil retsipient ajus. Siirdatud embrüonaalsete tüvirakkude millel on suur potentsiaal migratsioon, on leitud peaaegu kõik kihid cortex saaja luuüdi siirdamise piki raudteed ja valgeaine. Pikkus üleminekuviise närvirakkude on alati olnud oluliselt madalamad (kuni 680 mikromeetrit) kui gliiarakkude (kuni 3 mm). Struktuurifondide vektorid rändavad astrotsüüdid veresooned ja kiuline struktuure aju, mis oli ka teistes uuringutes täheldatud.

Varem arvati, et kogunemine märgistatud astrotsüüdid ajukoores saaja tsoonis ajukahjustuse võib seostada teket neurogliia barjääri vahel Koetransplantaadi ja vastuvõtja. Siiski näitasid kompaktselt paiknevate rakuliste lämmastikute struktuuri uuringud, et nende tsütoarhistökonoomi iseloomustab juhuslikkus ilma siiratud rakkude kihilisse jaotumiseta. Siirdatud neuronite järjestus, mis on ligikaudne normaalse ajukoorede rakkude omast, on ainult siis, kui doonori ja retsipientkudede vahel puudub glia barrier. Vastasel juhul oli siiriku rakkude struktuur ebatüüpiline ja neuronid ise läbisid hüpertroofiat. Transplanteeritud siirdatud rakkude neuroimmunokeemiline tüpiseerimine näitas inhibeerivaid GABA -ergilisi neuroneid PARV, CALB ja NPY-valkude ekspressiooni esilekutsumiseks. Sellest tulenevalt püsivad küpses ajus mikroorganismi faktorid, mis võivad toetada proliferatsiooni, migreerumist ja närvipuudulikkusega rakkude spetsiifilist diferentseerumist.

Kultuuris inimese eraldatud tüvirakud aju periventrikulaarseid 9 nädala vanused embrüod, M. Alexandrova jt (2001) neljandas läbipääsu nestinpozitivnyh leiti suur hulk multipotent rakud, millest mõned on läbinud diferentseerumist in vitro ja arendatud neuronite tüüpi, mis vastas teiste autorite uurimistulemused. Pärast siirdamist ajju täiskasvanud rottide, kultiveeritud tüvirakud mitootiliselt lõhestunud ja migreerunud kangast heteroloogse saaja ajus. Rakkude siirdamisel täheldasid autorid kahte rakkude populatsiooni - väikest ja suuremat. Viimased rännanud parenhüümi ja kiu struktuurid ajus saaja kerge kaugus - kuni 300 mikronit. Kõige pikem tee migratsiooni (kuni 3 mm) oli iseloomulik väikeste rakkude, millest mõned on diferentseerunud astrotsüüdid, mis on kehtestatud kasutades monokloonseid antikehi GFAP. Mõlemat tüüpi rakkude leiti seina külgvatsakese, mis näitab, et väljund siirdatud rakud rostraalse migratsiooni voogu. Astrotsüütsed tuletatud neuraalsed tüvirakud nii inimese kui ka roti rännanud peamiselt läbi verekapillaaride ja kiudstruktuurikihtide saaja aju, mis ühtib andmeid teiste autorite.

Inimese tüvirakkude diferentseerumise analüüsimine in vivo, kasutades GFAP, CALB ja VIM monoklonaalseid antikehi, näitas nii astrotsüütide kui ka neuronite teket. Erinevalt rottide rakkude rakkudest olid paljud inimese tüvirakud vimentiin-positiivsed. Järelikult ei olnud osa inimese multipotentsetest rakkudest diferentseeritud. Hiljem samade autorite näitas, et inimese neuraalsed tüvirakud siirdati ei rakendata immunosupressioon läbinud siirdamise roti ajus 20 päeva ilma tõendeid immuunrakkude agressiooni gliiarakkude küpse ajus.

Selgus, et isegi neuraalsed tüvirakud Drosophila prizhivlyayutsya ja läbivad diferentseerumise ajus on nii kaugel putuka taksonit, nagu rott. Õigsuse autoritest eksperimendi ei ole mingit kahtlust: transgeenne Drosophila ridadel- geenid inimese neurotroofne faktorid NGF, GDNF, BDNF, sisestati vektori all Casper Drosophila: Te šokk promootor, nii et imetajate kehatemperatuur kutsub automaatselt nende ekspressiooni. Autorid eristab Drosophila rakud Toote bakteriaalse galaktosidaasi geeni histochemical X-Gal värvimisega. Lisaks selgus, et neuraalsed tüvirakud on Drosophila spetsiifiliselt reageerivad neurotroofsed faktorid, mis on kodeeritud inimese geene: ksentotransplantatsiooni rakkude transgeensete liinide Drosophila sisaldas GDNF geeni oma diferentseerides neuraalsed tüvirakud järsult suurenenud sünteesi türosiinhüdroksülaas ja geeni NGF rakkude aktiivse toodetud atsetüülkolinesteraas . Sarnased genzavisimye esilekutsutud ksenotransplantaatkatsetes siirdatud siiriku temaga embrüonaalsete närvikude.

Kas see tähendab, et naiivsete tüvirakkude spetsiifilist diferentseerumist indutseerivad vidon-spetsiifilised neurotroofsed tegurid? Tulemuste kohaselt autorid siirdkoe tootma neurotroofsed faktorid on konkreetne mõju saatusele allograftide, mis Seejärel arendati intensiivsemalt on 2-3 korda suurem kui suurus allograftide kantud aju lisamata siirdkudedes. Järelikult siirdkoe sisaldavate rakkude neurotrofihin geenid, eriti kodeeriv geen neurogliia neurotroofne faktor (GDNF) inimese avaldavad arengut siiriku vidonespetsifichesky sarnase efekti toimel vastavateks neurotropiini. On teada, et GDNF elulemust dopamiinergiliste neuronite embrüonaalses roti keskaju ja parandab dopamiini metabolismi nende rakkude poolt ja indutseerib diferentseerumist türosiinhüdroksülaas positiivsed rakud, suurendades kasvu aksonid ja neuronite suurendades keha suurusest. Sarnaseid toimeid täheldatakse ka roti aju aju dopamiinergiliste neuronite kultuuris.

Pärast ksenotransplanteerimisest neuraalsed tüvirakud ajus täiskasvanud rottidel näitas nende aktiivset migratsiooni. On teada, et migratsiooni ja diferentseerumist neuraalsed tüvirakud juhitakse rida spetsiifilisi geene. Protsessi algatav signaali ränd eellasrakud algusse diferentseerumise annab valguproduktis proto..oncogene c-rets koos GDNF. Järgmisel saadud signaalile mash-1 geeni, mis juhib valiku raku arengu teele. Lisaks spetsiifilise reaktsiooni diferentseerides rakkudes sõltub ka retseptoriga ja neurotroofset faktorit. Seega antud täiesti erinev geneetiline struktuur ksenogeensel inimese neuraalsed tüvirakud ja saaja roti ajurakud, seda tuleb tunnistada mitte ainult vidonespetsifichnost neurotroofsed faktorid, kuid ka kõrgeim evolutsiooniline kaitse eest vastutavate geenide spetsiifilisi diferentseerumist neuraalsed tüvirakud.

Kas võimalik ksenotransplantantsioon embrüonaalsete neyromateriala neurokirurgilistes tava neurodegeneratiivsete patoloogiliste protsesside tõttu häiritud sünteesi müeliinoligodendrotsüüt näha. Vahepeal kõige intensiivsemalt Neurotransplantation aadressi seonduvat saamise embrüonaalsete või küps allogeense nööri neuraalsed tüvirakud kultuuris millele järgneb nende suunatud diferentseerumist Neuroblaste või spetsialiseeritud neuroneid.

Närvisüsteemi tüvirakkude siirdamine

Stimuleerida proliferatsiooni ja diferentseerumist neuraalsed tüvirakud täiskasvanud organismis saab siirdatud embrüonaalsete närvikude. Ei ole välistatud, et kehtestatud siiriku koos tüvirakkudega närvikoe embrüo ise võivad läbida proliferatsiooni ja diferentseerumist. On teada, et pärast seljaaju vigastust regeneratsiooni närvi juhtmete kandunud venivus kahjustatud aksonid ja aksonite idanevate tagatiseks tärkamine motoneuronitele puutumata. Peamiseks takistuseks seljaaju taastamine, on sidekoe kahjustus armi piirkond, düstroofsete ja degeneratiivsed muutused kesknärvirakkudes, NGF puudujääki ja kohalolekut kahjustatud piirkonda müeliini lagunemissaaduste. On näidatud, et siirdamiseks vigastada seljaaju erinevate rakutüüpide - killud istmikunärvi täiskasvanud loomadel embrüonaalsete oktsipitaalkorteksis, hipokampus, seljaaju, Schwanni rakud, astrotsüüdid, mikrogliia, makrofaagid, fibroblastid - soodustab regeneratsiooni vigastada aksonite poolt idanevate ja võimaldab vastloodud aksonite kasvada kaudu valdkonnas seljaaju vigastusi. Katseliselt tõestas, et siirdamise loote närvikoe seljaaju vigastust toimel neurotroofsed faktorid kiirendab kasvu mõjutas aksonid, takistab teket neurogliia armi ja Arengu düstroofsete ja degeneratiivsete protsesside kesknärvirakkudes kuid rakud siirdatud embrüonaalsete närvikude toimumas seljaaju integreerida külgnevate kudede ja edendada aksonite idanevate läbi kahjustatud piirkonda teket sünapside den driticheskogo tüüpi seljaaju neuronites.

See ala regeneratiivse meditsiini ja plastist saanud suurim arengut Ukrainas tõttu töö teadusliku meeskond eesotsas VI Tsymbalyuk. Kõigepealt seda Eksperimentaaluuringute tõhusust embrüonaalsete närvikoe seljaaju vigastusi. Autoloogilistel perifeerse närvi kõige ilmekam muutusi hävitava autorid täheldatud distaalne plommi piirkonnas, kus 30. Päeval pärast operatsiooni liideti need, milline repareerivate protsesse. Kui siiriku morfofunktsionaalseks olekus implanteeritud närvi 30. Päeval oli iseloomustab tugev lagunemist nähtuste Rasv ja amüloidoosis taustal fookuskaugusega põletikuline infiltratsioon limfoidnokletochnoy predominantse atroofia Schwanni rakud. Embrüonaalsete närvikude suuresti kaasa taastamist seljaaju juhtivuse, eriti loomi, kes operatsiooni viidi läbi esimese 24 tunni jooksul pärast vigastust: vastu leevendamiseks põletikulist hävitava protsesse tähistatud hüpertroofia ja hüperplaasia valgusünteesi ning energoprodutsiruyuschih ultrastrukturaalsed elemendid seljaaju neuronid hüpertroofia ja oligodendrotsüüdid hüperplaasia, 50% vähendamisel amplituudi lihaste aktsioonipotentsiaali ja 90% - kiirus hoides hoogu. Tõhususe hindamisel transplantatsiooni loote närvikude siirdamise sõltuvalt tsoonis on leitud, et parimad tulemused täheldatud manustatuna otse siirdamist ala seljaaju vigastus. Täie ristamisel seljaaju loote närvikude siirdamisel on osutunud ebaefektiivseks. Dünaamiline uuringud on näidanud, et optimaalne aeg embrüonaalsete närvikoe on esimesed 24 tundi pärast seljaaju vigastust, samas operatsiooni ajal väljendunud sekundaarse isheemilise ja põletikuliste toimuvate muutuste 2-9 päeval pärast vigastuse seda tuleb tunnistada ebapraktiline.

On teada, et raske kolju kahju tekitab tugeva ja püsiva aktiveerimist lipiidide peroksüdatsiooni esialgse ja vaheetappide traumajärgse perioodi kahjustatud ajukude ja kogu organismi ja annab energiat ainevahetuse vigastada aju. Nendes tingimustes pookimise loote närvikude traumaatilisest panustab stabiliseerimisel lipiidide peroksüdatsiooni protsesse ja suurendab suutlikkust antioksüdantsüsteemi aju ja kogu organismi, suurendab selle antiradikaalne kaitse 35-60 nda päevani posttraumaatilise jooksul. Samal ajaperioodil pärast siirdamist Embrüonaalsete närvikude normaalseks energeetilise metabolismi ja oksüdatiivse fosforüülimise protsesse ajus. Lisaks on näidatud, et esimesel päeval pärast eksperimentaalse traumaatilise ajukahjustuse vigastada poolkera, koe impedantsi väheneb 30-37% kontralateraalse - 20%, mis näitab arengu üldistatud ajuturse. Loomadel, kellele tehti siirdamise loote närvisüsteemi koeödeemi kärbumisprotsessi toimub palju kiiremini - juba seitsmendal päeval keskmine väärtus impedantsi kudede poolkeras jõudnud 97,8% kontrollväärtusest tasandil. Ja täieliku taastamise väärtused impedantsi 30. Päeval täheldati ainult loomadel, kellele on siirdatud embrüonaalsete närvikude.

Surma neuroneid ajus pärast raske traumaatilise ajukahjustuse on oluline panustaja arengut posttraumaatilise komplikatsioone. Eriti vastuvõtlikud kahju neuronite integreerida dopamiinergilise ja noradrenergilise süsteemi, keskaju ja piklikaju. Vähendades dopamiini taset striopallidarnoy keerulised ja ajukoores oluliselt suurendab riski liigutushäired ja psühhiaatriliste häirete, epileptiformne riikides ning väheneb dopamiini tootmist hüpotalamuses võib olla põhjuseks arvukalt autonoomses ja somaatilised häired täheldatud kauge posttraumaatilise jooksul. Uuringute tulemused eksperimentaalse traumaatilise ajukahjustuse näitavad, et siirdamine loote närvikude aitab taastamise dopamiini vigastatud poolkera aju dopamiini ja norepinefriini - hüpotalamuse, samuti kasvava norepinefriini ja dopamiini keskaju ja piklikaju. Lisaks tulemusena embrüonaalsete närvikude loommudelites ajukahjustusega ajupoolkera normaliseeritud protsent fosfolipiidid ja suurenenud rasvhapete sisaldus (C16: 0, C17: 0, C17: 1, 18: 0, 18: 1 + C18: 2, C20 : 3 + C20: 4, C20: 5).

Need andmed kinnitavad siirdatud embrüonaalsete närvirakkude regeneratiiv-plastiliste protsesside stimuleerimist ja näitavad transplantaadi reparatiiv-troofilist toimet retsipiendi aju tervikuna.

Erilist tähelepanu tuleks pöörata Neurokirurgia Instituudi töötajate kliinilisele kogemusele. A.P. Romodanov Academy of Medical Sciences Ukraina embrüonaalsete närvikoe ajuhalvatus - väga keerukas haigus jõhkrate motoorse funktsiooni. Infantiilse aju paralüüsi kliinilised vormid sõltuvad lihaste toonuse reguleerimise ja motoorsete stereotüüpide tekke tagajärjel tekkivate terviklike struktuuride kahjustuse tasemest. Praegu on rohkelt tõendeid, et rikkumiste motoorse funktsiooni ja lihastoonust on oluline patoloogilised muutused süsteemi striopallido-thalamocortical mootori juhtimiseks. Selle süsteemi striospallidaalne ühendus omab dopamiini nigrostrialiseerumise kaudu kontrolli funktsiooni. Otsene tee algab rakendatakse kontrolli thalamocortical neuronite koorega vahendatud gammaaminomaslyanoy happe (GABA) ja substants P ja ennustatavaid otse mootori ala sisemise segmendi kahkjaskera ja mustaines. Kaudsed path mille mõju on realiseeritud kaasates GABA ja enkefaliinpentapeptiid, pärineb kest neuroneid ja mõjutab tuum basaalganglionite antud ühenduse kaudu järjestus, mis sisaldab välist segmendi kahkjaskera ja subtalaamilise tuumas. Otsetee juhtivuse häired põhjustavad hüpokineesiat, samal ajal kui kaudse tee struktuuride juhtivuse vähenemine toob kaasa hüperkineesia koos vastavate muutustega lihastoonus. Terviklikkuse GABA radu erinevatel tasanditel süsteemi mootor kontrolli ja integratsiooni dopamiinergiliste ühendused kest tasandil on oluline reguleerimise thalamocortical koostoimeid. Kõige sagedasem motoorse patoloogia avastamine infantiilse ajuhalvakuhaiguse vormides on lihaste toonuse rikkumine ja lihaste refleksse aktiivsuse lähedane muutus.

Embrüonaalse närvikoe siirdamine laste aju paralüüsis nõuab põhjalikku aju struktuuri kahjustuse olemust. Tuginedes määramiseks dopamiini ja GABA arvesse subarahnoidaalse tserebrospinaalvedelik autorid on üksikasjalikult integratsiooni taset funktsionaalseid häireid aju struktuurid, mis võimaldavad objektiviseerides tulemused kirurgilist sekkumist ja parandada korrata Neurotransplantation. Fetal närvikude (abortny materjali 9-nädalane embrüo) siirdati parenhüümis ajukoores precentral hammaskäärus ajupoolkerades, sõltuvalt raskusastmest atroofilise muutusi. Pärast operatsiooni ei täheldatud patsientide komplikatsioone ega halvenemist. Positiivne dünaamika täheldati 63% patsientidest spastilise vormid, 82% laste rõhuta-esteetiline vorm ja ainult 24% -l liigesehaigus. Tehti kindlaks negatiivne mõju neuro-tundlikkuse kõrge taseme toimimise tulemustele autoantikehade esinemisega neuro-spetsiifiliste valkude suhtes. Ebaefektiivsed embrüonaalsete närvikude ilmus patsienti vanuses 8-10-aastastel ja vanematel, samuti manustada raske hüperkineetiliste sündroom ja episindroma. Kliinilist efektiivsust embrüonaalsete närvikude patsientidel spastilise vormid ajuhalvatus avaldub statomotornyh moodustumist uusi oskusi ja tahtlikke liigutusi eesmärgiga korrigeerida patoloogiliste liikumismustreid ning väheneb astet spastilisus, ebanormaalne asendeid ja suhtumise. Autorid usuvad, et positiivne mõju embrüonaalsete närvikude on tulemus on normaalne mõju funktsionaalset aktiivsust supraspinaalsete seotud struktuuride reguleerimise tooni asendeid ja tahtlikke liigutusi. Sel juhul positiivne kliiniline mõju embrüonaalsete närvikude on kaasnenud sisu neurotransmitterite subarahnoidaalse tserebrospinaalvedelik, mis näitab, et taastumine lahutamatu interaktsioonid mõjutatud aju struktuure.

On üks raskemate vormide neuroloogiline haigus - minimaalselt teadvusel olekus, siis probleemi raviks, mis kahjuks ei ole kaugeltki lahendatud. Tähistab minimaalselt teadvusel olekus polyetiology alaäge või krooniline haigus, mis tulenevad rasked orgaanilised KNS kahjustusi (peamiselt ajukoores), ning mida iseloomustab arendamist ja panapraksii panagnozii suhteliselt salvestatud funktsiooni segmentkontaktide sektsioone varre formatsioonid ja limbilises retikulaartuumas kompleksi. Järeluuringute (1-3 aastat) näitas, et minimaalselt teadvusel olekus ei ole lõplik diagnoos püsivad kahjustusi närvisüsteemi lastel ja muundub orgaaniline või dementsuse või krooniline vegetatiivses seisundis. Neurokirurgia instituudi rehabilitatsiooni neurokirurgia osakonnas. A.P. Romodanova AMS Ukraina 21 apallic sündroomi toimega patsientidel teostati embrüonaalse närvi kudede siirdamine. Üldnarkoosi all võra lõikuri puuriti kanti üle ala kõige ilmekam atroofiline muutusi identifitseeritud arvuti või magnetresonantstomograafia ja kohalolekul hajus atroofia hall- või valgeaine sisestatakse pookida ja keskne precentral hammaskäärus ajus. Pärast avamist kõvakesta tükki 8-9 nädala vanusele lootele koe Järjehoidjad sensomotoorne cortex intracortical implanteeritud kasutades spetsiaalset seadet. Nende proovide arv implanteeritud koeks on 4-10, mis määrab ära kogus ja suurus puuriti kohalikud muudatused medulla. Erinevalt teistest tüüpi patoloogiaosakonna apallic sündroom, autorid püüdnud implantaadi nii palju lootekoest soodsaim aju piirkondades. Kangasõmblus oli õmmeldud, koljuosa defekti plastik tehti. Operatsiooni käigus kõik patsiendid näitas märkimisväärset muutust nii ajukoores (atroofia, vähene convolutions, värvimuutused ja pulsation medulla) ja ajukelme (paksenemine kõvakesta, märkimisväärne paksenemine ämblikuvõrkkelme membraani, millel ta enda veresooni, fusion ajukoormusega ained). Need muutused olid selgemini patsientidel, kellel on esinenud märke, mis olid edastatud põletikuliste ajukahjustused. Patsientidel, kellele tehti KNS hüpoksia, domineerivad hajus atroofiline muutusi ajuainest, eriti ajukoore osakondades, kus kasv subarahoidaalruumi, ilma oluliste muutusteta membraane ajus. Pooltel patsientidest ilmnes pehmete kudede, luude, aju aine veritsuse suurenemine. Pärast operatsiooni kuueks kuuks kuni kolm aastat, riik on paranenud 16 patsienti, viis patsienti jäi samaks. Positiivset dünaamikat täheldati nii mootori kui ka vaimse valdkonna küljel. Lihastoonust vähenes patsiendil kümnest ja patsiendi füüsiline aktiivsus suurenenud (vähenenud parees, paranenud liigutuste koordinatsiooni), manipuleeriv võime ülajäsemete oluliselt kasvanud viis last. Neli patsienti vähendada sagedus ja raskusaste epilepsiahoogude ja üks laps kogu vaatlusperioodi hoogude pärast operatsiooni ei ole olemas. Agressiivsus vähenenud kaks last kahes raskekujulise bulbar langusest parem neelata, kaks last suutsid närida oma 2 nädala jooksul pärast operatsiooni. Märgistatud raskusastme langust psüühikahäirete, üheksa last pärast operatsiooni enam rahulik uni ja tähelepanu on paranenud seitse patsienti. Kolm patsientidel tagajärjed apallic sündroom hakkas tunda oma vanemaid, üks - järgige kaks - öelda sõnad, kolm langenud tase düsartria. Autorid märgivad, et olulist paranemist patsientidel algab pärast 2 kuud pärast operatsiooni, saavutab maksimumi 5-6 kuud, siis määra paranemine aeglustub ja lõpuks aastal 50% patsientidest stabiliseerimise puhul. Positiivne mõju neurotransplantation oli aluseks kordusoperatsioon kuue patsientidel tagajärjed apallic sündroom, kuid teiselt poolkera aju. Tehnikaid ja teine siirdamise metoodika olid identsed esimese operatsiooni, kuid kliiniline efekt oli teises etapis madalam, kuigi see ei ole pärast esimest ja pärast teist operatsiooni tõsiseid tüsistusi. Vastavalt autorid terapeutiline toimemehhanismi seostatakse neurotransplantation neurotroofne mõju siirdatud embrüonaalsete närvikude, mis sisaldab suurel hulgal kasvu, hormonaalsed ja teisi bioloogiliselt aktiivseid aineid edendades remondiks kahjustatud neuronite ja plasti saneerimise saaja ajukoe. Ei ole välistatud, ja aktiveerides mõju tegevuse närvirakkude on säilinud morfoloogiliselt, kuid kaotatud funktsionaalset aktiivsust haigus. See on kiire neurotroofne mõju võib seletada parandamine bulbaarfunktsiooni mõnes laste lõpus esimesel või teisel nädalal pärast operatsiooni. Eeldatakse, et lisaks neile kolmanda neljanda kuu vahel pookida ja vastuvõtva aju on loodud Morpho-funktsionaalne side, mille kaudu neyrotransplantat asendab funktsiooni surnud ajurakke, mis on substraadiks paranemist nii mootorsõidukite ja vaimsete funktsioonide patsientidest.

Tagajärg siirdamist loote närvikoe reorganiseerimises interneuronaalses sidemetega eksperimentaalselt. Autorid valge rotid kasutades lipofiilne fluorestseeruvat silte mikrolüliti (1,1-dioktadetsüül-3,3,3 \ 3'-tetrametilindokarbotsianina perchlorate) ja laserkonfokaalmikroskoobi skaneeriva mustrid uuritud kogumine intermodule aksonite ühendused tsoonis mehaaniliste vigastuste suurajukoore embrüonaalsete siirdamise tausta närviline kude ja ilma selleta. Ta leidis, et kasutusele loote närvikude viiakse kahjustatud ala annab aksonikasvu, mis pärast läbib siiriku on ühendatud külgnevate ajukude, samas kui ilma siirdamise loote närvikoekahjustusi tsoonis on kasvav aksonite ületamatuks takistuseks. Selles töös siirdamist embrüonaalsete (15-17-nda päevani rasedusnädalal) neokorteksist. Meie tulemused - täiendavaid tõendeid kasuks aktiivset mõju embrüonaalsete närvikude siiriku temperatuuril traumajärgne saneerimise interneuronaalses seost külgneva struktuuriliste ja funktsionaalsete moodulite ajukoorde. Embrüonaalsete närvikude nähakse osaliselt parandanud suhteid portsjoniks jagatuna kahjudest ajukoore luues soodsad tingimused kasvu aksonite tsoonis siiriku neyrotrofichoskih teguritest. Taoline toime on tõestatud katseliselt ja arutatakse kirjanduse tõendina kõrge võimalust kahju plastist aju täiskasvanud loomi. Seoses sellega rakutransplantatsioonis peetakse nüüd optimaalse terapeutilise strateegia taastades funktsioonina inimese kahjustatud KNS.

Meie andmed tõhususe kohta looteaju närvikude nagu eksogeenses siirdamist keskkonnana aksonite kasvuväljavaateid tunnistust otstarbeka loomine sideühendused külgneva puutumata portsjoni ajus. Tegelik töö näib toime uurimiseks siirdamise Närvikoe dünaamika KNS funktsionaalseid parameetreid, mille ülesandeks oli uurida mõju siirdamist loote Lemmikud locus coeruleus (LC) kohta morfofunktsionaalseks näitajad LC neuroneid ja liikumisaktiivsust saajatele. Saajad olid naissoost Wistari rotid, doonorid - sama liini rottide 18 päeva vanused embrüod. Embrüonaalse LC-i transplantatsioon viidi läbi aju kolmanda vatsakese õõnes. Histoloogiliselt tuvastati 75% retsipient-loomadest siirdamist. Kasutamise korral läks transplantaat vatsakese seinale, täites selle valendiku 1 / 5-2 / 5 ja oli elujõuline. Pärast 1 ja 6 kuud pärast operatsiooni, siirdatud närvikude morfoloogilised iseloomulikud on struktuur, mis tekiks, kui tavapärane ontogenetic areng, see tähendab, et LC struktuuri. Meie andmed näitavad, et loomadel, kes olid siirdatud loote minekuks LC suur dünaamiline aktiivsus ja suurenenud aktiivsusega maatriksi LC rakutuumad kromatiini. Järelikult toimub oma LC neuronite aktiivsuse intensiivistumine, kuid implantaadi transplantaat on samuti funktsionaalselt aktiivne. On teada, et midbrain nn lokomotoorne piirkond peaaegu langeb LC lokaliseerimisega. Autorid usuvad, et muutuste põhjal motoorset aktiivsust saaja rottidel on aktiveerimist LC rakud, nii kaubanduslikud ning siiriku koos eraldamise tulemusena suurel hulgal norepinefriini, sealhulgas seljaaju segmentides. Seega eeldatakse, et lokomotoorse aktiivsuse tõusu siirdamisel LC tingimused paikneb terves loomade ajus olemasolu tõttu funktsionaalselt aktiivse siirdamist integreeritud ajus saaja ning aidates kaasa aktiveerimist liikumisaktiivsust rottidest.

Lisaks on näidatud, et siirdatud embrüonaalsete neuroepithelial rakud järjehoidjaid neokorteksist ja seljaaju jääda ja diferentseeruvad Neuroblaste, noorte ja küps närvirakkudest 1-2 kuud pärast siirdamist vigastatud istmikunärvi täiskasvanud rottidel. Uuringus dünaamika NADRN positiivse neuronite järjehoidjaid embrüonaalsete seljaaju ja neokorteksist roti heterotoopset allograftide (15 roti embrüo ööpäevas) pikilõigus läbi istmikunärvides rottide-saajad näitas implanteeritavust 70-80% neyrotransplantatov mis sõltub vaatluse ajaga. Neuroblaste uni- ja bipolaarse ümarate ereda tuumade ja üks või kaks nucleoli hakkavad kujunema siirikutes temperatuuril üks nädal pärast operatsiooni, millega kaasnes klastrite. Seas Neuroblaste autorid suutnud tuvastada sisaldavatest rakkudest NADPH-diafopazy (NADPH-d). Pärast 7-päevast NADPH-positiivsete olid vaid rakulised elemendid veresoonte - endoteliaalrakkudega kapillaare sisemuse pookida ja endoteeli ja veresoonte silelihasrakkude istmikunärvi saaja. Kuna veresoonte silelihasrakkude esilekutsumist NO süntaasi (NOS) esineb mõjul IL-1, autorid omistada välimuse NADPH-positiivsete silelihasrakkude veresoontes istmikunärvi esinemise IL-1 sünteesitud kahjustatud närvitüvedesse. On teada, et tingimustes neyronogenez siirdamisest looteaju järjehoidjaid sünkroniseeritud arengut neuronite in situ. Tulemusi Morfoloogiliste uuringud näitavad, et diferentseerumine närvi koostisosi siirdamist seitsme päeva jooksul pärast siirdamisoperatsiooni vastab raku diferentseerumise sarnaseid ajus vastsündinud rottidel. Seega heterotoopses siirdada perifeerse närvi siirdatud embrüot närvirakke ilmutavad võimet sünteesida NADPH-d. In Seljaajutrauma siirdamine paljastab rohkem sisaldavad närvirakud NADPH-d, pookoksad kui neokorteksist, kuid lämmastikoksiidi sünteesi siirdatud neuronite algab hiljemalt arengut in situ. In selgroogse kesknärvisüsteemi NOS-positiivsete rakkude ilmuvad juba sünnieelse jooksul. Usutakse, et NO aitab moodustamine sünaptiliste ühenduste arenevas ajus ning juuresolekul NOS-positiivsete närvi aferentidel pakkudes Neuroblaste NO sünteesi väikeajus, stimuleerib migratsiooni ja diferentseerumist neuronid, moodustades seeläbi Cytoarchitectonics normaalsest ajust. Oluline roll NO sinapsogeneze paigaldatud tectum - NOS-positiivsete neuronite olid ainult need, kes olid sünaptiliste ühenduste võrkkesta rakud.

On teada, et lämmastikoksiid on üks ajutegevuse regulaatoreid, kus see moodustub arginiinist NO süntaasi mõju all, millel on diabeetne aktiivsus. Kesknärvisüsteemis sünteesitakse Nö veresoonte, mikroglia, astrotsüütide ja mitmesuguste ajude neuronites endoteelirakkudes. Pärast traumaatilist ajukahjustust, samuti hüpoksiat ja isheemiat, suureneb NO-d sisaldavate neuronite arv, mis on üks ajuverevoolu regulaatoritest. Arvestades N0 võimet sünapogeneesi tekitamiseks on eriti oluline huvi NO-d sisaldavate rakkude moodustumise uurimine neurotransplantatsiooni tingimustes retsipiendi närvirakkude traumaatiliste vigastuste taustal.

Samuti on oluline uurida mõju Neurotransplantation tingrefleksi stereotüüp käitumine. Eksperimentides õpib mõju kauge intratserebraalsed (vahel Cli ja CHI) pookoksad Embrüonaalsete sinaka laigud (17-19-nda päevani rasedusnädalal) ja mälu sisu katehhoolamiinide protsessid rottidele hävitamise frontotemproaalsest neokorteksist näidanud, et elektrolüütiliste kahjustusi frontotemproaalsest ajukoores annab stereotüübi tingimisi emotsionaalse refleksi vältimisreaktsiooni (muutmälu), väheneb füsioloogilist aktiivsust, vähendab noradrenaliini ajukoore tsoon hüübinud kuid suureneb mistõttu selle taseme hüpotalamuses, kus kontsentratsiooni vähenemist epinefriini, kuigi veres ja adrenaliinid selle kogust suureneb.

Selle tulemusena intratserebraalsed embrüonaalsete kudede sinaka laigud 81,4% loomadest taastunud stereotüübi tingimisi emotsionaalse refleksi vältimisreaktsiooni, halvenenud elektrolüütilise kahjustusi frontotemporaalsete valdkondades ajukoorde normaliseeritud adrenaliin keskajus võrgustiku moodustumise, hüpotalamus ja neokorteksist ning hipokampus püstitab isegi selle tase koos vähenemine veres adrenaliini.

Kauge embrüonaalsete kudede sinaka laigud mitte ainult soodustab taastamist häiritud stereotüübi tingimisi emotsionaalse refleksi vältimisreaktsiooni rottidel kahjustusega elektrolüüdiks frontotemproaalsest ajukoores, vaid suurendab ka sisu norepinefriini ja epinefriini, peamiselt hüpotalamuses, veri, süda ja adrenaliinid. Oletatakse, et see on tingitud pookida vaskularisatsiooniks, penetratsiooni neurotransmitterite vereringesse, nende läbiminekut hematoentsefaalbarjääri ja aktiveerimise mehhanismid adrenaliin tagasihaarde ja noradrenaliini tagasihaarde liikide 1, 2, 3. Autorid usuvad, et stabiliseerumine pika noradrenaliini tasemeid siirdamine ja funktsiooni siiriku võib pidada nähtus oma järkjärgulise vabanemise neuronite minimaalses annustes sinaka laigud.

Positiivsed kliinilisi toimeid embrüonaalsete närvikude võib olla tingitud võime ning viimane mõjutada protsesse uute veresoonte moodustumist regulatsioonis otsest osalemist kasvufaktoreid ja tsütokiine. Aktiveeritud vaskulogeneesi angiogeensete kasvufaktorite - vaskulaarse endoteeli kasvufaktori (VEGF), FGF, PDGF ja TGF, mis on sünteesitud isheemia ajal teenindavad pärit baas angiogeneesi. On tõestatud, et kahandada veresoonte kasvupotentsiaali esineb vananemisprotsessi keha, mis mängib olulist rolli haiguste patogeneesis, nagu südame isheemiatõbi ja ateroskleroosi alajäsemete. Kudede isheemia areneb koos paljude teiste haigustega. Sissejuhatus angiogeensete faktorite isheemia tsoon (terapeutilise angiogeneesi) stimuleerib veresoonte kasvu isheemilise kudedes ning parandab mikrotsirkulatsiooni tõttu arengus kollateraalne vereringe, mis omakorda suurendab funktsionaalset aktiivsust elund.

Kliiniliseks kasutuseks kõige lootustandvamad on VEGF ja FGF. Esimeste randomiseeritud uuringute tulemused osutusid julgustavaks, eriti tingimusel, et angiogeensete tegurite optimaalsed annused ja manustamisviisid õigesti valitakse. Seoses sellega on läbi viidud inimese embrüonaalse ajukoe isoleeritud ekstrakti angiogeense aktiivsuse eksperimentaalne hindamine. Töös kasutati raseduse kahekümnendal nädalal saadud abordimaterjali ja töödeldi vastavalt I. Maciogi ja kaasautorite (1979) meetodile ANRF IC-i modifitseerimisel. See ravim on "Endoteelirakkude kasvu täiendus" ("Sigma") analoog ja see on inimeste angiogeensete tegurite loomulik segu, mis sisaldab VEGF-i ja FGF-i. Eksperimendid viidi läbi tagumises jäseme ja müokardi koe isheemia mudelite rottidega. Uuringu alkaliinfosfataasist aktiivsuse katseloomadega töödeldi ekstrakti embrüonaalsete närvikude, kasvu näitas mitmeid kapillaarid pinnaühiku müokardi - nii piki- ja põiki viilud sobivalt. Angiogenie ravimi aktiivsust avaldub viimiseks otse isheemilise tsooni ning juhul süsteemse (intramuskulaarselt) manustamist, mis tõi kaasa languse keskmine pindala infarkti armi.

Igal teostuses embrüonaalsete närvikude on äärmiselt oluline valida õige gestatsiooniperioodi vältel siirdatud embrüonaalsete materjalist. Võrdlevale rakupreparaadis embrüonaalsetest ventraalne keskajus 8-, 14- ja 16-17 päeva vanune embrüonaalsete rottidel kolme kuu möödumisel intrastriarnoy neurotransplantation suguküpset rottide parkinsonismi automatiseeritud test apomorfinindutsirovannoy motor asümmeetria näitas oluliselt suurem efektiivsus rakupreparaatidist KNS 8-päevase embrüo ja väikseim - 16-17 päeva embrüonaalsete närvikude. Saadud andmed on korrelatsioonis tulemused histomorfoloogilisi analüüsi eelkõige koos mõõtmetega pookoksad, neurogliia reaktsiooni tõsidust ja majanumber dopamiinergiliste neuronite neid.

Erinevused ravitoime loote närvikoe rakud võivad olla seotud astet laiaulatuslikule ja ebaküpsus rakud ise ja nende vastuseks erinevatele kasvufaktoreid, mis on eraldatud ala indutseeritud dopamiinergiliste neuronite kahjustusi. Eelkõige mõju EGF ja FGF2 arengus neuraalsed tüvirakud in vivo telencephalon esineb erinevatel etappidel embrüogeneesi. Neuroepiteeli rakud 8,5 päeva vanune hiire embrüote in vitro kultiveeritud vohama seerumivabas keskkonnas kohalolekul FGF2, kuid mitte EGF, mis reageerivad ainult tüvirakkude populatsiooni ajudest eraldatud embrüote hilisemates arengufaasides. Samal ajal, närvitüve rakud vohavad vastusena igale neist mitogeenideta ja kasvu additiivselt suureneb lisamise korral FGF2 ja EGF kultuurides madala rakutiheduse istutamiseks. Arvatakse, et EGF-reaktiivse närvisüsteemi tüvirakkude embrüonaalsete tsoonide 14,5 päeva vanune embrüo on lineaarne järeltulijad hiire FGF-reaktiivse närvisüsteemi tüvirakkude, mis ilmnevad esmased 8,5 tiinuspäeva. Neutraalse varre ja eellasrakkude potentsiaalne fenotüüp sõltub nende mikrokeskkonna komplekssest mõjust. Kui immunofenotüüpimine närvirakud ja hipokampuse periventrikulaarseid valdkondades 8-12- ja 17-20 nädala vanused inimese embrüote voolu tsütofluoromeetrias näitas märkimisväärset varieeruvust nii gestatsioonivanus ja individuaalse konstitutsioonilise funktsioone doonori biomaterial. Kui kultiveerides neuraalse eellasrakkude seerumivabas keskkonnas selektiivse EGF, FGF2 ja NGF neurosfääridest moodustatud kiirusega sisuliselt sõltumatud tiinust. Rakud erinevate ajupiirkondade 5-13 nädala inimese embrüo lühikese kultiveerimine FGF2 monokihtkultuurides laminiin substraati kohalolekul jälgede kasvufaktoreid toetades vohamist 6 nädala jooksul kõrge protsent nestinpozitivnyh rakud taustal moodustuvad spontaanselt rakkude markerid kõigi kolme read neuraalne eristamine. Rakud eraldati inimese keskajus ajal embrüo tiinus üle 13 nädala vohama mõjul EGF ja moodustavad samuti neurosfääridest. Tänu EGF ja FGF2 kombinatsioonile saavutati sünergistlik toime. Kõige intensiivsem vohamist neuraalsed tüvirakud täheldatakse välimuse neurosfääridest kultiveerimisel koe ajukoorde 6-8 nädala vanused inimembrüo juuresolekul EGF2, IGF1 ja 5% hobuse seerumit substraadil fibronektiiniga.

Tuleb märkida, et küsimusi, mis on seotud gestatsioonivanus ja osakonna embrüonaalsete KNS koesse on eelistatav kasutada eesmärgil Neurotransplantation avatuks. Vastused tuleb leida aju arengut neurogeneesi, mis jätkub kogu sünnieelse periood - aja jooksul kokkuleppele, kui epiteelis neuraaltoru moodustab mitmekihilised struktuur. Usutakse, et allikas tüvirakkude ja uute neuronite radiaalse gliiarakkude koosneb pikliku rakud pikkade protsesside radiaalse suunaga seina suhtes aju vesiikulid ja kokkupuutel sisepind vatsakesed ja välisseintega peaaju pia pinnale. Varasem Radial gliiarakkude õnnistatud ainult funktsioon neuronite trakti, mille migratsiooni Neuroblaste alates ventraalne pind sektsioonides ja annab raamistiku rolli kujunemist õige laminaarse korralduse ajukoores. Täna on tõestatud, et radiaalsete gliaaride väljatöötamine toimub astrotsüütideks. Palju on see vähenenud imetajatel pärast sündi, kuid need liiki loomi, mis radiaalne glia püsib läbi täiskasvanueas neyronogenez aktiivne vood ja sünnitusjärgsel perioodil.

Kultuuris rakke radiaalse neurogliia embrüonaalsete neokortikaalsetes moodustatud näriliste neuronite ja gliiarakkude ja temperatuuril tiinus embrüo arengu 14-16 päeva (perioodi maksimaalse valgustugevuse neyronogeneza ajukoores hiirte ja rottide) moodustatud peamiselt neuroneid. Vastupidi 18. Päeval embrüonaalsete diferentseerumise nihkus moodustumist astrotsüüdid märkimisväärse arvu vähenemine vastmoodustunud neuroneid. Märgistus in situ radiaalse gliiarakkude kasutades GFP lasti avastamiseks mullid õõnsuses ajus 15-16 päeva vanune roti embrüote asümmeetrilise jagunemise märgistatud rakke koos välimuse tütarrakkudele immunoloogiliselt ja elektrofüsioloogilised omadusi Neuroblaste. Tähelepanuväärne on, et vastavalt tulemustele dünaamilise tulenevad tähelepanekud Neuroblaste kasutab emarakus radiaalse gliiarakkude rännata pinnale pia.

Radiaalse glia endogeenne marker on vahepealsete neustini kiudude valk. Fluorestseeruvin rakusorteerimine läbivoolu märgistati retroviirus seostatakse GFP ja kontrolli all ekspresseeritud kohta nestin, näitas see, et tüvirakud hambakäärus piirkonda hipokampuses ja chyle isiku (materjal valmistati operatsioonil langetõve) väljendada nestin. Seetõttu kuuluvad nad radiaalne gliiarakkude mis inimestel nagu teistel imetajatel, säilinud ainult hambakäärus.

Kuid efektiivsuse rakutransplantatsioonis sõltub mitte ainult kõrge elujõulisuse doonorirakkude ja nende potentsiaali ja eristavaks tunnuseks asendada vigased elemendid, kuid eelkõige suunatud migratsiooni. See sõltub migratsiooni võime täielikult funktsionaalne integratsioon siirdatud rakud - lõhkumata cytoarchitectonics saaja aju. Kuna Radial gliiarakkude sünnitusjärgsel perioodil peaaegu täielikult avatud vähendamine, peaks teada, kuidas täiskasvanud saajate doonori rakud võivad liikuda valdkonnas siirdamise kesklinnas ajukahjustuse. On kaks varianti rakkude migratsiooni kesknärvisüsteemis, mis ei sõltu radiaalse gliiarakkude: nähtus tangentsiaalne migratsioon või liikumine Neuroblaste arengus ajukoorde risti radiaalse neurogliia võrgu, samuti migratsiooni "string" või "ahel". Eelkõige migratsiooni neuraalne eellasrakud rostraalse subventricular tsoonis toimub haistmissibulas jadana tihedalt kasutatavate lahtrite ümbritsetud gliiarakkude. Usutakse, et need rakud kasutavad partner rakkudest migratsiooni substraati, näiteks peamine regulaatorina rakk-rakk interaktsioone on PSA-NCAM (neuraalne adhesioonimolekul polisialirovannaya rakud). Seetõttu neuronite migratsiooni ei nõua tingimata osalemise Radial gliiarakkude või eelnev aksonite ühendusi. Vneradialnaya kujul rakkude liikumist "string" kohta rostral migratsiooni voogu hoitakse kogu elu, mis näitab tegelikku võimalust suunatud kohaletoimetamise siirdatud neuraaltoru tüvirakud täiskasvanud närvisüsteemi.

Hetkel hüpoteesi juuresolekul tüviraku liinid ontogeny aju mille kohaselt algstaadiumis ajuarengut Tüvirakud on rakud neuroepithelium, mis protsessi tähtaeguvaid transdiferentseeruma radiaalse gliiarakkude. Täiskasvanueas täidab tüvirakkude rolli rakud, millel on astrotsüütide tunnused. Hoolimata mitmete vastuolulisi küsimusi (poleemikat tüvirakkude hipokampuse, samuti sügav aju osades, mis ei ole mitmetasandiline struktuur maakoore ja arendamine talamusevalu künkad, kus radiaalne glia puudub), selge ja lihtne mõiste järjest fenotüübi tüvirakkude ajal ontogeny välimus väga atraktiivne.

Mõjurid mikrokeskkonna kindlaksmääramisel ja sellele järgnenud diferentseerumise närvirakkude differon selgelt näidanud siirdamise küpsete seljaaju tüvirakud roti erinevates osades küpse närvisüsteemis. Kui tüvirakud siirdati dentaatide küünistesse või hukkunud pirnide neuronite migratsioonipiirkonda, täheldati rakkude aktiivset siirdamist arvukatele neuronitele. Tüvirakkude siirdamine seljaajus ja hippokampuse pindalast tulemusena moodustusid astrotsüütide ja oligodendrotsüütide arvestades siirdamisel hambakäärus moodustusid mitte ainult gliiarakkude, vaid ka neuroneid.

Sugulisel täiskasvanud rotil võib jagunevate rakkude arv dentitaarvas piirkonnas ulatuda kuni tuhandeni päevas - vähem kui 1% teraviljarakkude koguarvust. Neuronid moodustavad 50-90% rakkudest, astrotsüüdid ja muud gliaalielemendid - umbes 15%. Ülejäänud rakud on antigeense omadusi neuronite ja gliiarakkude, kuid sisaldavad antigeene endoteelirakkude, näidates lähisuguluses neyronogeneza ja angiogeneesi hambakäärus. Endoteelirakkude diferentseerumise võimalused neuronaalsete progenitoorrakkudes viitavad endotheliotsüütide võimele in vitro sünteesida BDNF-i.

Visuaalselt kiirust ise kokku panna Närvivõrkude: protsessis diferentseerumist eellasrakud migreeruvad graanulrakkudest hambakäärus ja vorm kapsas kasvab poole tsoonis SAZ hipokampuse sünapside ning moodustab koos glutamatergiliste püramidaalse neuroneid ja pärssiv intercalary. Värskelt loodud teravilja-rakkude integreerida olemasolevatesse neuraaltoru ahelad 2 nädalat ja esimese sünapside juba ilmuvad 4-6 päeva pärast uute rakke. By sage manustamine küpse loomade BrdU või 3H-tümidiini (ühesuunaline selgitada tüvirakud) tuvastasime suur hulk märgistatud neuroneid ja astrotsüüdid hipokampuses, mis viitab võimalusele uute neuronite moodustumise mitte ainult hambakäärus, aga ka mujal hipokampuses. Huvi protsesside jagunemine, diferentseerumine ja rakkude surma hambakäärus hipokampuse aju küps tingitud asjaolust, et tekkimas siin neuronid paiknevad üks olulisemaid kohti hipokampuses, vastutab õppimise ja mälu protsessid.

Seega täna leitud, et rakud subependimnoy tsoon külgvatsakese küpse närilised esineda neuraalspetsiifiline eelkäija rakud migreeruvad piki rostral migratsiooni voos moodustunud pikisuunas orienteeritud Astrogliiakultuuride rakud haistesibulasse, kus nad on surutud kihis terad rakud diferentseeruvad närvirakkudest struktuur. Migratsioon eellasrakkude närvirakud leitud rostraalse migratsiooni voogu täiskasvanud ahvid, mis viitab võimalusele uute neuronite moodustumise haistesibulas primaatide. Neural eraldatud tüvirakud täiskasvanu haistmissibulas ja tõlgendatav liin, mida kloonitakse rakud, mis eristavad neuroniteks, astrotsüüdid ja oligodendrotsüüdid. Tüvirakke leitakse küpses aju hipokampus rotid, hiired, ahvid ja inimesed. Neuraalsed tüvirakud subgranular tsooni dentatus'es sidekirme on allikas eellasrakkude rändavad mediaalses ning külgmiste harude hipokampuses, kus nad diferentseeruvad küpseteks teraviljal rakkudes ja neurogliia elemente. Aksonid moodustatud de novo hambakäärus neuronite taandada valdkonnas SAZ, mis näitab, et äsja moodustatud neuronite rakendamisel osalevad hipokampuse funktsioone. Ühingulises piirkondades neokorteksist täiskasvanud ahvi aju leitud eellasrakkude neuronite siirduda subventricular tsooni. Uue kihi VI ajukoore püramidaalse neuronite uute hiirte avaldub läbi 2-28 nädalat pärast indutseeritud kahjustuste ja neuronite surm native see kiht rände tõttu dormantnyh varasema eellasrakud subventrikulaarses tsoonis. Lõpuks tegelikkus sünnitusjärgse neyronogeneza inimese aju näitab kahe kordset suurenemist arvu ajukoore närvirakkudes, jätkas esimesel 6 aastat pärast sündi.

Samavõrd oluline praktiline rakkude siirdamine on küsimus reguleerimise protsesse reprodutseerimise ja on närvisüsteemi tüvirakkude ja eellasrakkude. Kõrgeim väärtus tegurite seas, mis surub vohamist neuraalne eellasrakud on glükokortikoidi, mis vähendab olulisel määral jagunemiste arvu, samal ajal kui eemaldamist neerupealistes, vastupidi, suurendab oluliselt mitmeid mitoosi (Gould, 1996). Tähelepanuväärne on, et morfogeneesi hambakäärus närilistel on kõige intensiivsemad esimese kahe nädala postnataalsele arengule puudumisel reaktsioon stressi taustal järsk langus tootmise ja sekretsiooni steroidhormoonide neerupealiste. Kortikosteroidid pärsivad migratsiooni graanulrakkudest - uued neuronid ei sängitatud granuleeritud kiht Dentaatkäärus ja väratis jäävad. Eeldatakse, et samaaegselt rikutakse sünaptilise sideme moodustamise protsessi. Kaitsta rakke näiteks "steroid agressiooni" poolt läbi viidud miinimumini ekspressiooni mineraal- ja glükokortikoidi retseptorite proliferatsioonirakkudele ube mitte ainult väljatöötamise käigus Dentaatkäärus vaid ka täiskasvanud loomadega. Siiski kõik neuroneid ajus hipokampuse neuronites iseloomustab kõrge sisaldus glükokortikoidiretseptori, mis põhjustab stressi hipokampuses. Emotsionaalne stress ja stressisituatsioonis rõhuvad neyronogenez ja krooniline stress vähendab dramaatiliselt loomade võimet õppida uusi oskusi ja koolitust. Enam väljendunud negatiivset mõju kroonilise stressi neyronogenez on mõistetav, arvestades enamasti seisuolek närvisüsteemi tüvirakkude. Kui immobilisatsiooni tiinete rottide (näriliste - supramaksimaalne stressifaktor) on seatud sünnieelne stress põhjustab ka vähendada rakkude arv hambakäärus ja oluliselt pärsib neyronogenez. On teada, et glükokortikoidide osalevad patogeneesis depressiivsete seisundite, mis on morfoloogilised samaväärse pidurdusjõu neyronogeneza, patoloogiline neuronite ümberkorraldamise ja interneuronaalses ühendusi, samuti närvirakkude surma. Teiselt poolt, antidepressant kemoteraapiaravimitega aktiveerimiseks moodustumise neuronite de novo, mis kinnitab seost protsesside uute neuronite moodustumise hipokampuses ja arengu depressiooni. Olulist mõju neyronogenez on östrogeeni, mille mõju on vastupidine toime glükokortikoidide ja on toetada jagunemise ja ellujäämise neuraalne eellasrakud. Tuleb märkida, et östrogeenid suurendavad oluliselt loomade võimeid õppida. Mõned östrogeenide mõju autorid seonduvad tsellulaarsete muutustega rakkude hulga ja naiste arvu suurenemisega naistel.

On teada, et kontrollitud neyronogenez EGF, FGF ja BDNF siiski mehhanismide väliste signaalide tüvirakkudest mitogeenide ja kasvufaktoreid ei ole piisavalt uuritud. On leitud, et toetab PDGF in vitro neuronaalse päritoluga eellasrakud ja neurotroofset faktorit (CNTF), nagu triiodotüroniin stimuleerib valdavalt gliiarakkude - astrotsüüdid ja oligodendrotsüüdid. Hüpofüüsi adenülüültsüklaas aktiveeriv valk (PACAP) ja se peptiidi (VIP) aktiveerides vohamist neuraalne eellasrakud kuid pärsivad diferentseerumise töötleb tütarrakkudele. Opioidid, eriti pikaajalise kokkupuute korral, inhibeerivad märkimisväärselt neuronogeneesi. Kuid tüvirakud ja neuraalne eellasrakud-eellased hambakäärus ei avaldu opioidretseptoritega (mis esinevad diferentseerides neuronite embrüonaalsete periood), mis ei võimalda hinnata otsese opioidide toime.

Praktilise regeneratiivse ja plastilise meditsiini vajadused sundisid teadlasi pöörama erilist tähelepanu tüvirakkude pluri- ja multipotentsuse uurimisele. Selliste omaduste realiseerimine täiskasvanud organismide piirkondlike tüvirakkude tasemel pikas perspektiivis võiks tagada vajaliku siirdamismaterjali väljatöötamise. Eespool on näidatud, et närvisüsteemi tüvirakkude epigeneetiline stimulatsioon võimaldab närvi fenotüüpide järgi eelnevalt vormitud prolifereeruvate rakkude saamist, mis piirab nende arvu. Juhul totipotentsetes embrüonaalsete tüvirakkude omadused vohamist kuni piisaval arvul rakke toimub varem neuraalne diferentseerumine, Rakke paljundati ja kergesti muundada närvikoe fenotüüpi. Suhe neuraalsed tüvirakud PGCs eraldatud sisemise rakumassi blastotsüsti kultiveeritud ja kohustuslikud juuresolekul LIF, mis säilitab oma totipotency ja pooldumisvõime lõputult. Seejärel indutseeritakse retinoehape ESC neuronite diferentseerumisest. Siirdamine Nii saadud neuraalsed tüvirakud viiakse kahjustatud kinoliini ja 6-hüdroksüdopamiini juttkehas kaasneb nende diferentseerumist dopamiinergiliste ja serotonergiliste neuroneid. Pärast sissetoomine ajuga embrüo roti neuraalne eellasrakud saadud PGCs rännata erinevates valdkondades adressaadi ajus, sealhulgas ajukoores, juttkehas, vaheseina talamuse, hüpotalamuse ja väikeajus. Rakke jäänud vatsakese, epiteeli kaudu struktuuride meenutav neuraaltoru, samuti üksikute saarte neneyralnoy kude. Retsipient-embrüo aju parenüühmas tekitavad siirdatud rakud närvisüsteemis kolme põhiliiki. Mõned neist on piklikud apikaalsed dendriidid, püramidaalsed raku kehad ja basaalakononid, mis ulatuvad korsooni kaltsusse. Astrotsüüdid doonorpäritoluga venitada nende protsesside lähedal kapillaarid ja oligodendrotsüüdid tihedalt kontaktis müeliini varrukad, osaledes teket müeliini. Seega neuraalne eellasrakud saadud PGCs in vitro, mis on võimeline suunama piisava migratsiooni ja diferentseerumist signaale piirkondliku mikrokeskkonna pakkudes paljudes valdkondades arenevas ajuneuronites ja gliiarakkude.

Mõned autorid kaaluda võimalust de- ja piirkondlike transdiferentseerumise täiskasvanud tüvirakke. Kaudne kinnitus dediferentseerimisel koekultuuris laienemist nende mõjususi on andmeid implantatsiooni neuraalsed tüvirakud hiirtel luuüdi edasist arengut neid rakuliine, andes funktsionaalselt aktiivsed rakud perifeerse vere. Lisaks siirdamise geneetiliselt märgistatud (lacZ) neurosfäärisöötmes rakkudest saadud küpse või embrüonaalsete ajus, ajju kiiritatud hiirtele Müelosupressiooniga, viinud teket tüvirakkude mitte ainult neuraalne derivaadid, kuid põhjustab ka põlvkonna vererakud, mis näitab, et pluripotentsed neuraalne tüvirakud, realiseeritud väljaspool aju. Seega neuraalsed tüvirakud võivad diferentseeruda vererakud mõjul signaale luuüdi mikrokeskkond ajutise ümberkujundamise vereloome tüvirakkude. Teiselt poolt, siirdamisoperatsiooni luuüdi vereloome tüvirakkude arvu ajus seatud nende eristamine mõjul mikrokeskkonda ajukoes gliiarakkude ja närvirakud. Järelikult potentsiaali erinevus rovochny neuraalne ja vereloome tüvirakkude arvu ei piirdu koespetsiifika. Teisisõnu kohalikus mikrokeskkonnas muud tegurid kui iseloomulik aju ja luuüdi kudede saab muuta orientatsiooni nende rakkude diferentseerumist. On näidatud, et neuraalsed tüvirakud süstitakse veenidesse kiiritatud hiirtele loodud põrnas ja luuüdis populatsiooni müeloidse ning lümfi- ja ebaküpsete vereloomerakkudes. In vitro toime luuüdi morfogeneetilised valgud (BMP-d) ellujäämise ja diferentseerumise neuraalsed tüvirakud määratakse, nagu algstaadiumis embrüogeneesi arengus neuraalne või neurogliia suundades. Kultuuride neuraalsed tüvirakud 16. Päeva vanune roti embrüote BMP indutseerida astroglia ja neuronite arvestades kultuurides saadud tüvirakud sünnituseelse aju astrotsüüdid koosneda ainult. Lisaks BMP mahasurumiseks põlvkonna Oligodendrotsüütide in vitro, mis ilmuvad ainult lisades Noggin'ga antagonist BMP.

Protsessid omane vidonespetsifichnost transdiferentseerumise: vereloome tüvirakkude arvu, on inimese luuüdi siiratakse juttkehas täiskasvanud rottide, kandu valgeaine välimise kapsli, ipsi- ja kontralateraalsed neokorteksist kus need moodustavad astrotsitopodobnye rakulised elemendid (Azizi jt, 1998.). In allotransplantatsiooniks luuüdi tüvirakke ajukülgvatsakesse vastsündinu hiired migratsiooni vereloome tüvirakkude saab kindlaks teha eesaju ja väikeaju struktuure. Juttkehas ja molekulaarse hipokampuse rännanud transformeeritud rakud Astrotsüütides ja haistmissibulas, sisekihiks väikeaju graanulrakkudest ja ajutüve retikulaarformatsiooni moodustamaks neuron rakkude positiivset reaktsiooni neurofilamentide. Pärast veenisisest manustamist täiskasvanud hiirtel Vereloomerakkude GFP-märgistatud mikro- ja astrotsüüdid avastatud neokorteksist, talamuse, ajutüve ja väikeaju.

Lisaks Mesenhümaalsed tüvirakud luuüdis põhjustavate igat liiki sidekoerakud teatud tingimustel võib samuti töödelda neuraalne transdiferentseerumise (meelde tuletada allikas embrüonaalsete mesenhüümi on neuraalharjast rakud). Selgus, et stromaalsete Inimese luuüdi ja hiire in vitro kultiveeritud kohalolekul EGF või BDNF, express marker neuraalne eellasrakud nestin ning lisades erinevaid kombinatsioone kasvufaktoreid viib moodustamine rakkude markeritega neurogliia (GFAP) ja neuroni (tuumavalgu NeuN). Märgistatud süngeneetilisi mesenhümaalsed tüvirakud siirdati ajukülgvatsakesse aju vastsündinud hiired kantakse üle ning asuvad eesaju ja väikeaju lõhkumata cyto-arhitektuuri saaja ajus. Luuüdi mesenhümaalsed tüvirakud diferentseeruvad küpseteks astrotsüüdid juttkehas ja molekulaarse kihi hipokampuses, samuti asustamiseks haistmissibulas, väikeaju ja graanulite kihist võrgustiku moodustumise, mis on teisendatud neuroneid. Mesenhümaalseid tüvirakke inimese luuüdi on võimalik eristada in vitro viiakse macroglia ja pärast siirdamist integreeruda struktuuri rottide ajus. Otsene luuüdi siirdamist mesenhümaalsed tüvirakud täiskasvanud roti hipokampuses kaasneb ka nende migratsiooni ajuparenhüümi ja neurogliia diferentseerumist.

Eeldatakse, et luuüdi tüvirakkude siirdamine võib suurendada rakuteraapia võimalusi kesknärvisüsteemi haiguste jaoks, mida iseloomustab neuronite liigne patoloogiline surm. Tuleb siiski märkida, et mitte kõik teadlased tunnistama asjaolu vastastikuse ümberkujundamine neuraaltoru ja vereloome tüvirakkude, eriti in vivo tingimustes, mis on uuesti tõttu puuduvad usaldusväärsed markerid hinnata nende transdiferentseerumise ja edasiarendamine.

Tüvirakkude siirdamine avab uued perspektiivid rakulise geeniteraapia päritud neuroloogiliste häirete. Geneetilise muundamise neuraalsed tüvirakud hõlmab regulatoorsete geneetiliste konstruktsioonide kelle tooteid suhelda rakutsükli valgud automaatjuhtimise. Transduktsioonifaasi Nende geenide embrüonaalses eellasrakkude paljundamiseks kasutatavatele närvisüsteemi tüvirakkude. Enamus geneetiliselt muundatud rakkude kloonide käitub stabiilsete rakuliinide, näitab mingeid märke transformatsiooni in vivo või in vitro, kuid omab väljendatakse võimet kontaktide proliferatsiooni inhibeerimine. Kui korrutada siirdamisest transfekteeritud rakkudes minevikus kinnistunud koe retsipiendile lõhkumata cytoarchitectonics ja läbimata pahaloomulise muutuse. Doonori neuraalsed tüvirakud ei sandiks integratsiooni tsooni ja võrdselt konkureerida ruumi vastuvõtva eellasrakud. Kuid 2-3-nda päevani intensiivsuse jagades transfekteerijad rakud vähendas järsult, mis vastab kontakt pärssimine proliferatsiooni in vitro. Embrüos saaja närvitüve transfekteerijad ole anomaaliaid kesknärvisüsteemis, kes kõik ajupiirkondades kontaktis implantaandi normaalselt areneda. Pärast siirdamist kloonid neuraalsed tüvirakud kiiresti migreeruvad ala halduse ja ulatub sageli vastava suguvõimeliste tsoonide rostral tract adekvaatselt integreerides teiste ajupiirkondades. Kinnistades geneetiliselt muundatud kloonid ja transfekteeritud rakuliine neuraalsed tüvirakud ajju peremeesorganismi on tüüpiline mitte ainult embrüonaalsete periood: need rakud siirdatakse mitu tsooni KNS loode, vastsündinu, täiskasvanu ja isegi vananeva organismi adressaat ja eksponeerida samal ajal suutlikusele integratsiooni ja diferentseerimine. Eriti pärast siirdamist õõnsusesse peaaju vatsakestes transfekteeritud rakud migreeruvad kahjustamata hematoentsefaalbarjääri ning on lahutamatu osa rakulise funktsionaalse ajukoe. Doonori neuronid moodustavad sobivad sünapsid ja väljendavad spetsiifilisi ioonikanaleid. Säilitades terviklikkuse hematoentsefaalbarjääri astroglia derivaat närvisüsteemi tüvirakkude transfektantidelt sirutub protsessid peaaju veresooni ja oligodendrotsüüdid doonorpäritoluga express müeliinbaasproteiini ja müeliniseerivateks närviprotsessid.

Lisaks neuronite tüvirakkudele transfekteeritakse rakuvälistena kasutamiseks. Selline vektor-geneetiliste konstruktsioonide saada stabiilseid in vivo ekspressiooni võõraid geene arendamisega seotud närvisüsteemi või kasutatakse korrigeerimist geneetiline defekt, sest tooted nendest geenidest on võimalik kompenseerida erinevate biokeemiliste KNS kõrvalekaldeid. Siirdekalade aktiivsus transfekteeritud tüvirakkude ja piisava siirdamiseks tärkav tsoonid eri piirkondades aju arengut võimaldavad meil loota täielikku taastumist päriliku defitsiidi rakuensüümidele. Modelleerimisel sündroom, telangiektaasataksia (line mutanthiirtes pg ja pcd) Purkinje väikeaju kaovad katseloomadel esimestel nädalatel sünnijärgne areng. On näidatud, et selliste loomade neuroloogiliste tüvirakkude sissetoomiseks ajju kaasneb nende eristamine Purkinje rakkudesse ja graanulitena neuronidesse. Pcd mutantide korral on liikumise kooskõlastamine osaliselt korrigeeritud ja värisemise intensiivsus väheneb. Sarnased tulemused saadi kloonitud inimese närvisüsteemi tüvirakkude siirdamisel primaatidele, mille puhul onkanasias indutseeriti Purkinje rakkude degeneratsiooni. Pärast siirdamist leiti doonori närvisüsteemi tüvirakke granulaarsetes ja molekulaarsetes kihtides ning ka väikse parenüühhi Purkinje rakuklastis. Seetõttu on neuroloogiliste eellasrakkude geneetiline modifitseerimine võimeline tagama välise mõju suhtes resistentse fenotüübi stabiilse, pühendunud modifitseerimise. See on eriti oluline patoloogilistes protsessides, mis on seotud donorrakkude ellujäämist ja diferentseerumist pärssivate tegurite arenguga (näiteks immuunsüsteemi agressiivsusega).

Mukopolysakkaridoosi VII tüüpi inimestel iseloomustab progresseeruv neurodegeneratsiooni ja hilise vaimse arengu, et katsed hiirtega modelleeritud deletsioonimutatsioon geeni beeta-glükuronidaas. Pärast siirdamiseks ajuvatsakeste vastsündinu puudulikkusega hiiri saaja transfekteeritud neuraalsed tüvirakud eritavatelt beeta-glükuronidaas, doonorirakkude leiti esimene klemm valdkond ja seejärel laotati peaaju parenhüümi stabiilselt korrigiruya lüsosoomi terviklikkuse ajus mutanthiirtes. Mudelis Tay-Sachsi haiguse transdukteeriti retroviirus neuraalsed tüvirakud emakasisese manustamiseks hiire loote ja vastsündinud hiirtel siirdamine annab efektiivse ekspressiooni beetasubühiku beeta-heksosaminidaasi suublates kellel on mutatsioon, mis viib ebanormaalne ladestumine beta 2-gangliosiidisegu.

Teine valdkond taastav meditsiin on stimuleerida proliferatiivse ja diferentseerumist potentsiaali patsiendi enda neuraalsed tüvirakud. Eelkõige neuraalsed tüvirakud eritatud NT-3 juures hemisektsiooni seljaaju ja peaaju lämbus rotid väljendada NGF ja BDNF viiakse vaheseina ja basaalganglionidesse türosiinhüdroksülaas - juttkehas ja reelin - väikeaju ja müeliinbaasproteiini - ajus .

Kuid küsimusi stimulatsiooni neyronogeneza makstud ole piisavalt tähelepanu. Paar tööd näitavad, et funktsionaalne koormus närvi keskused vastutavad eristav lõhnad, kajastub uute neuronite moodustumise. Transgeensete hiirte defitsiitse neuronite adhesioonimolekule neyronogeneza intensiivsuse vähendamine ja arvu vähenemine rändavad neuronite haistmissibulas seostati halvenenud võime diskrimineerida lõhnad, kuigi lõhnalävega ja lühiajalise haistmismälu ei järgita. Eeskirja mängib olulist rolli neyronogeneza funktsionaalse seisundi rakkudes hambakäärus: nõrgenemine toime kokkupuutest glutamaadi terad pärast hävitamist rakkudes entorhinal ajukoores panustab proliferatsiooni ja diferentseerumist neuroneid ja kiud perforaatrajasse stimulatsiooni (primaarsete aferentsete sisendi hipokampus) põhjustab pärssimise neyronogeneza. Antagonistid NMDA-aktiveeritud retseptorid töötleb kasvaja neuronid, arvestades agonistide vastupidi, vähendab osatähtsus neyronogeneza selle kohta sarnaneb toime glükokortikoidide. Kirjanduses on vastuolus teadusuuringute tulemuste teavet katseliselt tõestatud pärssiv mõju erutusmediaator glutamaadi neyronogenez ole kooskõlas andmeid stimuleerimine aretus eellasrakud ja välimus uute neuronite suurendades hoogude hipokampuses loomade katsetes ja Kainic pilokarphappe mudelite epilepsia. Samal ajal on traditsioonilised epilepsia mudelis indutseeritud korrati alalävejuhtivuse stimuleerimine teatud ajupiirkondades (tulehakatist) ja seda iseloomustab kergemaid neuronite kadu neyronogeneza intensiivsus suureneb ainult hilises faasis tundlikustumist vaatlusel hipokampuses kahjustusi ja neuronite surm. On näidatud, et epilepsia hoogude stimuleeriv neyronogenez ebanormaalse lokaliseerimine uus graanul neuronid, millest paljud ilmuvad mitte ainult Dentaatkäärus vaid ka chyle. Need neuronid on tähtsad arengus tärkamine samblased kiududest, aksonid nagu nad puuduvad normaalsest külgsugulased Inverse moodustav sünapside mitmekordne külgneva terad-rakke.

Kasutamise piirkondliku neuraalsed tüvirakud avab uued perspektiivid kasutamist rakutransplantatsioonis ravis metaboolsete ja geneetiliste neurodegeneratiivsete haiguste, demüelinisatsioonihaiguste ja traumajärgne kesknärvisüsteemi häired funktsioone. Enne asendusrakkude siirdamise teostamist valib üks meetod meetodist ex vivo vajaliku neuronaalsete eellasrakkude rakuliinide otstarbeks eesmärgiga viia need otse aju kahjustatud piirkonda. Sellisel juhul on terapeutiline toime tingitud kahjustatud rakkude asendamisest või kasvufaktorite ja tsütokiinide kohaliku vabanemisega. Selle regeneratiiv-plastilise ravi meetodil on vaja piisavalt suurel hulgal eelnevalt määratletud funktsionaalsete omadustega rakkude siirdamist.

Asjakohane tuleb tunnustada ja täiendavaid uuringuid molekulaarsed omadused ja taastav ja plasti potentsiaalid tüvirakkude küpse aju, hästi kui võimet transdiferentseerumise piirkondliku tüvirakud erinevast koest. Täna sõelutud antigeenide hematopoeetiliseks luuüdi tüvirakkude sihikindlalt markeri kombinatsiooni võimeliste rakkude transdiferentseeruma närvitüve eellasrakud (CD 133+, 5E12 +, CD34-, CD45-, CD24). Rakud, mis moodustavad in vitro neurosfääre ja moodustavad neuronid, saadakse vastsündinud immuunpuudulikkusega hiirte siirdamisel ajju. Huvi rakukultuuride ksenotransplantoloogia vastu on uuringute tulemusena, mis käsitlevad rist-tüvirakkude siirdamise võimalust evolutsiooniliselt kaugetes taksonites. Jääb ilma korraliku tulemuste tõlgendamisel Implantaadi närvisüsteemi tüvirakkude valdkonnas ajukasvajate: siiratud rakkude aktiivse rändavad läbi kogu kasvaja mahtu, ületamata seda ja kasutuselevõtu rakud puutumata ajuosas täheldatud nende aktiivset migratsiooni kasvaja suhtes. Sellise rände bioloogilise tähtsuse küsimus jääb avatuks.

Tuleb märkida, et eduka siirdamise neuraalsed tüvirakud, samuti teiste neuraalne eellasrakud saadud hESCs, on võimalik ainult tingimustes kasutada kõrgelt neuraalne eellasrakud eristamatute embrüonaalsete tüvirakkude siirdamine täiskasvanud immunokompetentsete saaja paratamatult muundatakse teratoom ja teratokartsinoom. Isegi minimaalses koguses halvasti diferentseerunud rakkude doonorelement peatamise ulatus suureneb järsult ning tumorigeensusuuringuid siiriku lubamatult suurendavad riski kasvaja moodustumise või neneyralnoy kude. Valmistamine homogeense populatsiooni neuraalne eellasrakud on võimalik, kui kasutada alternatiivina allikas doonorikoele rakud tekivad teatud etappide tavaliselt voolab embrüogeneesi. Teine võimalus on põhjalikult soovimatute rakkude populatsioone tüvega konkreetse valiku. Oht esitab ka selleks neurotransplantation hESCs pärast alavalgustus in vitro kasvufaktoreid. Sel juhul rike ei saa välistada neuraaltoru diferentseerumise programmi moodustavad struktuure omane neuraaltoru.

Täna on selge, et neuraalsed tüvirakud eksponeerida tropismi KNS patoloogilised muutused ja ilmekas regeneratiivses klaasplastist efekti. Mikrokeskkonda allika rakusurma närvikoe simuleerib orientatsiooni diferentseerumist poogitud rakud, taastumas seega puudujääk spetsiifilise närvi koostisosi KNS ala. Teatud neurodegeneratiivsete toimub protsesse neurogeenne signaale rekapitulatsiooni neyronogeneza ja küpse neuraalsed tüvirakud ajus on võimelised reageerima juhendav teavet. Närvisüsteemi tüvirakkude terapeutiline potentsiaal on selge näide eksperimentaaluuringute arvukatest andmetest. Intratsisternaalseid manustamist kloone neuraalsed tüvirakud loomadele ligeerimine suurajuarteri (isheemilise insuldi mudel) aitab vähendada pindala ja ruumala hävitava muutusi ajupiirkonnas, eriti kui tegemist on siirdamisest neuraalsed tüvirakud koos FGF2. Vaatluste immunotsütokeemiliselt migratsiooniga doonorirakkude isheemilise alaks hilisemaks integreerimiseks puutumatu vastuvõtja rakkude ajus. Siirdamine ebaküpsed neuroepithelial rakuliine MHP36 hiire roti ajus eksperimentaalsetes insuldi parandada sensomotoorsed funktsiooni ning kehtestada need rakud ajju vatsakestesse suurendab kognitiivset funktsiooni. Selle tulemusena siirdamise, rotid valmismärgised hematopoeetiliseks neuraalspetsiifiline Inimese luuüdi eemaldatakse düsfunktsiooniga ajukoorde põhjustatud isheemilise kahjustuse. Seega heteroloogne neuraalne eellasrakud migreeruvad süstekohal alasse hävitava muutusi ajukoes. Intrakraniaalne luuüdi siirdamist rakud homoloogilise traumaatilise vigastuse ajukoore rottidel tulemuseks osalise motoorse funktsiooni taastumine. Prizhivlyayutsya doonori rakud vohavad läbivad neuraalne diferentseerumise neuroniteks ja astrotsüüdid ja migreeruvad kahjustuse suunas. Manustamisel juttkehas täiskasvanud rottide eksperimentaalse insuldi inimese kloonitud neuraalsed tüvirakud asendada kahjustatud KNS rakkudes ja taastada osaliselt häiritud ajutegevus.

Neural eraldatud tüvirakud embrüonaalsete soodsalt telencephalon mis arendab palju hiljem kui rohkem Kaudaalselt paiknev portsjonite närvitüves. Võimalus isoleerimise neuraalsed tüvirakud seljaajust 43-137-päevase inimlootel, kus leidub EGF ja FGF2 need rakud moodustavad neurosfääridest ja varajase läbipääsud eksponeerida multipotentiality diferentseeruda neuroniteks ja astrotsüüdid. Kuid pikaajalisel kasvatamisel neuraalse eellasrakud (üle 1 aasta) jätab nad multipotentsuse - sellised rakud saavad ainult diferentseeruvad astrotsüüdid, mis tähendab, et nad on unipotent. Regionaalne neuraalsed tüvirakud võib saada osalist bulbektomii ja pärast paljundamist kultuuris kohalolekul LIF siirdatud samale patsiendile neurodegeneratiivsete muutused teistes kesknärvisüsteemi osades. Kliinikus raku asendusravi kasutades neuraalsed tüvirakud esmakordselt läbi raviks insuldihaigetel koos kahjustuste basaalganglionite aju. Doonorrakkude siirdamise tulemusena on enamuse patsientide kliiniline seisund paranenud.

Mõned autorid usuvad, et võime närvisüsteemi tüvirakkude prizhivlyatsya rakud migreeruvad ja integreerida erinevatesse piirkondadesse närvikoe on kahjustatud kesknärvisüsteemi avab piiramatud võimalused rakuteraapia on mitte ainult kohaliku, vaid ka ulatuslik (insult või lämbumise), multiochagovyh (sclerosis multiplex), ja isegi ülemaailmne ( kõige päritud ainevahetushäired või neurodegeneratiivsete dementsus), patoloogilisi protsesse. Tõepoolest, kui siirdades kloonitud närvitüve hiire ja inimese rakkude retsipientloomad (hiirtel ja primaatidel, vastavalt) alates taandareng dopamiinergiliste neuronite mezostrialnoy süsteemi tekitatud primaarsed metüül-fenüül-tetrapiridina (mudel Parkinsoni tõbi) 8 kuud enne siirdamist, doonori neuraalsed tüvirakud on integreeritud retsipiendi kesknärvisüsteemi. Kuu aega hiljem, siirdatud rakud asuvad kahepoolselt mööda keskaju. Osa saadud neuronite päritolu väljendab tirozingidrolazu doonori puudumisel immuunvastuse siirdamist. Rottidel, keda raviti 6-hüdroksüdopamiini (Järgmises eksperimentaalses mudelis Parkinsoni tõbi), kohandamine mikrokeskkonda siiratud rakud peremehesse aju määrati kultiveerimistingimustel närvisüsteemi tüvirakkude enne siirdamist. Neuraalsed tüvirakud kiiresti vohavate in vitro mõjul EGF, mis koosneb puudujäägi dopamiinergiliste neuronite juttkehas vigastatud tõhusamalt kui rakke 28 päeva vanune kultuurides. Autorid usuvad, et see on tingitud võimetus tajuda signaale vastava diferentseerumise rakujagunemisel in vitro-neuraalne eellasrakud.

Mõnedes uuringutes on üritanud mõju suurendamiseks vigastatud juttkeha reinnervation protsessid siirdades sellesse piirkonda Embrüonaalsete juttkehas rakke allikana neurotroofsed faktorid samaaegse siirdamise dopamiinergiliste neuronite ventraalpiirkona keskajus. Nagu selgub, sõltub neurotransplantaadi efektiivsus suuresti embrüonaalse närvirakkude sisestamise meetodist. Selle tulemusena uuringud siirdamise ettevalmistused loote närvikude arvesse Ajuvatsakesed aju (et vältida vigastusi juttkeha parenhüümi) saadud informatsioon nende positiivne mõju parkinsonismi mootori defekti.

Kuid ka teistes uuringutes, eksperimentaalsed tähelepanekud on näidanud, et siirdamise ajju vatsake preparaadid embrüonaalsete ventraalne keskajus närvikude sisaldavate dopamiinergiliste neuronite siirdades GABAergic närvi koostisosi embrüonaalses roti juttkehas gemiparkinsonizmom ei soodusta taastamist häiritud funktsiooni dopamiinergilise süsteemi. Vastupidi, Immunotsütokeemiliste kinnitas tõendeid madala elulemuse dopamiinergiliste neuronite ventraalpiirkona keskajus, siiratakse juttkehas rottide. Ravitoime intraventrikulaarsed embrüonaalsete ventraalne keskajus närvikude realiseerida ainult siis, kui üheaegse siirdamiseks denerveeritava juttkehas preparaat juttkeha embrüonaalsed rakud. Autorid näitavad, et selle toime mehhanism on seotud positiivse troofilise toime GABA rakkude embrüonaalses juttkeha konkreetse dopamiinergilise aktiivsuse intraventrikulaarsed siirdamine ventraalne keskaju. Väljendatud neurogliia reaktsiooni transplantides kaasnes kerget regressiooni näitajad apomorfiini test. Viimast omakorda korrelatsioonis seerumi sisu GFAP, mis osutab otse rikkumise hematoentsefaalbarjääri läbitavus. Nende andmete põhjal järeldasid autorid, et GFAP seerumi võib kasutada piisaval määral funktsionaalse seisundi siirdamisoperatsiooni ning suurendas läbitavus hematoentsefaalbarjääri jaoks neurospecific GFAP-tüüpi antigeen on patogeneetilised lingile arengus siiriku hülgamiseni tingitud autoimmuunse kahjustuse närvikoe saaja .

Alates seisukohast teiste teadlaste, siirdamine ja integratsiooni närvisüsteemi tüvirakkude siirdamise järel stabiilne ja elu, nagu doonorirakke leitud saaja vähemalt kaks aastat pärast siirdamist ning ilma märkimisväärse vähenemise nende arvu. Katsed seda seletada asjaoluga, et diferentseerumata olekus neuraalsed tüvirakud ei avaldu MHC klass I ja II tasemel, millest piisaks immuunvastuse esilekutsumiseks äratõukereaktsiooni, saab lugeda kehtivaks ainult seoses halvasti diferentseerunud neuraalne eellastest. Kuid mitte kõik retsipiendi aju närvisüsteemi tüvirakud püsivad ebatõenäolises olekus. Enamik neist läbib diferentseerumise, mille jooksul MHC molekulid ekspresseeritakse täielikult.

Eelkõige puudumine kasutamise efektiivsust raviks eksperimentaalse parkinsonismi ravimid intrastriarnoy embrüonaalsete ventraalne keskajus, mis sisaldab dopamiinergiliste neuronite seostatud vähese ellujäämist siirdatud dofaminer- cal neuronid (ainult 5-20%), mis on põhjustatud reaktiivset glioosi saatvad kohaliku trauma Ajukoes temperatuuril siirdamine. On teada, et kohaliku vigastuse Ajukoes ja seonduvad glioosiga juhtima häireid hematoentsefaalbarjääri terviklikkuse juurdepääsu perifeerse vere antigeen närvikude, eelkõige närviraku ja okara antigeeni. Esinemine veres nende antigeenide võib esile kutsuda tsütotoksilised antikehad neile ja arendada autoimmuunne agressioon.

Cymbalyuk V. Jt (2001) teatasid, et see kehtib siiani jääb traditsioonilise seisukohast, mille kohaselt on KNS on immunoloogiliselt priviligeeritud piirkond, mis on eraldatud immuunsüsteemi hematoentsefaalbarjääri. Kirjanduste ülevaates osutavad autorid mitmetele uuringutele, mis viitavad sellele, et see vaade ei vasta täielikult imetajate aju immuunprotsesside olemusele. On leitud, et märgistatud toimeaine viimist Ajukoes võib ulatuda sügavad emakakaela lümfisõlmed ja pärast intratserebraalsed antigeeni sisestamist organismis moodustavad spetsiifilised antikehad. Rakud lümfisõlmedesse vastutab vohamist selliste antigeenide alustades 5-nda päevani pärast süstimist. Spetsiifiliste antikehade moodustumine ilmnes ka naha siirdamisel aju parenhüümi. Uuringu autorid annavad mitmeid võimalusi antigeeni transportimiseks ajust lümfisüsteemi. Üks neist on antigeenide üleminek perivaskulaarsetest ruumidest kuni subarahnoidsesse ruumi. Eeldatakse, et suurte tserebraalsete veresoontega paiknevad perivaskulaarsed ruumid on samaväärsed aju lümfisüsteemiga. Teine viis peitub valgete kiudude - läbi lattida luu nina limaskesta lümfisõlmedesse. Lisaks on dura materis laialdane lümfisõlmede võrgustik. Vere-rakkude barjäär lümfotsüütide jaoks on samuti väga suhteline. On tõestatud, et aktiveeritud lümfotsüütide on võimelised tootma ensüüme, mis mõjutavad läbilaskvust struktuur "immuunsüsteemi filter" aju. Aktiveeritud T-abistajad tungivad kapillaarsete venulaadide tasemeni läbi intaktse vere-aju barjääri. Väide väidetava antigeeni esindavate rakkude puudumise kohta ajus ei kritiseerita. Praegu on veenvalt tõestatud võimalust esindada antigeene kesknärvisüsteemis vähemalt kolme tüüpi rakke. Esiteks on need luuüdi päritolu dendriitrakud, mis paiknevad ajus piki suuri veresooni ja valgete ainete aju. Teiseks antigeenide suudavad esitlevate endoteliaalrakkudega veresooni ajus, ja koos MHC antigeenide mis toetab klonaalsest kasvu spetsiifilised nende antigeenide T-rakke. Kolmandaks, mikro- ja astroglia rakud toimivad antigeeni esitlevate ainetena. Osaledes immuunvastuse KNS, astrotsüüdid omandada omadused immunnoeffektornoy rakkudes ja väljendada mitmeid antigeene, tsütokiinide ja immunomodulaatorid. Kui inkubeeriti y-interferoon (y-INF) in vitro Astrogliiakultuuride rakud ekspresseerivad MHC klass I antigeenid ja II ning stimuleeriti astrotsüüdid suudavad antigeeni esindatuse ja hoides klonaalsest lümfotsüütide vohamise.

Ajukoe trauma, operatsioonijärgne põletik, turse ja fibriini ladestused saatvad siirdamist loote närvikude, luua tingimused läbilaskvuse suurendamiseks vere-aju barjääri häiretega autotolerantsust, ülitundlikkust ja aktivatsiooni SDZ + CD4 + lümfotsüütide poolt. Auto- ja esitlemise alloantigeene läbi astrotsüüdid ja mikrogliiarakkudes reageerivad y-INF väljendades MHC molekuliga, ICAM1, LFA-I, LFA-3, kostimulaatormolekulide B7-1 (CD80) ja B7-2 (CD86), samuti IL-la, IL-ip ja y-INF.

Järelikult ei saa asjaolu, et pikem ellujäämine embrüonaalsete närvikude hetkel intratserebraalsed siirdamise, mitte selle perifeerne manustamine võib vaevalt omistada puudumine algatamisest siirdamise immuunsus. Eriti kuna monotsüüdid, aktiveeritud lümfotsüütide (tsütotoksiline CD3 + CD8 + ja abistaja T-rakud) ja tsütokiinide nad toodavad, samuti antikehad antigeenide perifeerse siirdamist loote närvikoe mängivad olulist rolli selle tagasilükkamise. Mõned tähtsusega tingimuste loomine vastupidavamate resistentsuse neyrotransplantatov T-rakkude immuunprotsessides on madal tase MHC molekulide embrüonaalsete närvikude. Sellepärast katses immuunpõletiku pärast embrüonaalsete närvikoe aju areneb aeglasemalt kui pärast nahasiirdamine. Kuid pärast 6 kuud, on täielik hävitamine üksikute pookoksi närvikude. Valdkonnas siirdamise lokaliseeritud valdavalt T lümfotsüüte piiratud antigeenide MHC klass II (Nicholas et al., 1988). Tehti kindlaks katseliselt et neurotransplantation ksenologicheskoy ammendumine T-abistaja (L3T4 +), kuid mitte tsütotoksilised T-lümfotsüüdid (Lyt-2), pikendab elulemust roti närvikoe ajus retsipienthiirte. Neyrotransplantata tagasilükkamine kaasneb infiltratsiooni makrofaagid ja T-lümfotsüüdid vastuvõtva. Seetõttu makrofaagides ja mikrogliiarakkudes in situ peremehe toimivad immunostimulaatoroligonukleotiid antigeeni esitlevate rakkude, ja kasv doonori antigeenide MHC klass I ekspressiooni suurendab tsütotoksilist killer aktiivsuse vastuvõtja T lümfotsüüdid.

Ei ole mõtet analüüsida mitmeid katseid, et selgitada spekulatiivne neyrotransplantata äratõukereaktsiooni vastuvõtva organismi immuunsüsteemi endoteeli rakkudes või gliiarakkude doonori elemente puhtad jooned ja neuraaltoru eellasrakud läbivad immuunsüsteemi rünnaku. Tähelepanuväärne sõnumi, et mehhanismide pikema siiriku ellujäämist lähemal kesknärvisüsteemi mängib olulist rolli ekspressiooni luuüdirakkudega Fas-ligandiga seondumise apoptoosi retseptori (Fas-molekuli) T-lümfotsüütidel infiltreeruvad aju ja indutseerida apoptoosi, mis on tüüpiline barjääri autoimmunogeensete kudede kaitsemehhanism.

Nagu tabavalt märkis Cymbalyuk V. Jt (2001) transplantatsioon embrüonaalsete närvikude iseloomustab arengut käpapõletik tundlikul aju antigeenide ja aktiveeritud rakkudes, antikehi ja ka tänu kohaliku tsütokiinide tootmist. Tähtsat osa mängivad originaalkampaaniates ülitundlikkust organismilt aju antigeene, mis leiab aset KNS haiguste tekkimise ja võib olla suunatud siirdamist antigeenidega. Sellepärast tegeliku eluea pikendamiseks koeühtesobivuse neyrotransplantatov saavutada ainult mahasurumine immuunsüsteemi manustamise kaudu tsüklosporiin A või monokloonseid antikehi CD4 + lümfotsüütide saajale.

Seega on mitmed neurotransplantatsiooni probleemid lahendamata, sealhulgas need, mis on seotud kudede immunoloogilise ühilduvusega ja mida saab lahendada alles pärast sihtotstarbelisi põhi- ja kliinilisi uuringuid.