Antibiootikumide tundlikkuse testimine: ettevalmistus, dešifreerimine, kui palju tehakse

Tänapäeval on antibiootikumide tundlikkuse testimine üha populaarsem. Inimese mikrofloora on üsna mitmekesine, seda esindab suur hulk mikroorganisme erinevates biotoopides.

Farmaatsiaettevõtted on välja töötanud suure hulga antibakteriaalseid aineid, antibiootikume, mis aitavad säilitada normaalset mikroobide populatsioonide suhet ja arvu. Antibiootikumide ajastu algusega on ravitud palju haigusi, mida varem peeti surmavaks. Kuid ka mikroorganismid püüavad ellu jääda, kohandudes järk-järgult antibakteriaalsete ravimite toimega. Aja jooksul on paljud neist omandanud resistentsuse paljude ravimite suhtes, kinnistanud selle genotüübis ja hakanud seda põlvest põlve edasi andma. Seega on uued mikroorganismid esialgu teatud ravimite suhtes tundetud ja nende kasutamine võib olla ebaefektiivne. Apteekrid arendavad üha uusi tooteid, lisades neile uusi toimeaineid, muutes põhivalemit. Kuid järk-järgult tekib ka nende suhtes resistentsus.

Mikrofloora suurenenud resistentsuse põhjus paljude ravimite ja isegi nende analoogide suhtes peitub sageli antibiootikumide vales ja kontrollimatus tarvitamises. Arstid määravad antibiootikume ja nende kombinatsioone mitmesuguste bakteriaalsete haiguste korral. Samal ajal puudub esialgne hinnang nende efektiivsuse kohta ega valita optimaalset annust, mis on väga oluline nii ravi kui ka edasise resistentsuse tekkemehhanismide ennetamiseks. Paljud inimesed määravad ekslikult antibakteriaalset ravi isegi viirushaiguste korral, mis on ebaefektiivne, kuna antibiootikum ei toimi viiruste vastu.

Sageli määratakse ravi ilma eelneva tundlikkustestita, toimeaine ja iga konkreetse haiguse ja biotoobi jaoks vajaliku annuse valimist ei tehta. Kuna antibiootikume määratakse "pimesi", on sageli juhtumeid, kus need ei näita mingit aktiivsust haigust põhjustanud mikroorganismide vastu, mille arvukust tuleb vähendada. Selle asemel mõjutavad nad teisi mikrofloora esindajaid, mille tulemuseks on düsbakterioos, mis on samuti üsna ohtlik patoloogia ja võib viia tõsiste tagajärgedeni. Eriti ohtlikud on juhtumid, kus antibiootikum hävitab normaalse mikrofloora, mis on loodud keha kaitsmiseks ja selle normaalse toimimise säilitamiseks. Samuti on juhtumeid, kus ravimit on välja kirjutatud liiga palju või liiga vähe.

Patsiendid on ka ravi suhtes vastutustundetud. Sageli lõpetatakse ravi pärast seda, kui haiguse sümptomid on häirimise lakanud. Samal ajal eelistavad paljud mitte kogu kuuri läbida. See on üks teguritest, mis soodustab bakterite resistentsuse teket. Täielik kuur on mõeldud patogeense mikrofloora täielikuks hävitamiseks. Kui kuuri ei lõpetata, ei hävitata seda täielikult. Need mikroorganismid, mis ellu jäävad, läbivad mutatsioone, arendavad mehhanisme, mis pakuvad neile kaitset selle ravimi eest ja annavad selle edasi järgmistele põlvkondadele. Oht on selles, et resistentsus tekib mitte ainult selle konkreetse ravimi, vaid ka kogu ravimirühma suhtes.

Seetõttu on tänapäeval üks ratsionaalse ravi ja resistentsuse ennetamise kõige tõhusamaid vahendeid ettenähtud ravimi tundlikkuse esialgne määramine ja selle optimaalse annuse valimine.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]

Menetluse tähised antibiootikumitundlikkuse testid

Tavaliselt tuleks selline analüüs läbi viia kõigil juhtudel, kui on vaja antibakteriaalset ravi. Antibiootikumravi põhiseaduste kohaselt saab mis tahes antibiootikumi välja kirjutada alles pärast mikrofloora tundlikkuse esialgset hindamist selle aine suhtes ja toimeaine optimaalse kontsentratsiooni määramist laboritingimustes. Praktikas ei tehta sellist uuringut erinevatel põhjustel ja asjaoludel enne ravi alustamist ning arst on sunnitud ravimit valima "juhuslikult".

Tänapäeval tehakse tundlikkustesti ainult juhtudel, kui arstil on tõsiseid kahtlusi välja kirjutatud ravimi efektiivsuses, ravimi pikaajalise toime puudumise korral ja ka sama ravimi korduval kasutamisel piiratud aja jooksul. Tundlikkust määratakse sageli sugulisel teel levivate haiguste ravis. Paljud spetsialistid pöörduvad analüüsi poole kõrvaltoimete, allergiliste reaktsioonide korral ja kui on vaja üks ravim teisega asendada.

Analüüsi kasutatakse sageli ka antibakteriaalse ravi ravimite valimiseks taastumisperioodil pärast operatsioone, laparoskoopilisi sekkumisi ja elundite eemaldamist. Kirurgia ja mädase kirurgia osakondades on selline uuring lihtsalt vajalik, kuna resistentsus tekib siin üsna kiiresti. Lisaks tekivad üliresistentsed "haiglas omandatud" viirused. Paljud erakliinikud suhtuvad ravimite väljakirjutamisse täie vastutustundega - alles pärast tundlikkuse kontrollimist. Paljudel juhtudel ei võimalda riigiasutuste eelarve lihtsalt selliste uuringute läbiviimist iga patsiendi jaoks, kes vajab antibakteriaalset ravi.

[ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Ettevalmistus

Uuringuks ettevalmistumine ei nõua mingeid erimeetmeid. See on sama mis iga testi puhul. Mõni päev enne uuringut tuleks hoiduda alkoholi tarvitamisest. Hommikul, materjali kogumise päeval, ei saa enamasti süüa ega juua. Kuid kõik sõltub analüüsi tüübist. Uuringu materjal võib haigusest olenevalt olla erinev.

Kurgu ja hingamisteede haiguste korral võetakse kurgu- ja ninaproov. Veneroloogias, günekoloogias, uroloogias võetakse analüüsiks suguelundite proovid ja veri. Neeruhaiguste korral on sageli vaja uriini. Seedetrakti haiguste ja mõnede nakkushaiguste korral uuritakse väljaheiteid ja okset. Mõnikord saab uurida rinnapiima, ninaeritist, silmaeritist, sülge ja röga. Raskete patoloogiate ja nakkusprotsessi kahtluse korral uuritakse isegi tserebrospinaalvedelikku. Spekter on üsna lai.

Materjali kogumise iseärasused määratakse selle bioloogilise kuuluvuse järgi. Seega kogutakse uriin ja väljaheited hommikul puhtasse anumasse või spetsiaalsesse bioloogilise materjali anumasse. Rinnapiim kogutakse enne toitmist. Keskmine osa võetakse uurimiseks. Ääreproov kogutakse spetsiaalse tampooni abil, mis viiakse mööda limaskestasid ja seejärel langetatakse ettevalmistatud söötmega katseklaasi. Veri kogutakse katseklaasi sõrmest või veenist. Ääreproovide kogumisel kusitist või tupest on soovitatav hoiduda seksuaalvahekorrast mitu päeva.

Bioloogilise materjali kogumisel uuringuteks on kõigepealt vaja tagada õige kogumine ja steriilsus. Kuid enamasti on see meditsiinipersonali mure, patsient ei peaks selle pärast muretsema. Kõige sagedamini pöörduvad selliste uuringute poole günekoloogid ja uroloogid, teisel kohal - otolarüngoloogid ninaneelu ja neelu, ülemiste hingamisteede haiguste ravis.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Tehnika antibiootikumitundlikkuse testid

Kogutud bioloogiline materjal toimetatakse steriilsetes tingimustes laborisse, kus tehakse edasisi uuringuid. Esmalt külvatakse see universaalsele söötmele. Osa materjalist võetakse ka mikroskoopiliseks uurimiseks. Valmistatakse mikroskoopiaproov ja viiakse läbi uuring, mille abil on võimalik saada ligikaudne pilt ja oletada, millised mikroorganismid proovis esinevad. See võimaldab valida optimaalseimad keskkonnad edasiseks uurimiseks ja mikroorganismide identifitseerimiseks. Samuti on mikroskoopial näha põletikule ja onkoloogilistele protsessidele viitavaid märke.

Mitme päeva jooksul kasvavad mikroorganismide kolooniad Petri tassis. Seejärel võetakse mitu kolooniat ja viiakse selektiivsetesse söötmetesse, mis võimaldavad määrata ligikaudse mikroorganismide rühma. Neid inkubeeritakse mitu päeva termostaadis ja seejärel algab identifitseerimine (mikroorganismi tüübi määramine). Identifitseerimine toimub spetsiaalsete biokeemiliste ja geneetiliste testide, identifikaatorite abil. Lisaks saab läbi viia immunoloogilisi uuringuid.

Pärast peamise patogeeni isoleerimist hinnatakse selle tundlikkust antibiootikumide suhtes. Selleks on mitu meetodit. Kõige sagedamini kasutatav meetod on järjestikune lahjendusmeetod ehk ketasdifusioonimeetod. Meetodeid on üksikasjalikult kirjeldatud mikrobioloogilistes teatmeteostes, suunistes ja laboristandardites.

Ketasdifusioonmeetodi olemus seisneb selles, et tuvastatud mikroorganismid külvatakse toitekeskkonnale ja peale asetatakse spetsiaalsed antibiootikumides immutatud kettad. Külvi inkubeeritakse termostaadis mitu päeva, seejärel mõõdetakse tulemusi. Hinnatakse iga antibiootikumi bakterite kasvu pärssimise astet. Kui bakter on antibiootikumi suhtes tundlik, moodustub ketta ümber "lüüsitsoon", milles bakterid ei paljune. Nende kasv on aeglane või puudub üldse. Kasvu pärssimistsooni läbimõõdu järgi määratakse mikroorganismi tundlikkuse aste antibiootikumi suhtes ja sõnastatakse edasised soovitused.

Kõige täpsem on järjestikku lahjendusmeetod. Selleks külvatakse mikroorganismid vedelale toitekeskkonnale, lisatakse kümnendlahjendussüsteemis lahjendatud antibiootikum. Pärast seda asetatakse katseklaasid mitmeks päevaks termostaati inkubeerimiseks. Tundlikkus antibiootikumide suhtes määratakse bakterite kasvuastme järgi toitepuljongis, millele on lisatud antibiootikume. Registreeritakse minimaalne kontsentratsioon, mille juures mikroorganismid veel kasvavad. See on ravimi minimaalne annus (vajalik on ümberarvutus mikrobioloogilistest ühikutest toimeaineks).

Need on standardsed mikrobioloogilised meetodid, mis moodustavad iga uurimistöö aluse. Need eeldavad kõigi manipulatsioonide käsitsi teostamist. Tänapäeval on paljud laborid varustatud spetsiaalse varustusega, mis teostab kõiki neid protseduure automaatselt. Selliste seadmetega töötav spetsialist vajab vaid oskust seadmetega töötada ning ohutus- ja steriilsusnõuete järgimist.

Tuleb arvestada, et tundlikkuse indeksid laboritingimustes ja elusorganismides on järsult erinevad. Seetõttu määratakse inimesele suurem annus kui uuringu käigus määratud. See on tingitud asjaolust, et organismil ei ole bakterite kasvuks nii optimaalseid tingimusi. Laboris luuakse "ideaalsed tingimused". Osa ravimist saab neutraliseerida sülje ja maomahla toimel. Osa neutraliseeritakse veres immuunsüsteemi poolt toodetud antikehade ja antitoksiinide abil.

Uriini antibiootikumide tundlikkuse test

Esmalt kogutakse bioloogiline materjal. Selleks tuleb koguda hommikuse uriini keskmine osa ja viia see laborisse. Oluline on säilitada steriilsus ja mitte võtta antibiootikume mitu päeva enne analüüsi, vastasel juhul võite saada vale-negatiivse tulemuse. Pärast seda tehakse standardne külv, mille eesmärk on eraldada patogeeni puhas kultuur ja valida antibiootikum, millel on sellele optimaalne bakteritsiidne toime. Määratakse kindlaks antibiootikumi vajalik kontsentratsioon.

Uriinianalüüs määratakse kõige sagedamini kuseteede infektsiooni- ja põletikulise protsessi kahtluse korral, immuunpuudulikkuse ja ainevahetushäirete korral. Tavaliselt on uriin steriilne vedelik. Sellise uuringu kestus on 1-10 päeva ja see määratakse mikroorganismi kasvukiiruse järgi.

Kultuur ja antibiootikumitundlikkuse testimine

Uuring hõlmab patogeeniks oleva mikroorganismi eraldamist puhaskultuuri. Mõnikord võib selliseid mikroorganisme olla mitu (segainfektsioon). Mõned mikroorganismid on võimelised moodustama biokilesid, mis on omamoodi "mikroobide kooslused". Biokilede ellujäämismäär on palju kõrgem kui üksikutel mikroorganismidel või nende kooslustel. Lisaks ei ole kõik antibiootikumid võimelised biokile mõjutama ja sellest läbi tungima.

Patogeeni määramiseks ja selle eraldamiseks puhaskultuuriks tehakse külv. Uuringu käigus tehakse mitu külvi erinevatesse toitainekeskkondadesse. Seejärel eraldatakse puhaskultuur, määratakse selle bioloogiline kuuluvus ja tundlikkus antibakteriaalsete ravimite suhtes. Valitakse optimaalne kontsentratsioon.

Uuringuks võib kasutada mis tahes bioloogilist materjali, olenevalt haigusest ja nakkusprotsessi lokaliseerimisest. Kestus määratakse mikroorganismide kasvukiiruse järgi.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Väljaheite tundlikkuse test

Väljaheiteid uuritakse mitmesuguste mao- ja soolehaiguste korral, nakkusprotsessi kahtluse, bakteriaalse mürgistuse ja toidumürgituse korral. Uuringu eesmärk on isoleerida patogeen ja valida sellele optimaalsed antibakteriaalsed ravimid, millel on kõrge aktiivsus. Seda tüüpi uuringu olulisus seisneb selles, et on võimalik valida ravim, mis toimib ainult patogeenile ja ei mõjuta normaalse mikrofloora esindajaid.

Esimene ja väga oluline etapp on väljaheidete kogumine. Need tuleks koguda hommikul spetsiaalsesse steriilsesse anumasse. Neid ei tohiks säilitada kauem kui 1-2 tundi. Menstruaalverejooksuga naised peaksid analüüsi edasi lükkama lõpuni, kuna tulemuste täpsus muutub. Materjal toimetatakse testimiseks laborisse. Analüüs viiakse läbi standardsete mikrobioloogiliste meetodite abil, kasutades puhaskultuuri külvamist ja isoleerimist. Samuti tehakse antibiogramm. Järelduse põhjal töötatakse välja soovitused ja määratakse edasine uuringukava.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Düsbakterioosi analüüs tundlikkusega

Uuringu materjaliks on kohe pärast roojamist võetud väljaheited. Seedetrakti normaalne mikrofloora koosneb normaalse mikrofloora esindajatest ja mitmest patogeense mikrofloora esindajast. Nende liigiline koostis, kogus ja suhe on rangelt määratletud ning hoitakse lubatud normi piires. Kui see suhe on häiritud, tekib düsbakterioos. See võib avalduda erineval viisil. Nakkushaigused võivad tekkida, kui patogeense mikrofloora hulk järsult suureneb. Kui mõne mikroorganismi hulk järsult väheneb, hõivavad vaba ruumi teised esindajad, mis ei ole seedetraktile tüüpilised ehk patogeensed. Sageli hõivab vaba ruumi seen, seejärel tekivad mitmesugused seeninfektsioonid ja kandidoos.

Soole mikrofloora kvantitatiivse ja kvalitatiivse koostise määramiseks tehakse düsbakterioosi suhtes väljaheidete analüüs. Tavaliselt jagatakse kõik soolestikus elavad esindajad kolme rühma: patogeensed, oportunistlikud ja mittepatogeensed. Seega koosneb analüüs kolmest osast. Igal mikroorganismide rühmal on oma vajadused toiduallika ja energia järele. Iga rühm vajab eraldi toitainekeskkonda ja selektiivseid lisandeid.

Esmalt teostatakse mikroskoopia ja esmane külv. Seejärel, pärast külvi, valitakse välja suurimad kolooniad, mis on morfoloogiliste tunnuste poolest sarnased iga rühma esindajatega. Need kantakse selektiivsele söötmele. Pärast mikroorganismide kasvamist need identifitseeritakse ja testitakse kohe antibiootikumide suhtes tundlikkust. Kasutatakse standardseid mikrobioloogilisi meetodeid.

Patogeensete mikroorganismide rühma uuring hõlmab lisaks standardsetele uuringutele ka tüüfuse, paratüüfuse ja düsenteeria bakterite määramist. Samuti tehakse kindlaks, kas inimene on nende mikroorganismide kandja. Düsbakterioosi põhjalik uuring hõlmab ka bifidobakterite ja laktobatsillide rühma esindajate uuringut. Uuring kestab umbes nädala ja sõltub mikroorganismide kasvukiirusest.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Bakteriofaagide tundlikkuse testimine

Sooleinfektsioonide korral kasutatakse bakteriofaage sageli antibiootikumide asemel. Bakteriofaagid on bakteriaalsed viirused, mis on vastuvõtlikud ainult neile. Nad leiavad bakteri, millega nad on komplementaarsed, tungivad läbi selle ja hävitavad bakteriraku järk-järgult. Selle tulemusel nakkusprotsess peatub. Kuid mitte kõik bakterid ei ole bakteriofaagide suhtes tundlikud. Selleks, et kontrollida, kas antud bakteriofaag näitab aktiivsust mikrofloora esindajate suhtes, tuleb läbi viia analüüs.

Uuringu materjal on väljaheited. Analüüs tuleb laborisse toimetada tunni aja jooksul, vastasel juhul on seda võimatu läbi viia. Analüüs on vaja läbi viia mitmes korduses. Esialgne meetod on sarnane antibiootikumide suhtes tundlikkuse määramise meetodiga. Esmalt viiakse läbi proovi esialgne mikroskoopia, seejärel külvatakse see universaalsetele toitekeskkondadele. Seejärel isoleeritakse puhaskultuur selektiivsetele toitekeskkondadele.

Põhitöö tehakse puhaskultuuriga. Neid töödeldakse erinevat tüüpi bakteriofaagidega. Kui koloonia lahustub (lüüsub), näitab see bakteriofaagi kõrget aktiivsust. Kui lüüs on osaline, toimib bakteriofaag mõõdukalt. Lüüsi puudumisel võime rääkida bakteriofaagi suhtes resistentsusest.

Faagiteraapia eeliseks on see, et bakteriofaagid ei mõjuta inimkeha ega põhjusta kõrvaltoimeid. Nad kinnituvad teatud tüüpi bakterite külge ja lüüsivad neid. Puuduseks on see, et nad on väga spetsiifilised ja selektiivse toimega ning ei suuda alati bakteritega kinnituda.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ], [ 37 ], [ 38 ]

Röga analüüs antibiootikumide tundlikkuse määramiseks

Analüüs on alumiste hingamisteede eritiste uuring. Eesmärk on määrata kindlaks haiguse tekitajatena toimivad mikroorganismid. Samuti tehakse antibiootikumiprogramm. Sel juhul määratakse patogeeni tundlikkus antibiootikumide suhtes ja valitakse optimaalne kontsentratsioon. Seda kasutatakse hingamisteede haiguste korral.

Röga ja muu kopsude ning bronhide sisu uurimine on vajalik raviskeemi valikuks ja erinevate diagnooside eristamiseks. Seda kasutatakse tuberkuloosi esinemise kinnitamiseks või ümberlükkamiseks.

Esiteks on vaja saada bioloogilist materjali. Seda saab saada köhimise, rögaerituse teel või bronhoskoopia ajal hingetorust võttes. Rögaeritust soodustavad spetsiaalsed aerosoolid. Enne röga võtmist tuleb suu loputada veega, mis vähendab suuõõne bakteriaalse saastumise astet. Esmalt on soovitatav teha 3 sügavat hingetõmmet ja esile kutsuda produktiivne köha. Röga võib võtta ka hingetorust aspiratsiooni teel. Sel juhul sisestatakse hingetorusse spetsiaalne kateeter. Bronhoskoopia ajal sisestatakse bronhiõõnde bronhoskoop. Sel juhul määritakse limaskesta anesteetikumiga.

Seejärel saadetakse materjal laborisse testimiseks. Tehakse standardne külv ja mikroskoopia. Seejärel isoleeritakse puhaskultuur ja sellega tehakse täiendavaid manipulatsioone. Tehakse antibiogramm, mis võimaldab tuvastada bakterite tundlikkuse spektrit ja valida optimaalse annuse.

Tuberkuloosi kahtluse korral uuritakse hommikust röga kolm päeva. Tuberkuloosi testimisel on tulemus valmis 3-4 nädala pärast. Kuna haiguse põhjustajaks olev mükobakter tuberkuloos kasvab väga aeglaselt.

Tavaliselt tuleks tuvastada hingamisteede normaalse mikrofloora esindajaid. Samuti on vaja arvestada, et immuunsuse vähenemise korral võivad normaalse mikrofloora näitajad erineda.

Sperma analüüs antibiootikumide tundlikkuse määramiseks

See on sperma ejakulaadi bakterioloogiline uuring, millele järgneb tundlike antibiootikumide ja nende kontsentratsioonide valik. Kõige sagedamini tehakse seda viljatuse ja teiste meeste reproduktiivsüsteemi haiguste ravis. Juhul, kui haigusega kaasneb nakkusprotsess. Meeste viljatuse peamiseks põhjuseks on enamasti infektsioon. Tavaliselt tehakse esmalt spermogramm. Tulemuste põhjal tehakse kindlaks sperma viljastumisvõime. Kui selles analüüsis leitakse suur hulk leukotsüüte, võime rääkida põletikulisest protsessist. Sellisel juhul määratakse tavaliselt kohe mikrobioloogiline analüüs, kuna põletikuga kaasneb peaaegu alati infektsioon. Saadud tulemuste põhjal valitakse sobiv ravi. Uuringu määrab tavaliselt androloog.

Analüüsi läbiviimise põhjuseks on ka prostatiit ja suguhaigused. See määratakse ka siis, kui partneril avastatakse suguhaigus.

Õige analüüsi aluseks on eelkõige bioloogilise materjali õige kogumine. Materjal kogutakse spetsiaalsetesse laia kaelaga anumatesse. Säilitustemperatuur peaks vastama inimkeha temperatuurile. Sellisel juhul ei tohi materjali säilitada kauem kui tund. Külvutatud kujul ei tohi seda säilitada kauem kui üks päev. Antibiootikumide võtmise ajal ei ole kohane kultuuri võtta, see muudab kliinilist pilti. Tavaliselt võetakse kultuur enne antibiootikumravi alustamist. Või lõpetage ravimite võtmine 2-3 päeva enne analüüsi.

Seejärel külvatakse see toitainekeskkonnale. Inkubeeritakse termostaadis 1-2 päeva. Pärast seda eraldatakse puhaskultuur, seejärel identifitseeritakse, määratakse tundlikkus, samuti iga koloonia tüüp ja kasvukiirus. Patogeensete mikroorganismide tuvastamisel määratakse tundlikkus antibiootikumide suhtes. Keskmiselt võtab analüüs aega 5-7 päeva.

[ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ], [ 43 ]

Gluteeni tundlikkuse test

Immunoloogilise tundlikkuse määramiseks erinevate ainete või patogeenide suhtes on palju teste. Varem oli peamiseks meetodiks antikehade ja antigeenide aglutinatsioonireaktsioonil põhinevad testid. Tänapäeval kasutatakse neid teste üha vähem, kuna nende tundlikkus on palju madalam kui paljudel tänapäevastel meetoditel, näiteks gluteenitestidel. Enamasti kasutatakse praktikas gluteeni ja väljaheidete analüüsiks süljetesti.

Gluteenitundlikkuse testi kasutatakse mitmesuguste soolehäirete diagnoosimiseks. See põhineb immuunsüsteemi reaktsioonil. Kui väljaheitele lisatakse gluteeni, siis reaktsioon tekib või puudub. Seda peetakse valepositiivseks või valenegatiivseks tulemuseks. Positiivne tulemus näitab eelsoodumust koliidile, selle tekke suurt tõenäosust. See kinnitab ka tsöliaakiat.

Samuti on võimalik teha gluteenitest, kasutades bioloogilise materjalina sülge. On võimalik mõõta gliadiinivastaste antikehade hulka. Positiivne tulemus näitab gluteenitundlikkust. See võib viidata suurele diabeedi tõenäosusele. Kui mõlemad testid on positiivsed, saab kinnitada diabeedi või tsöliaakia.

[ 44 ], [ 45 ]

Klamüüdia tundlikkuse test antibiootikumide suhtes

Analüüsi tehakse urogenitaaltrakti nakkus- ja põletikuliste haiguste ravis, kui kahtlustatakse klamüüdiat. Uuringu materjaliks on naistel tupe limaskestalt võetud kraapimine, meestel kusitist võetud määrdumine. Kogumine toimub protseduuriruumis ühekordselt kasutatavate vahendite abil. Oluline on säilitada steriilsus. Enne materjali kogumist tuleks 1-2 päeva enne uuringu algust hoiduda intiimsusest. Kui naisel on menstruatsioon, kogutakse materjal 3 päeva pärast selle täielikku lõppu.

Materjal toimetatakse laborisse. Täielik analüüs hõlmab määrdproovi esialgset mikroskoopiat. See võimaldab visuaalselt määrata mikrofloorat morfoloogiliste tunnuste järgi ja valida õigesti toitainekeskkonda. Lima, mäda ja epiteeliosakeste sisaldus võib otseselt või kaudselt viidata põletikulise protsessi või rakkude pahaloomulise degeneratsiooni arengule.

Seejärel teostatakse esmane külv. Kultuuri inkubeeritakse mitu päeva termostaadis ja identifitseerimine toimub kultuuriliste omaduste põhjal. Seejärel kantakse kultuur klamüüdia kultiveerimiseks mõeldud selektiivsetesse toitainekeskkondadesse. Saadud kolooniad identifitseeritakse biokeemiliste testide abil. Seejärel määratakse standardmeetodite abil tundlikkus antibiootikumide suhtes. Valitakse kõige tundlikum antibiootikum ja selle kontsentratsioon. Klamüüdia kultiveerimiseks on vaja spetsiaalselt seda tüüpi mikroorganismide jaoks välja töötatud söötmeid, mis sisaldavad kõiki vajalikke aineid ja kasvufaktoreid.

Samuti on võimalik läbi viia uuring bioloogilise meetodi abil. Selleks nakatatakse rotid patogeeniga. Mõnes laboris kasutatakse rottide asemel spetsiaalselt kasvatatud koekultuuri. See on tingitud asjaolust, et klamüüdia on rakusisesed parasiidid ja nende kasvatamiseks on vaja eritingimusi. Seejärel määratakse mikroorganismid PCR-meetodi abil. Tundlikkuse määramiseks siirdatakse need klamüüdia suhtes selektiivsele toitekeskkonnale ja mõne päeva pärast registreeritakse tulemused. Resistentsust või tundlikkust hinnatakse rakkude nakkusprotsessi pärssimise järgi.

[ 46 ], [ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Kui kaua võtab aega antibiootikumide tundlikkuse testi tegemine?

Keskmiselt tehakse analüüs 5-7 päeva jooksul. Mõned analüüsid võtavad kauem aega. Näiteks tuberkuloosi diagnoosimisel tuleb tulemusi oodata 3 nädalast kuni kuuni. Kõik sõltub mikroorganismide kasvukiirusest. Tihti peavad laboritöötajad tegelema juhtumitega, kus patsiendid paluvad analüüsi kiiremini teha. Ja nad pakuvad isegi kiireloomulisuse eest "lisatasu". Siin tuleb aga mõista, et antud juhul ei sõltu laboriassistendi tegevusest midagi. See sõltub ainult sellest, kui kiiresti mikroorganism kasvab. Igal liigil on oma rangelt määratletud kasvukiirus.

Tavaline jõudlus

Kõigi analüüside jaoks ei ole olemas absoluutseid universaalseid normväärtusi. Esiteks võivad need väärtused iga biotoobi puhul erineda. Teiseks on need iga mikroorganismi puhul individuaalsed. See tähendab, et sama mikroorganismi normväärtused, näiteks kurgu ja soolte puhul, on erinevad. Seega, kui kurgus domineerib normaalse mikrofloora esindajana stafülokokk, siis soolestikus domineerivad E. coli, bifidobakterid ja laktobakterid. Sama mikroorganismi väärtused erinevates biotoopides võivad samuti oluliselt erineda. Näiteks võib Candida tavaliselt teatud koguses esineda urogenitaalses mikroflooras. Suuõõnes neid tavaliselt ei esine. Candida esinemine suuõõnes võib viidata nende kunstlikule sissetoomisele nende looduslikust elupaigast.

Uriin, veri, tserebrospinaalvedelik on bioloogilised keskkonnad, mis peaksid tavaliselt olema steriilsed, st ei tohiks sisaldada mikrofloorat. Mikrofloora olemasolu nendes vedelikes viitab tugevale põletikulisele, nakkuslikule protsessile ning viitab ka bakteremieemia ja sepsise tekke riskile.

Üldiselt on olemas ligikaudne klassifikatsioon. Mikrobioloogias on mõõtühik CFU/ml, see tähendab kolooniat moodustavate ühikute arvu 1 milliliitris bioloogilises vedelikus. Saastumise aste määratakse CFU arvu järgi ja varieerub laias vahemikus 101 ^kuni 109. ^Seega on ¹⁰¹ minimaalne mikroorganismide arv, 109 ^on raske nakkusaste. Samal ajal peetakse vahemikku kuni 103 ^{normaalseks, kõik sellest arvust kõrgemad näitajad viitavad bakterite patoloogilisele paljunemisele.}

Mis puutub antibiootikumide tundlikkusse, siis kõik mikroorganismid jagunevad resistentseteks, mõõdukalt tundlikeks ja tundlikeks. Seda tulemust väljendatakse sageli kvalitatiivse tunnusena, mis näitab MID-i - antibiootikumi minimaalset inhibeerivat annust, mis ikkagi pärsib mikroorganismi kasvu. Iga inimese ja iga mikroorganismi puhul on need näitajad rangelt individuaalsed.

[ 54 ], [ 55 ], [ 56 ], [ 57 ]

Analüüsseade

Bakterioloogiliste uuringute läbiviimisel, eriti antibiootikumide tundlikkuse määramisel, ei piisa ühest seadmest. Vajalik on bakterioloogilise labori täielik ja igakülgne varustus. On vaja hoolikalt planeerida ja valida seadmed, mis vastavad igale uuringu etapile. Bioloogilise materjali kogumise etapis on vajalikud steriilsed instrumendid, kastid, konteinerid, hoiukambrid ja transpordivahendid materjali laborisse toimetamiseks.

Laboris vajate kõigepealt kvaliteetset mikroskoopi määrdmikroskoopia jaoks. Tänapäeval on saadaval suur hulk mikroskoope, millel on mitmesuguseid omadusi - alates traditsioonilistest valgusmikroskoopidest kuni faasikontrast- ja aatomjõumikroskoopideni. Kaasaegsed seadmed võimaldavad skannida pilti kolmemõõtmelises ruumis ja uurida seda suure suurendusega suure täpsusega.

Mikroorganismide külvamise ja inkubeerimise etapis võib vaja minna autoklaave, kuivatuskappe, eksikaatoreid, aurusaunu ja tsentrifuugi. Vajalik on termostaat, milles toimub bioloogilise materjali peamine inkubeerimine.

Mikroorganismide identifitseerimise ja antibiogrammi läbiviimise etapis võib kultuuride biokeemiliste omaduste mitmesuguste arvutuste ja hindamise jaoks olla vajalik mikromanipulaator, massispektromeeter, spektrofotomeeter, kolorimeeter.

Lisaks saab tänapäevaseid laboreid varustada kõrgtehnoloogiliste seadmetega, mis täidavad kõiki eespool nimetatud uuringu peamisi etappe kuni tulemuste automaatse arvutamiseni. Selliste seadmete hulka kuulub näiteks bakterioloogilise labori keerukas seade, mis põhineb lennuaja massispektromeetril. See seadmete seeria võimaldab jagada kogu labori territooriumi kolmeks tsooniks. Esimene tsoon on must tsoon, kus võetakse vastu ja registreeritakse teste. Teine tsoon on töötsoon, kus tegelikult tehakse peamisi mikrobioloogilisi uuringuid. Ja kolmas tsoon on steriliseerimine ja autoklaav, kus toimub töömaterjali ettevalmistamine ja utiliseerimine.

Mudelid võimaldavad inkubeerimist laias temperatuuride ja tingimuste vahemikus. Sisaldab sisseehitatud vere ja muude bioloogiliste proovide analüsaatorit, mis annab suure täpsuse ja usaldusväärsuse. Komplekt sisaldab elektroonilisi kaalusid, bidestillereid, tsentrifuuge, autoklaave ja steriliseerimiskappe, automaatset söötmekeetjat, sisseehitatud segistiga veevanni, pH-meetreid, termomeetreid ja mikroskoope.

Kasutatakse ka mikrobioloogilist analüsaatorit, millesse pannakse uuritavad proovid, toitainekeskkond ja tundlikkuse määramiseks mõeldud testide komplektid. Seade teeb vajalikud uuringud ja väljastab valmis järelduse.

Väärtuste tõstmine ja langetamine

Ainult arst saab analüüsi dešifreerida. Kuid sageli satuvad patsiendid pärast tulemuste saamist paanikasse, märgates suurt hulka arusaamatuid sümboleid ja numbreid. Et mitte ära eksida, on soovitatav omada vähemalt üldist ettekujutust antibiootikumide suhtes tundlikkuse analüüsi dešifreerimisest. Tavaliselt näitab tulemuste esimene punkt haigust põhjustava mikroorganismi nime. Nimi on antud ladina keeles. See võib viidata ka organismis valitseva normaalse mikrofloora esindajale, seega pole paanikaks põhjust. Teine punkt näitab külvi astet, st mikroorganismide arvu. Tavaliselt jääb see arv vahemikku 101 ^kuni 109. ^Kolmas punkt näitab patogeensuse vormi ja neljas - antibakteriaalsete ravimite nimetusi, mille suhtes see mikroorganism on tundlik. Lähedal on näidatud minimaalne inhibeeriv kontsentratsioon, mille juures mikroorganismi kasv on pärsitud.

[ 58 ], [ 59 ], [ 60 ], [ 61 ], [ 62 ], [ 63 ]