Karütüüpi analüüs

Üks kromosoomide uurimiseks mõeldud tsütogeneetilise uuringu meetoditest on karüotüüpimine. Analüüsil on mitmeid näiteid käitumise kohta, samuti mitut tüüpi. 

Karüotüüp on inimese kromosoomide komplekt. See kirjeldab kõiki geenide funktsioone: suurust, kogust, kuju. Tavaliselt genoom koosneb 46 kromosoomi, 44 neist autosoom, mis vastutab päritud tunnused (juuste ja silmade värv, kuju kõrvad ja muu). Viimane paar on sugukromosoomid, mis määravad karüotüübi: naised 46XX ja 46XU mehed.

Diagnostikamenetluses ilmnevad kõik genoomi rikkumised:

• Muutused kvantitatiivses koostises.
• Struktuuri rikkumine.
• Kvaliteedi rikkumine.

Reeglina teostab karüotüpiseerimine vastsündinu geneetiliste anomaaliate kindlakstegemiseks. Analüüs on näidatud ka raseduse planeerivatele paaridele. Sellisel juhul näitab uuring geenidevahelist lahknevust, mis võib viia pärilike patoloogiliste laste sündi.

Molekulaarsete karüotüüpide tüübid:

1. Sihtimine

Erinevate kõrvalekallete ja sündroomide kinnitamiseks on määratud. See võimaldab kindlaks teha raseduse kaotamise põhjused: külmutatud loote, abordi, katkestuse vastavalt meditsiinilistele näidustustele. Määrab kromosoomide täiendava komplekti etioloogia koos triploidiasidega. Analüüs viiakse läbi mikroskoobidega, millel on 350 000 markerit, kontsentreeritud kliiniliselt olulistes kromosoomipiirkondades. Selle uuringu lahutusvõime on alates 1 miljonist bp.

2. Standardne

Tuvastatakse kliiniliselt olulise genoomi rikkumised. Diagnoosib autosomaalsete valitsevate haigustega seotud mikrodeletion-sündroome ja patoloogiaid. Kromosomaalsete kõrvalekallete põhjused diferentseerunud sündroomides patsientidel, kellel on arenguhäireid, kaasasündinud väärarenguid, psühhomotoorse ajutine areng, autism.

See võimaldab paljastada kromosomaalseid kõrvalekaldeid sünnieelse perioodi jooksul. See meetod määrab lootele aneuploidsuse, patoloogiliste mikrodeletsioonide. Uuring viidi läbi 750 000 suure tihedusega markeriga mikrograanidel, mis katavad kõik olulised genoomi osad. Standardse karütüpi analüüsi lahutusvõime on 200 000 bp.

3. Laiendatud

Võimaldab kindlaks teha lastel heterosügootsete sündroomide kromosoomide kõrvalekallete põhjuseid. Identifitseerib patogeensed kustutused, st kromosoomipiirkondade kadumine ja dubleerimine - geenide täiendavad koopiad. Diagnoositakse saite, millel on heterosügootne kadu, autosoomsete retsessiivsete patoloogiate põhjused.

Laiendatud kromosoomide mikrokiibi analüüs tehakse, kasutades suure tihedusega mikrokiire, mis sisaldab rohkem kui 2,6 miljonit üksikut suure tihedusega markerit. Selle uuringu lahutusvõime võimaldab katta kogu genoomi ja ulatub 50 000 bp-ni. Tänu sellele uuritakse geenikoodi kõiki osi täpselt, mis võimaldab välja tuua kõige väiksemad strukturaalsed häired.

Tavaliselt tehakse karüotüübi analüüs vastavalt geneetikumi eesmärgile. Sõltuvalt meditsiinilistest näidustustest võib määrata ühe eespool nimetatud tüübi. Standardne uuring maksab vähem, kuid see on harva välja kirjutatud, sest see ei näita paljusid kromosomaalseid kõrvalekaldeid. Sihtkariotüpiseerimine on kallim analüüs, mistõttu seda kirjutatakse sümptomite ja muude kõrvalekallete kliiniliste tunnuste juuresolekul. Laiendatud diagnoos on kõige kallim ja kõige informatiivsem, kuna see võimaldab täielikult uurida kõiki 23 komplekti kromosoome.

Kust analüüsida karüotüübiga?

Kromosomaalne mikromatrix analüüs antakse üle geneetikumi poolt ette nähtud viisil. Uuringu eesmärgiks on patsiendi genoomi uurimine ja selle struktuuri mis tahes anomaalia avastamine.

Kromosoomid on DNA ahelad, nende arv ja struktuur on iga liigi jaoks spetsiifiline. Inimkeha sisaldab 23 paari kromosoome. Üks paar määrab sugu: naistel 46XX kromosoomis ja meestel 46XY. Ülejäänud geenid on autosoomid, st mitte-geenid.

Karüotõmbamise tunnused:

• Analüüs viiakse läbi 1 korra, kuna kromosoomikomplekt ei muutu kogu elu vältel.
• Võimaldab tuvastada abikaasade reproduktiivsete probleemide põhjuseid.
• Diagnoosib mitmesuguseid väärarenguid lastel.
• Määrab geneetilised kõrvalekalded.

Karüotüüp on antud spetsiaalses meditsiinilaboris või geneetilises keskuses. Uuringu viib läbi kvalifitseeritud arst. Tavaliselt on testid valmis 1-2 nädala jooksul. Geneetiliste vahendite tulemusi dešifreerib.

Menetluse tähised karüotüübi analüüs

Karüotüpiseerimise protseduur määratakse vastsündinutele geneetiliste kõrvalekallete ja pärilike patoloogiate avastamiseks, samuti meeste ja naiste jaoks raseduse planeerimise faasis. Analüüsiks on ka mitmeid muid näpunäiteid:

• Tundmatu päritolu meeste ja naiste viljatus.
• Meeste viljatus: raske ja mitte-obstruktiivne oligozoospermia, teratozoospermia.
• Spontaanne abort: katkestused, külmutatud lootel, enneaegne sünnitus.
• Esmane amenorröa.
• Vastsündinu varajane surm anamneesis.
• Kromosoomsete kõrvalekalletega lapsed.
• Mitme kaasasündinud väärarenguga lapsed.
• Vanemate vanus on üle 35 aasta.
• Mitmed ebaõnnestunud katsed IVF-i väetamisel.
• Päriliku haigus ühes tulevases vanemas.
• Hormonaalsed häired naistel.
• Tundmatu etioloogia spermatogenees.
• Tihedalt seotud abielud.
• Ebasoodne ökoloogiline elukeskkond.
• Pikaajaline kokkupuude kemikaalidega, kiiritamine.
• Kahjulikud harjumused: suitsetamine, alkohol, narkootikumid, uimastisõltuvus.

Laste kariotipideerimine toimub järgmistel juhtudel:

• Kaasasündinud väärarengud.
• Vaimne aeglustumine.
• Viivitamine psühhomotoorses arengus.
• Mikroanomalia ja hilinenud psühhoaktiivsuse areng.
• Seksuaalsed kõrvalekalded.
• Seksuaalse arengu rikkumine või viivitus.
• Kasvu pidurdumine.
• Lapse tervise prognoos.

Diagnoos on soovitatav kõigile abikaasadele raseduse planeerimise etapis. Samuti saab analüüsi teostada raseduse ajal, see tähendab sünnieelset kromosoomi uuringut.

Kuidas karüotüüp välja näeb?

Kromosoomide tervikkomplektide tähemärkide koguarv on karüotüüp. Kromosoomianalüüside süstematiseerimiseks kasutatakse rahvusvahelist tsütogeneetilisi nomenklatuure, mis põhineb genoomi erineval värvimisel, et kogu DNA ahela üksikasjalik kirjeldus.

Uurimus näitab:

• Trisomy - paaris on kolmas täiendav kromosoom.
• Monosoomia - ühel paaril puudub üks kromosoom.
• Inversioon - genoomi pööre.
• Translokatsioon on alade liikumine.
• Kustutamine on saidi kaotus.
• Kordamine - fragment kahekordistamine.

Analüüsi tulemused salvestatakse selle süsteemi abil:

1. Kromosoomide ja genitaalide komplekti koguarv on 46, XX; 46, XY.
2. Täiendavad ja puuduvad kromosoomid on näidatud näiteks 47, XY, + 21; 46, XY-18.
3. Genoomi lühike käsi tähistab sümbol - p ja pikk - q.
4. Ümberpaigutamine on t ja deletsioon on del, näiteks 46, XX, del (6) (p12,3)

Karüotüübi valmisanalüüs on järgmine:

• 46, XX - norm või määr naine.
• 46, XY on mehe norm.
• 45, X - Shereshevsky-Turneri sündroom.
• 47 XXY - Klinefelteri sündroom.
• 47, XXX - trisoomia X-kromosoomis.
• 47, XX (XY), +21 - Downi sündroom.
• 47, XY (XX), + 18 - Edwards'i sündroom.
• 47, XX (XY), + 13 - Patau sündroom.

Tsütogeneetilised uuringud näitavad mitmesuguseid anomaaliaid DNA ahela struktuuris. Analüüs diagnoosib paljude haiguste suhtes ka eelsoodumusi: endokriinsed patoloogiad, hüpertensioon, liigesekahjustused, müokardi infarkt jt.

[1], [2], [3], [4]

Ettevalmistus

Karüotüüpide analüüsiks kasutatakse vere rakke, seetõttu on väga tähtis diagnoosi õigesti valmistada.

Kromosoomide uuringute ettevalmistus algab 2 nädalat enne selle võtmist ja see hõlmab selliste tegurite mõju kehale välistamist:

• Ägedad ja kroonilised haigused.
• Ravimite vastuvõtt.
• Alkoholi ja narkootikumide joomine, suitsetamine.

Analüüsi jaoks kasutatakse venoosset verd 4 ml-s. Vereproovide võtmine toimub tühja kõhuga.

[5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]

Tehnika karüotüübi analüüs

Inimese genoomi ei saa näha palja silmaga, kromosoomid on nähtavad ainult rakkude jagunemise faasides ainult mikroskoobiga. Karüotüübi määramiseks kasutatakse ühe tuumori leukotsüüte, naha fibroblaste või luuüdi rakke. Uuringuks sobivad rakud mitoosi metafaasis. Bioloogiline vedelik asetatakse katseklaasi, milles on liitium ja hepariin. Vere kultiveeritakse 72 tundi.

Siis rikastatakse kultuuri spetsiaalsete ainetega, mis peatab raku jagamise vajaliku faasi diagnoosimiseks. Kultuuridest on klaasist ravimid, mida uuritakse. Täiendav teave genoomi seisundi kohta saadakse selle värvist. Igal kromosoomil on sügavus, mis on pärast värvumist selgelt nähtav.

Klassikalise kromosoomi uuringus värvitakse mitmesuguseid värvaineid ja nende segusid. Värv seostub genoomi erinevate osadega erinevalt, muutes värvumise ebaühtlaseks. Selle tagajärjel moodustatakse ristmärkide kompleks, mis kajastavad kromosoomi lineaarset heterogeensust.

Peamised värvimismeetodid:

• Q - annab pildid suure täpsusega. Seda meetodit nimetati fluorestsentsmikroskoobi all diagnoosimiseks mõeldud katlaküpsisega Casperssoni värvimiseks. Seda kasutatakse geneetilise sugu analüüsimiseks, translokatsioonide tuvastamiseks X ja Y, Y ja autosoomide vahel ning ka Y-kromosoomide mosaiikluse sõelumiseks.
• G on modifitseeritud Romanovski-Giemsa meetod. On kõrgem tundlikkus võrreldes Q. Seda kasutatakse tsütogeneetilise analüüsi standardmeetodina. Määrab väikesed aberratsioonid, markerkromosoomid.
• R - kasutatakse homoloogsete G ja Q negatiivsete piirkondade tuvastamiseks. Genoomi töödeldakse akridiinoranži värviga.
• C - analüüsib konstitutiivse heterokromatiini kromosoomide tsentromeerseid piirkondi ja Yi tõelist distaalset osa.
• T - kasutatakse telomeeride DNA ahela piirkondade analüüsimiseks.

Värvilised ja fikseeritud rakud pildistatakse mikroskoobi all. Saadud fotode komplekt moodustab arvu autosoomide paaride kogumi, st süstematiseeritud karüotüübi. DNA-ahelate kujutis on orienteeritud vertikaalselt, nummerdus sõltub suurusest, koos paar sugukromosoomidega, mis katavad komplekti.

Verepreparaate analüüsitakse 20-100 metafaasplaatide mikroskoobi abil, et avastada kvantitatiivseid ja strukturaalseid aberratsioone.

• Kvantitatiivsed aberratsioonid on geenide arvu muutused. Sarnaselt on täheldatud Downi sündroomi, kui on olemas veel 21 kromosoomi.
• Strukturaalsed aberratsioonid on muutused kromosoomides. See võib olla genoomi langus, ühe osa ülekandmine teisele, pöörlemine 180 kraadi ja rohkem.

Karaotüpiseerimise tehnika on vaevatu protsess. Uuringut viivad läbi kõrgelt kvalifitseeritud spetsialistid. Üksiku inimese genoomi diagnoosimiseks võib kuluda terve tööpäev.

Abikaasade karüotüübi analüüs

Kui abiellub, satuvad paljud paarid rasestumisprobleemi. On näidatud, et tsütogeneetiline analüüs lahendab reproduktiivseid probleeme. Abikaasade kariotipideerimine võimaldab avastada genoomi struktuuris häireid, mis segavad lapsi või häirivad rasedust. Muutama karüotüüpi pole võimatu, kuid diagnoosi tõttu saate kindlaks teha viljatuse ja abordi tegelikud põhjused, leida viise nende lahendamiseks.

Kromosomaalne mikromatrix-analüüs viiakse läbi, et tuvastada ebaharilikke struktuure ja DNA ahelaid, mis võivad põhjustada pärilikke haigusi tulevases lapse või abikaasade viljatuses. Tulevaste vanemate analüüsimiseks on olemas rahvusvahelised standardid:

• Perekonna kromosomaalsed patoloogiad perekonnas.
• Raseduse katkemine anamneesis.
• Raseduse vanus on vanem kui 35 aastat.
• Pikaajaline mutageenne toime organismile.

Praeguseks kasutatakse selliseid karyotüpiseerimismeetodeid:

1. Kromosoomide analüüs vererakkudes.

See võimaldab tuvastada viljatuse juhtumeid, kui ühe abikaasa puhul on lapse võimalus oluliselt vähenenud või täielikult puududa. Uuring määrab ka genoomi ebastabiilsuse riski. Ebanormaalsuse raviks võib patsientidele määrata antioksüdante ja immunomodulaatoreid, mis vähendavad imetamise ebaõnnestumist.

Uuringu jaoks võetakse vereensüüme. Bioloogilisest vedelikust eraldatakse lümfotsüüdid, mida stimuleeritakse katseklaasis, töödeldakse spetsiaalse ainega, värvitakse ja uuritakse. Näiteks Klinefelteri sündroomiga, mis väljendub meeste viljatusena, on karüotüübis täiendav kromosoom 47 XX. Samuti võib tuvastada genoomi struktuursed muutused: inversioon, kustutamine, translokatsioon.

2. Sünnitusjärgne uuring.

Määratakse loote kromosoomi patoloogiad raseduse varajases staadiumis. Selline uuring on vajalik geneetiliste haiguste või väärarengute diagnoosimiseks, mis põhjustavad emakasisese loote surma.

Uuringute läbiviimiseks võib selliseid meetodeid kasutada:

• Mitte-invasiivne - ohutu emale ja lootele. Diagnoos viiakse läbi lapse ultraheli ja naiste veri üksikasjaliku biokeemilise analüüsi abil.
• Invaalsed - koorioni biopsia, kardiokneesi, platsenta-tsentesi, amniokenteesi. Analüüsi jaoks kogutakse platsenta või koorioni, amniootilise vedeliku või vere nabaväädi verd. Vaatamata kõrgele diagnostilise täpsuse, tehnikad on suurenenud risk komplikatsioonide seega teostatud ainult range meditsiinilise näidustusi ajal avastatud ultraheli loote patoloogia, uue ema vanemad kui 35 aastat vana, vanematele kromosoomanomaaliad muutused biokeemilistes vere markereid.

Tsütogeneetika uuringute jaoks võib kasutada mitte ainult verd, vaid ka ejakulaati. Seda meetodit nimetatakse Tuneliks ja see võimaldab kindlaks teha ühe kõige levinuma meeste viljatuse põhjuse normaalse karüotüübi - sperma DNA fragmenteerimise olukorras.

Kui mõnes abikaasas on geenimutatsioone või kromosomaalseid kõrvalekaldeid, räägib arst võimalike riskide ja kõrvalekallete lapse tõenäosuse kohta. Kuna geenipakkumised on ravimata, võetakse paar edasist otsust sõltumatult: kasutage doonormaterjali (sperma, muna), sünnitamise või lasteta jäämise ohtu.

Kui geneetilistest kõrvalekalletest avastatakse nii naistel kui ka embrüotel rottidel rottidel, soovitavad arstid selliseid rasedusi katkestada. See on tingitud suurenenud riskist, et laps sünnib tõsiselt ja mõnel juhul ei vasta elule, kõrvalekalletele. Analüüsi läbiviimist ja nende tulemuste dešifreerimist teostab geneetik.

[12], [13], [14], [15], [16]

Karüotüübi vereanalüüs

Kõige sagedamini tehakse rakkude kultiveerimisel venoosset veri analüüsides karüotüpiseerimist. Kuid tsütogeneetilise uuringu läbiviimiseks võib kasutada teist bioloogilist materjali:

• Amniootilise vedeliku rakud.
• Platsenta.
• Embrüote rakud.
• Abortiivne materjal.
• Luuüdi.

Milline materjal võetakse diagnoosimiseks, sõltub analüüsi põhjusest ja ülesandest. Vereanalüüsi ligikaudne algoritm:

• 72 tunni jooksul asetatakse väike kogus vedelikku toitainekeskkonnas temperatuuril 37 ° C.
• Kuna kromosoomid on raku jagunemise metafaasi staadiumis nähtavad, lisatakse reaktiivi bioloogilises keskkonnas, mis peatab lõhustumise protsessi vajalikus faasis.
• Rakukultuur värvitakse, fikseeritakse ja analüüsitakse mikroskoobi all.

Vereanalüüsil karüotüüp näeb väga täpne avastamine kõrvalekaldeid struktuur DNA ahelate: intrakromosomaalset ja interkromo ümberkorraldused, järjekorda muuta genoomse fragmendid mõlemat. Diagnoosimise peaeesmärk on tuvastada geneetilisi haigusi.

[17], [18], [19], [20],

Karüotüübi geneetiline analüüs

Tsütogeneetiline diagnoos, mille eesmärk on uurida kromosoomide suurust, arvu ja kuju, on geneetiline karüotüüp. Analüüsil on selliseid näiteid, kuidas teostada:

• Sünnidefektide kindlakstegemine.
• Päriliku patoloogiaga lapse risk.
• Viljatuslikku kahtlust.
• Spermogrammi rikkumine.
• Raseduse tahtmatust.
• Teatavat tüüpi neoplastiliste kasvajate raviskeemi koostamine.

Ka karüotüüpide geneetiline analüüs on lisatud abikaasade nimekirja, kes plaanivad lapsi saada.

Enamasti näitab uuring selliseid patoloogiaid:

1. Aneuplodia on kromosoomide arvu muutus nii suurenemise kui ka vähenemise suunas. Tasakaalu rikkumine viib raseduse katkemiseni, raskete kaasasündinud patoloogiatega imikute sündi. Aneuploidsuse mosaiikne vorm põhjustab Downi sündroomi, Edwardsi sündroomi ja muid väga ebasobivaid haigusi.
2. Kariotüübi taastamine - kui muudatused on tasakaalus, siis pole kromosoomide komplekt purunenud, vaid lihtsalt erinevalt tellitud. Ebastabiilsete muutustega ähvardab geenimutatsioone, mis on tulevaste põlvkondade jaoks eriti ohtlik.
3. Translokatsioon on DNA-ahelate ebatavaline struktuur, see tähendab ühe genoomi fragmendi asendamine teisega. Enamasti on see päritud.
4. Seksuaalse diferentseerituse rikkumine on äärmiselt haruldane kromosomaalne häire, mida ei näidata alati väliste sümptomite tõttu. Fenotüübilise soo mittevastavus võib olla üks viljatuse põhjustest.

Karüotüübi analüüs tehakse geneetilistes laborites, kvalifitseeritud arstidena geneetikat.

Karüootüübi analüüs aberratsioonidega

Aberratsioonid on kromosoomide struktuuris häired, mis on tingitud nende katkestustest ja ümberjaotumisest geneetilise materjali kadumise või dubleerimisega. Aberratsioonidega kariotipideerimine on uuring, mille eesmärk on genoomi struktuuri muutuste tuvastamine.

Aberratsiooni tüübid:

• Kvantitatiivne - kromosoomide arvu rikkumine.
• Struktuurne - genoomi struktuuri rikkumine.
• Regulaarsed - määratakse enamuses või kõigis keharakkudes.
• Ebaregulaarne - tekib erinevate ebasoodsate tegurite (viirused, kiirgus, keemilised mõjud) mõju organismile.

Analüüs määrab karüotüübi, selle tunnused, erinevate negatiivsete tegurite mõju märgid. Kromosoomi uurimine aberratsioonidega viiakse läbi järgmistel juhtudel:

• Abielu viljatus.
• Spontaanne viletsused.
• Surnultsündimise juhtumid anamneesis.
• Varajane imiku suremus.
• Külmutatud rasedus.
• Kaasasündinud väärarengud.
• Seksuaalse eristamise rikkumine.
• Küsimusi kromosomaalse patoloogia kohta.
• Viivitatud vaimne, füüsiline areng.
• Uurimine enne IVF-i, ICSI-d ja muud reproduktiivtoimingud.

Erinevalt klassikalisest karyotüpiseerimisest võtab see analüüs rohkem aega ja maksab rohkem.

Lapse karüotüübi analüüs

Meditsiinilise statistika kohaselt on kaasasündinud patoloogiad imikute suremuse põhjustel olulist rolli. Geneetiliste kõrvalekallete ja pärilike haiguste õigeaegseks avastamiseks analüüsitakse lapse karüotüübiga.

• Kõige sagedamini diagnoositakse lapsi trisoomiga - Downi sündroom. See patoloogia esineb 1-l 750-st lapsevanemast ja avaldub mitmesugustes kõrvalekalleteks nii füüsilises kui ka vaimses arengus.
• Teises kohas on Klinefelteri sündroomi levimus. See väljendub noorukieas seksuaalarengu hilinemisega ja esineb 1 600-st vastsündinust.
• Teine geneetiline patoloogia, mida diagnoositi ühes 2500 naissoost lapsest, on Shereshevsky-Turneri sündroom. Lapsepõlves on seda haigust tunda naha suurenenud pigmentatsioon, jalgade, käte ja põse turse. Puberteediea ajal on menstruatsioon vähene, juustejada alla kaenlaaluste ja kaelas, ka piimanäärmeid ei arenenud,

Kariotüpiseerimine on vajalik mitte ainult väikelastel, kellel on nähtavaid kõrvalekaldeid, sest see võimaldab kahtlustada geneetilisi probleeme ja alustada nende korrigeerimist. Analüüs antakse üle meditsiinilis-geneetilises keskuses. Sõltuvalt lapse vanusest võib verd kapslitest või veenist võtta. Vajadusel võib geneetikum nõuda karüotüübi ja vanemate analüüsi.

Vastsündinud karüotüübi analüüs

Neonataalne skriinimine on vastsündinu esimene analüüs. Uuring viiakse läbi rasedus- ja sünnituskodus 3-4 päeva jooksul, enneaegsete beebide puhul 7. Päeval. Varasem karyotüpiseerimine võimaldab paljuneda geneetiliste häirete ja häirete tõttu DNA struktuuris enne nähtavate patoloogiliste sümptomite tekkimist.

Varaseks diagnoosimiseks kasutage beebi kanna verd. Tsütogeneetiliste uuringute eesmärk on tuvastada selliseid üldisi patoloogiaid laste seas:

• Fenüülketonuuria on pärilik haigus, mida iseloomustab aktiivsuse vähenemine või ensüümi puudumine, mis lõikab aminohappe fenüülalaniini. Edasiminek viib aju häirete ja vaimse alaarenguni.
• Tsüstiline fibroos - mõjutab näärmeid, mis toodavad saladusi, seedimahte, higi, sülge, lima. Põhjustab häireid seedetrakti kopsude ja organite toimel. Haigus on päritud.
• Kaasasündinud hüpotüreoidism on kilpnäärme kahjustus, mille hormoonide tootmine on ebapiisav. See viib füüsilise ja vaimse arengu hilinemiseni.
• Adrenogenitaalsündroom on patoloogiline seisund, mille korral neerupealiste koorega inimesi toodab ebapiisavat hormoonide hulka. Seetõttu on suguelundite areng häiritud.
• Galakteismia on patoloogia, mille puhul galaktoosi muundamine glükoosiks on häiritud. Ravi koosneb piimatoodete tagasilükkamisest. Ilma õigeaegse diagnoosimisega võib see põhjustada pimedaksjäämist ja surma.

Kui vastsündinute karüotüübi analüüsi tulemuste põhjal leitakse kõrvalekaldeid või kõrvalekaldeid, tehakse diagnoosi selgitamiseks täiendavaid uuringuid. Selline varajane diagnoos aitab õigeaegselt kindlaks teha lapse keha probleeme ja alustada ravi.

[21], [22], [23], [24], [25]

Kui palju analüüsitakse karüotüübi jaoks?

Kromosoomi uuringute kestus kestab 10 kuni 21 päeva. Kui tulemused on valmis, sõltub analüüsitüübist, st aberratsioonidest või klassikalisest karyotüübist.

Karüotüüpi valmisanalüüs sisaldab sellist teavet:

• Kromosoomide arv.
• Kas on muutusi kromosoomide struktuuris.
• Kas genoomi järjekorras on mingeid rikkumisi.

Tulemuste ja nende tõlgendamise lahutamist vastutab geneetik. Kui tuvastatakse kõrvalekaldeid, annab arst meditsiinilist abi edasiseks diagnoosimiseks või ravi suunamiseks.

Tavaline jõudlus

Inimeste normaalsed karüotüübid on 46, XX või 46, XY. Reeglina toimub nende muutus keha arengu varases staadiumis:

• Sageli esineb häire gametogeneesi ajal (embrüonaalne areng), kui vanemate sugurakud toodavad sigoodi kyotüüpi. Sellise sigoodi edasine areng toob kaasa asjaolu, et kõik embrüo rakud sisaldavad ebanormaalset genoomi.
• Sigoodi jagamise varajastes staadiumides võib tekkida rikkumine. Sellisel juhul sisaldab embrüo mitu rakukultuuri erinevate karyotüüpidega. See tähendab, et areneb mosaiitsism - kogu organismi ja selle organite karüotüüpide mitmekesisus

Muudatused genoomis ilmnevad mitmesuguste patoloogiate ja puuduste tõttu. Mõtle tavalistele karüotüüpide anomaaliatele:

• 47, XXY; 48, XXXY - Klinefelteri sündroom, polüsoomia X-kromosoomis meestel.
• 45X0; 45X0 / 46XX; 45, X / 46, XY; 46, X iso (Xq) - Shereshevsky-Turneri sündroom, X-kromosoomide monosoomia, mosaiitsism.
• 47, XXX; 48, XXXX; 49, XXXXX - polüsoom X-kromosoomis, trisoom.
• 47, XX, + 18; 47, XY, + 18 - Edwardsi sündroom, trisoomia 18-kromosoomil.
• 46, XX, 5p- - katsepõletiku kõri sündroom, lühikese käe kustutamine 5 paari genoomi.
• 47, XX, + 21; 47, XY, + 21 - Downi tõbi, trisoomia 21-kromosoomil.
• 47, XX, + 13; 47, XY, + 13 - Patau sündroom, trisoomia 13. Kromosoomis.

Tsütogeneetilised uuringud on suunatud DNA ahela seisundi kindlaksmääramisele, defektide ja anomaaliate tuvastamisele. Iga kõrvalekalle normaalsetest näitajatest annab võimaluse keha keerukaks uurimiseks.

[26], [27], [28], [29], [30], [31], [32], [33], [34]

Analüüsseade

Karüotüübi dešifreerimiseks kasutatakse sekveneerimismeetodit. See meetod töötati välja 1970. Aastal ja põhineb DNA aminohapete järjestuse määramisel. Sequencing machines kasutavad interaktiivseid tsüklilisi ensümaatilisi reaktsioone edasise töötlemise ja saadud tulemuste võrdlemisega.

Järjestuse põhifunktsioonid:

• Teadmata genoomide, eksoome, transkriptide esmane täielik uuring.
• Karyotüüpimine.
• Paleogenetics.
• Metagenoomika ja mikroobide mitmekesisus.
• Lähteotsing ja kaardistamine.
• DNA metüülimise analüüs.
• Ärakirjade analüüs.

Esimeses etapis loob seade DNA-ahelate juhuslike järjestuste raamatukogu. Seejärel loob amplikon PCR abil, mida kasutatakse näidistena. Lõppjärgus määratakse kõigi fragmentide esmane struktuur.

Viimase põlvkonna järjestused on täielikult automatiseeritud ja laialdaselt kasutatavad genoomse analüüsi jaoks, minimeerides inimese teguritest tingitud ekslikke tulemusi.

Karüotüübi analüüsi tulemuste tõlgendamine

Tsütogeneetilise uuringu tulemuste tõlgendamist teostab geneetik. Analüüs on reeglina valmis 1-2 nädala jooksul ja võib olla järgmine:

• 46XX (XY) on rühmitatud 22 paari ja 1 paari sugu. Genoomil on normaalne suurus ja struktuur. Anomaaliaid ei leitud.
• Genoom on purustatud, tuvastatakse enam kui 46 kromosoomi. Ühe / mitmete kromosoomide kujundid ja suurused on ebanormaalsed. Genoomi paarid on katki / valesti rühmitatud.

Karotüüpide patoloogiliste kõrvalekallete puhul eristuvad need üldised häired:

• Trisoomia on täiendav somaatiline kromosoom. Downi sündroom, Edwardsi sündroom.
• Monosoomia on ühe kromosoomi kaotus.
• Kustutamine on genoomi saidi puudumine. -46, xx, 5p-kassi kriimendündroom.
• Translokatsioon on ühe genoomi osa teisaldamine.
• Kordamine on fragmenti dubleerimine.
• Inversioon - kromosoomi fragmendi pöörlemine.

Arst teeb karüotüübi analüüsi tulemuste põhjal järelduse genotüübi olukorra ja geneetilise riski taseme kohta. DNA-ahelate struktuuri väikseimas muutumisel on määratud täiendavate uuringute kogum. Identifitseeritud aberratsioonid ei pruugi avalduda, kuid suurendavad laste geneetiliste kõrvalekallete tekke ohtu.