Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) nakkushaiguste diagnoosimisel
Viimati vaadatud: 23.04.2024
Kõik iLive'i sisu vaadatakse meditsiiniliselt läbi või seda kontrollitakse, et tagada võimalikult suur faktiline täpsus.
Meil on ranged allhanke juhised ja link ainult mainekate meediakanalite, akadeemiliste teadusasutuste ja võimaluse korral meditsiiniliselt vastastikuste eksperthinnangutega. Pange tähele, et sulgudes ([1], [2] jne) olevad numbrid on nende uuringute linkideks.
Kui tunnete, et mõni meie sisu on ebatäpne, aegunud või muul viisil küsitav, valige see ja vajutage Ctrl + Enter.
PCR - üks meetodid DNA diagnostika võimaldab suurendada koopiate arvu tuvastatava genoomi osa (DNA) bakterite või viiruste on miljon korda, kasutades DNA polümeraasi ensüümi. Katse selle konkreetse genoomse nukleiinhappe segmendi korduvalt korrutatud (võimendatud), mis võimaldab neid tuvastada. Esiteks DNA molekuli bakterite või viiruste kuumutamisega jaguneb kaheks ketid, seejärel juuresolekul sünteesitud DNA praimerid (nukleotiidide järjestus spetsiifilised määratletud genoomse) on siduv nende komplementaarsete lõikude DNA, sünteesiti teise ahela nukleiinhappe pärast iga praimerit kohalolekul termostabiilsele DNA polümeraasi . Selgub kahe DNA molekuli. Protsessi korratakse mitu korda. Diagnoosimise ainult üks DNA molekul, st ühe bakteri või viiruse osakese. Lastes lisasamm - DNA sünteesi RNA molekuli kasutades ensüümi pöördtranskriptaasi - on võimaldanud testida RNA viirused nagu HCV viirusega. PCR - kolmes etapis, kordustsüklid anniilimis- praimerite DNA sünteesi (polümerisatsiooni). DNA kogus sünteesitakse oli eristab ELISA või elektroforeesi.
PCR võib kasutada erinevaid bioloogilise materjali - seerum või vereplasma, kraapides kusiti, biopsia, pleuravedelik, tserebrospinaalvedelik, jne Esimene PCR diagnoosimiseks kasutatakse nakkushaiguste nagu viiruslik hepatiit B, viirushepatiit C, viirushepatiit D, CMV infektsiooni, nakkuslik sugulisel teel levivate haiguste (gonorröa, prügikasti diynaya, mükoplasma, ureaplasma infektsioon), tuberkuloos, HIV -infektsiya jne
PCR-i eelis nakkushaiguste diagnoosimisel teiste uurimismeetodite puhul on järgmine:
- infektsiooni tekitaja võib leida keha bioloogilistes keskkondades, sealhulgas biopsia abil saadud materjalist;
- Nakkushaigusi on võimalik haiguse varases staadiumis diagnoosida;
- Võimalik on uurimistulemuste kvantitatiivne hindamine (kui palju uuritavas materjalis on viirusi või baktereid);
- meetodi kõrge tundlikkus; nt tundlikkus PCR DNA detekteerimiseks B-hepatiidi viiruse veres on 0001 pg / ml (ligikaudu 4 x 10 2 koopiat / ml), samal ajal kui tundlikkust DNA hübridisatsiooni meetodil hargnenud sondide - 2,1 pg / ml (ligikaudu 7 x 10 5 koopiat / ml).
[