Epstein-Barri viiruse vereanalüüs antikehade ja PCR jaoks: kuidas läbida, normid

Herpese all oleme harjunud mõistma inetuid ja valulikke villilisi lööbeid näol huulte piirkonnas, mis hiljem moodustavad pruunid koorikud. Paraku on see vaid üks herpesviiruse ilmingutest, mis võib inimestel esineda kaheksas vormis. Tavaliselt nimetame herpeseks 1. tüüpi viirust ehk herpes simplex viirust. 2. tüüpi viirus põhjustab genitaalherpest, 3. tüüp - tuulerõugeid ja vöötohatist, 4. tüüp - nakkavat mononukleoosi ja mitmeid teisi üsna ohtlikke patoloogiaid jne. Seda loetelu saab jätkata, kuid meie keskendume 4. tüüpi herpesviirusele, mida nimetatakse ka Epsteini-Barri viiruseks. Proovime välja selgitada, mis on 4. tüüpi herpesviirus, miks see on ohtlik, millal ja miks tehakse Epsteini-Barri viiruse test ning mida näitavad laborikatsete tulemused.

Mis on herpesviiruse tüüp 4?

Herpesviiruse tüüp 4, mis on üks herpesviirusnakkuse variantidest, kirjeldas 53 aastat tagasi inglise viroloog Michael Epstein. Projekti kallal töötades abistas professorit tema magistrant Yvonne Barr. Just neile inimestele on viirus oma nime võlgu. 15 aastat pärast viiruse avastamist muudeti selle teaduslik nimetus aga inimese herpesviiruseks 4 ja aasta tagasi nimetati viirus inimese gammaviiruse tüübiks 4.

Aga mis on Epsteini-Barri viirus? Nagu iga teine viirus, koosneb ka 4. tüüpi herpesviiruse virion (viirusosake) geneetilisest materjalist (antud juhul kaheahelalisest DNA-st) ja ümbritsevast valgukestast (kapsiidist). Lisaks on viirus ümbritsetud membraaniga, mis aitab tal kergesti peremeesorganismi rakkudesse tungida.

Iga viirus on mitterakuline vorm, mis on nakkuslik tegur ja ei saa areneda ega paljuneda väljaspool elusorganismi rakke. Herpesviiruse 4. tüübi lemmikelupaigaks peetakse ninaneelu epiteelirakke. Nad ei põlga ka leukotsüüte, eelistades ühte nende liikidest, mida nimetatakse B-lümfotsüütideks. Just B-rakud osalevad aktiivselt organismi immuunkaitse tagamises. Antigeeniga kokkupuutel, mis meie puhul on herpesviiruse 4. tüüp (või pigem selle antigeenid), toodavad B-lümfotsüüdid antikehi (immunoglobuliini valke). Neid saab patsiendi verest tuvastada Epsteini-Barri viiruse (EBV) analüüsi abil.

4. tüüpi herpesviirusel on 4 antigeeni, mis esinevad rangelt määratletud järjestuses:

• EA on varajane antigeen, mis ilmneb haiguse algstaadiumis, kui viirusosakesed on sünteesi staadiumis (primaarne äge infektsioon või latentse viiruse taasaktiveerimine immuunsuse vähenemise korral),
• VCA on kapsiidi antigeen, mis sisaldub valgu kestas ja kuulub ka varajaste hulka, kuna kliiniliselt ei pruugi haigus sel perioodil isegi avalduda,
• MA – membraanantigeen, ilmub siis, kui virion on juba moodustunud,
• EBNA – tuuma- (polüpeptiid- või tuuma-) antigeen on üks hiliseid antigeene, mille antikehi saab tuvastada isegi mitu kuud pärast haigust ja mis püsivad veres kogu elu.

Herpesviiruse tüüp 4 on väga salakaval. Kuna viirus on väljaspool elusorganismi inaktiivne, saab sellega nakatuda ainult inimeselt, kes on nakkuse allikas. Ja pole sugugi vajalik, et tal esineksid kõik haiguse sümptomid; nakkus võib olla latentne, maskeerituna tavaliseks väsimuseks. Näiteks kroonilise väsimuse sündroom on enamasti seotud Epsteini-Barri viirusega.

Üksikuid virioone võib leida verest, süljest, spermast, tupesekreetidest ja erinevate organite kudedest. Viiruseosakesed võivad koos sülje ja verega sattuda meid ümbritsevatesse esemetesse, kus nad jäävad inaktiivseks, kuni nad kuidagi inimkehasse satuvad. Enamikul juhtudel toimub nakatumine õhus olevate tilkade või kontakti (suudlemise kaudu) kaudu. Kuid on võimalik ka viiruse emakasisene ülekandumine emalt lootele, nakatumine vereülekande ajal (kui doonori veri sisaldas viirusvirioone) ja seksuaalne kontakt.

Pärast kehasse sisenemist ja rakustruktuuridesse tungimist võib haiguse avaldumine võtta aega 5 kuni 50 päeva. Kuid see ei pruugi avalduda, kulgedes latentselt, nagu enamikul juhtudel.

Jah, uuringute kohaselt on umbes 90% täiskasvanud elanikkonnast vähemalt korra elus põdenud EBV-ga seotud herpesinfektsiooni. Enamik inimesi isegi ei tea sellest, sest nende keha suudab viiruse rünnakule vastu seista. Kuid see pole alati nii.

Kuidas Epsteini-Barri viirus avaldub?

Kõige sagedamini peavad arstid oma praktikas tegelema järgmiste 4. tüüpi herpesviiruse infektsioonidega:

• Krooniline vorm (ilmneb pärast haiguse ägedat faasi, esineb mõningaid üldiseid halva tervise sümptomeid),
• Latentne ehk varjatud vorm (sümptomeid pole, kuid viirus jääb aktiivseks ja vabaneb keskkonda),
• Aeglane vorm (harvem esinev, sümptomid ilmnevad ükshaaval pika aja jooksul, mis lõpeb patsiendi surmaga).

Inimesed nakatuvad Epsteini-Barri viirusesse esmakordselt peamiselt lapsepõlves ja noorukieas. Haigestumise tipphetk on 14–18-aastaselt.

Primaarsel viirusnakkusel on kolm erinevat vormi:

• asümptomaatiline (kliinilisi ilminguid pole),
• hingamisteede (hingamisteede infektsiooni sümptomid: palavik, ninaeritis, üldine nõrkus jne),
• Nakkuslik mononukleoos, millel on kolm peamist sümptomit: kõrge palavik, kurguvalu tunnused koos mandlite kollakate koorikutega, elundite, näiteks maksa ja põrna suurenemine; leukotsüütide taseme tõus ja lümfisõlmede suurenemine.

Haiguse ägedast faasist väljumiseks on mitu võimalust:

• täielik taastumine,
• haiguse sümptomid kaovad, kuid viirus jääb kehasse ja areneb, kuigi see ei põhjusta enam rakkudes märgatavaid muutusi (kandja olek),
• haiguse sümptomeid ei esine, viirus ei lahku kehast, vaid näitab ka vähest aktiivsust (latentne vorm),
• viiruse taasaktiveerimine latentsest vormist,
• krooniline infektsiooni kulg (haiguse ägenemistega, krooniline aktiivne vorm, üldistatud organite ja kehasüsteemide kahjustusega).

Viiruse pikaajalise viibimise tagajärjel organismis võivad tekkida järgmised tagajärjed:

• Nakkusliku mononukleoosi krooniline vorm.
• Hematofagotsütaarne sündroom: stabiilne palavik, verekomponentide vähenemine (suurenenud hüübivus), maksa ja põrna suurenemine, limaskestade verejooks, kollatõbi (maksa talitlushäire tõttu), lümfisõlmede suurenemine, neuroloogilised sümptomid.
• Varjatud vorm sekundaarse immuunpuudulikkuse tekkega: pikaajaline hüpertermia, üldine nõrkus, lümfisõlmede suurenemine ja valulikkus, lihas- ja liigesevalu, sagedased nakkushaigused.
• Autoimmuunpatoloogiate teke erütematoosluupuse, reumatoidartriidi jne kujul.
• Kroonilise väsimussündroomi ilmingud koos üldise heaolu ja töövõime halvenemisega.
• Generaliseerunud kroonilise infektsiooni vorm, mis kahjustab kesknärvisüsteemi, südamelihast, neere, maksa ja kopse.
• Onkoloogiliste haiguste (lümfotsütaarne leukeemia ja lümfoomid) teke, mille puhul täheldatakse lümfisüsteemi rakkude arvu patoloogilist suurenemist. 4. tüüpi herpesviirus ei hävita kandjarakke, vaid sunnib neid aktiivselt paljunema, mille tulemusena avastatakse lümfoidkoest pärinevaid neoplasme.

Nagu näeme, ei ole Epsteini-Barri viirus nii kahjutu, kui esmapilgul tundub, mis tähendab, et seda ei tohiks hooletult kohelda. Lisaks iseloomustavad 4. tüüpi herpesviiruse sagedased viiruse kandmise episoodid ja latentne vorm, rääkimata kroonilise infektsiooni erinevatest vormidest, kui inimene jääb nakkusallikaks isegi seda kahtlustamata.

Sellisel juhul saab nakkusetekitaja olemasolu organismis kindlaks teha ainult Epsteini-Barri viiruse spetsiaalse analüüsi abil, mille biomaterjal on tavaliselt veri.

Menetluse tähised Epstein-Barri viiruse test.

Kuna 4. tüüpi herpesviiruse infektsiooni ei ole mõnikord nii lihtne tuvastada, ei kahtlustata seda alati. Kuid on teatud märke, mille järgi arst võib kahtlustada viiruse esinemist organismis:

• tugevalt nõrgenenud immuunsüsteem (ohus on HIV-nakkuse ja AIDS-iga patsiendid, elundisiirdamise või keemiaravi läbinud patsiendid),
• piirkondlike lümfisõlmede suurenemine pea lõua ja kuklaluu piirkonnas ning nende valulikkus, eriti kui seda täheldatakse pärast vereülekannet või doonorilt elundi siirdamist.
• äge respiratoorne viirusinfektsioon (ARVI), mis esineb väga kõrge temperatuuri (38–40 kraadi) taustal,
• nakkusliku mononukleoosi tunnuste ilmnemine, mis esineb kõige sagedamini Epsteini-Barri viiruse mõjul.

Isegi kui inimesel ei ole ülalmainitud sümptomeid, võib spetsialist kahtlustada mõningaid rutiinsete testide (üldine vereanalüüs ja biokeemia) tulemusi, samuti immuunseisundi uuringuid.

Epsteini-Barri viiruse täielik vereanalüüs võib näidata:

• lümfotsüütide arvu suurenemine,
• madal hemoglobiinisisaldus, mis näitab punaste vereliblede arvu vähenemist;
• suurenenud vere hüübimine suure hulga trombotsüütide tõttu,
• virotsüütide (monotsüütidega sarnase struktuuriga atüüpiliste lümfotsüütide) ilmumine.

Biokeemiline vereanalüüs, mis annab teavet siseorganite seisundi kohta, näitab muutusi maksa ja põrna töös.

EBV immunoloogiline analüüs võib näidata spetsiifiliste lümfotsüütide arvu muutust, erinevate klasside immunoglobuliinide arvu lahknevust (düsimmunoglobulineemia) ja immunoglobuliin G puudulikkust, mis näitab nõrka immuunsüsteemi ja selle võimetust viiruse rünnakut ohjeldada.

Sellised mittespetsiifiliste analüüside tulemused võivad arste hoiatada, kuid täpselt öelda, millega tegemist on, on ikkagi võimatu. Kõik jääb eelduste ja esialgse diagnoosi staadiumisse. Enamasti kahtlustavad arstid nakkusliku mononukleoosi latentset vormi, kuigi ka teised viiruspatoloogiad (gripp, hepatiit jne) võivad avalduda samamoodi.

Kuna 4. tüüpi hepatiit on väga levinud ja võib emalt lapsele edasi kanduda, on Epsteini-Barri viiruse test kasulik ka raseduse planeerimisel. Kui ema on varem selle nakkuse läbi põdenud, on tema kehas tekkinud antikehad. Renakatumine on tavaliselt tugeva immuunsuse tõttu välistatud ja kui see siiski juhtub, ei ole sellel enam neid tagajärgi, mis on võimalikud esmasel kokkupuutel viirusega. Immuunsus piirab viiruse aktiivsust kogu eluea jooksul, kuigi viirus ise jääb kehasse, nagu iga herpesviirus.

Kui lapseootel ema nakatub herpesviirusega raseduse ajal, võib see põhjustada raseduse katkemist ja enneaegset sünnitust või mõjutab viirus negatiivselt lapse emakasisest arengut.

Onkoloog võib määrata EBV-testi, kui kahtlustatakse Burketti lümfoomi või diagnoositakse HIV-positiivsetel inimestel kasvajaprotsesse. Terapeut võib seda testi kasutada herpesinfektsioonide diagnoosimiseks (diferentsiaaldiagnostika viiruse tüübi määramiseks). Mõnikord kasutatakse testi ka ravi efektiivsuse hindamiseks.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Ettevalmistus

Sõltuvalt uuringu tüübist võib biomaterjaliks olla veri, sülg, uriin, röga, lootevee proov, emakakaelakanalist või kusitist võetud kraapimisproov, tserebrospinaalvedelik (CSF). Kõige sagedamini kasutavad arstid vereanalüüsi, mida peetakse kõige informatiivsemaks.

On selge, et mõned tegurid võivad biomaterjali kvaliteeti ja kogust negatiivselt mõjutada, seega tasub eelmisel päeval järgida teatud reegleid:

• Kõik testid (eriti vereanalüüsid) on soovitatav teha hommikul tühja kõhuga. Viimane söögikord peaks olema hiljemalt 12 tundi enne vere võtmist, seega on õhtusöögiks parem juua vett.
• Epsteini-Barri viiruse analüüsimiseks kõige vastuvõetavamaks materjaliks peetakse venoosset verd ja enne veenist vere loovutamist on alati soovitatav 15-minutiline puhkus, kui inimene on just laborisse saabunud.
• Selleks, et vereproovi võtmine toimuks tagajärgedeta ja testi tulemused oleksid usaldusväärsed, ei ole soovitatav 12 tunni jooksul enne protseduuri teha aktiivset füüsilist tööd ega sporti, tarbida alkoholi ega suitsetada.
• Testide tulemusi võivad mõjutada ka teie tarvitatavad ravimid. Te peaksite ravimite võtmise lõpetama vähemalt 2 päeva enne testi. Kui see pole võimalik, peate teavitama laboriõde tarvitatavatest ravimitest.
• Raseduse ajal tehakse enne EBV-testimist toksoplasmoosi test, et välistada valepositiivne reaktsioon.
• Kui alla 5-aastasele lapsele tehakse Epsteini-Barri viiruse vereanalüüs, tuleb lapsele pool tundi enne protseduuri anda suhteliselt väikestes portsjonites palju keedetud vett.

Kui analüüsiks võetakse mõni muu biomaterjal, peate eelnevalt oma arstiga selgitama kõik analüüsiks ettevalmistamise nüansid, olenevalt kasutatud materjalist.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Tehnika Epstein-Barri viiruse test.

Arstid omistavad herpes 4. tüübi ja nakkusliku mononukleoosi diagnoosimisel olulise rolli spetsiifilistele testidele, mis aitavad tuvastada viiruse DNA-d või unikaalseid antikehi patsiendi biomaterjalis. Peamised laborikatsete tüübid, mida kasutatakse Epstein-Barri viiruse tuvastamiseks inimkehas, hõlmavad ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) ja PCR-diagnostikat. Vaatleme lähemalt mõlema meetodi olemust ja rakendamise iseärasusi.

EBV ensüümi immunoloogiline analüüs

ELISA on patsientide venoosse vere uuring (analüüs) Epsteini-Barri viiruse vastaste antikehade suhtes. Diagnostika tulemusena tuvastatakse EBV-ga patsientide veres IgG või IgM tüüpi immunoglobuliinid (kokku on 5 tüüpi) ühe viiruse kolmest antigeenist (varajane, kapsiidne või tuuma).

Analüüs viiakse läbi immunoloogilises laboris, kus patsiendi veenist võetakse umbes 10 ml verd. Seejärel jäetakse biomaterjal veerand tunniks toatemperatuurile, mille jooksul veri hüübib. Tromb eraldatakse ettevaatlikult vedelast osast. Vedelik tsentrifuugitakse ja saadakse puhas vereseerum. Just seda uuritakse edasi.

Meetodi idee tekkis andmete põhjal, et meie keha toodab iga väljastpoolt kehasse tungiva viiruse ja bakteri tüübi vastu spetsiifilisi antikehi. Keha tunneb need võõrastena ära ja hävitab need ainulaadsete antikehade abil, mis kleepuvad kindlalt antigeeni külge.

ELISA analüüsi olemus põhineb sellel reaktsioonil. Antikehad, mille külge on kinnitatud märgised, kombineeruvad antigeenidega. Märgistele kantakse aine, mis reageerides spetsiaalse ensüümiga muudab proovi värvi. Mida rohkem selliseid "ahelaid", seda intensiivsem on biomaterjali värvus.

Ensüümimmunoanalüüsi saab läbi viia kolmel viisil:

• Otsene ELISA. Testvedelik valatakse süvenditesse ja jäetakse umbes pooleks tunniks seisma, et antigeenid saaksid süvendi seintele kinnituda. Sorbeeritud antigeenidele lisatakse märgistatud antikehadega vedelikku. Pärast nõutud aja möödumist (pool tundi kuni 5 tundi), kui antikehad on antigeenid tuvastanud ja nendega seondunud, vedelik kurnatakse, süvendid pestakse hoolikalt ja lisatakse neile ensüüm. Viiruse kontsentratsioon vereühikus määratakse värvimismeetodi abil.
• Kaudne ELISA. Selle meetodi puhul lisatakse testitav vereseerum ja märgistatud antikehad süvendite pinnale adsorbeerunud antigeenidele. Selle tulemusena saadakse kahte tüüpi sidemeid, millest mõned on märgistatud. Tulemus sõltub testitava proovi antigeenide kontsentratsioonist. Mida rohkem on märgistamata antikehi, seda vähem ühendeid ensüümi poolt märgistatakse.

Seejärel lisatakse pestud kompositsioonile spetsiaalne reagent, mida kasutatakse antigeeni-antikeha komplekside ensümaatilise aktiivsuse määramiseks.

• "Võileib". Erineb kaudsest meetodist selle poolest, et pinnale ei adsorbeeru esialgu mitte antigeene, vaid antikehi. Neile lisatakse lahus, mis sisaldab uuritavaid antigeene. Pärast kandja pesemist lisatakse ensümaatiliste märgistega antikehad. Liigsed antikehad eemaldatakse uuesti ja vesinikperoksiidi abil saadakse värviline aine, mida uuritakse spektromeetrilisel meetodil.

Selline analüüs võimaldab mitte ainult tuvastada spetsiifilisi antikehi ja määrata antigeenide kontsentratsiooni, vaid ka selgitada haiguse staadiumi. Fakt on see, et herpeseinfektsiooni erinevates etappides ilmnevad Epsteini-Barri viiruse erinevad antigeenid, mis tähendab, et nende antikehad tekivad haiguse teatud perioodil.

Seega ilmuvad varajase antigeeni (IgG EA) vastased IgG antikehad veres 1-2 nädalat pärast nakatumist, kui haigus on ägedas staadiumis või viiruse taasaktiveerimise staadiumis. Seda tüüpi immunoglobuliinid kaovad 3-6 kuu pärast. Viirusnakkuse kroonilise kulgemise korral on selliseid antikehi eriti palju ja atüüpilise vormi korral puuduvad nad üldse.

Kapsiidi antigeeni (IgG VCA) vastased IgG antikehad ilmnevad samuti varakult, haiguse esimese 4 nädala jooksul, kuid nende suurim arv määratakse nakkuse teiseks kuuks. Ägedas faasis leidub neid enamikul patsientidest, kuid lastel ei pruugi need ilmneda. Haiguse kroonilise kulgemise korral, eriti viiruse taasaktiveerimise perioodidel, on IgG VCA hulk eriti suur. Need antikehad jäävad inimese verre igaveseks, nagu viirus ise, mis näitab nakkustekitaja suhtes tekkinud immuunsust.

Kapsiidi antigeeni vastased IgM-antikehad (IgM VCA) võivad ilmneda isegi enne haiguse esimesi märke. Nende kontsentratsioon (tiitrid) on eriti kõrge haiguse esimese 6 nädala jooksul. Seda tüüpi antikehad on iseloomulikud ägedale infektsioonile ja kroonilise infektsiooni taasaktiveerumisele. IgM VCA kaovad 1-6 kuu pärast.

Tuumageeni (IgG EBNA) vastased IgG antikehad võivad viidata sellele, et inimene on varem otseselt kokku puutunud herpesinfektsiooniga. Haiguse ägedas faasis avastatakse neid äärmiselt harva, tavaliselt ilmnevad nad taastumisperioodil (3.-10. kuul). Neid saab verest tuvastada mitu aastat pärast nakatumist.

Üksikute antigeenide tuvastamine ei anna haigusest täielikku pilti, seega tuleks erinevate antikehade testid läbi viia koos. Näiteks kui esineb ainult IgM VCA ja IgG EBNA-d ei tuvastata, on tegemist primaarse infektsiooniga.

Kahjuks ei ole ensüümimmunoanalüüs sageli piisav primaarse herpesinfektsiooni või kaasasündinud patoloogia avastamiseks. Viimasel juhul ei pruugi antikehi üldse tuvastada. Primaarse haiguse kinnitava testina kasutatakse Epsteini-Barri viiruse määramiseks vere või muu bioloogilise materjali molekulaarset uuringut.

Epsteini-Barri viiruse PRC analüüs

See analüüs viiakse läbi ägeda primaarse infektsiooni staadiumis, vastasel juhul on selle tulemus vale.

PCR-meetodi (polüdimensionaalse ahelreaktsiooni) olemus seisneb selles, et igal nakkustekitaja DNA molekulis on oma geenide komplekt. Patogeeni DNA sisaldub uurimiseks võetud biomaterjalis väikestes kogustes (viirused ise on mikroskoopilise suurusega), seega on olukorda väga raske hinnata. Kuid kui viiakse läbi spetsiifiline reaktsioon, suureneb geneetilise materjali hulk märkimisväärselt, mis võimaldab patogeeni nimetada.

Ühekordselt kasutatavate instrumentide abil võetakse molekulaarseks uuringuks materjal, mis asetatakse analüüsimiseks spetsiaalsesse seadmesse. Seade on spetsiaalse programmiga termostaat - termotsükler või võimendi. Seade läbib mitukümmend korda (umbes 2-3 minutit) täieliku PRC tsükli, millel on 3 etappi:

• Denatureerimine (temperatuuril 95 kraadi eraldatakse DNA ahelad).
• Lõõmutamine (temperatuuril 75 kraadi sisestatakse uuritavasse materjali spetsiaalselt EBV jaoks ettevalmistatud "praimerid", mis kinnituvad viiruse DNA-le).
• Geneetilise materjali pikendamine või paljundamine (seemnele lisatakse temperatuuril 72 kraadi spetsiaalset ensüümi, mis taasloob uue DNA ahela, kahekordistades seeläbi geneetilise materjali hulka).

Kui polüdimensionaalse reaktsiooni täistsükkel läbi viia 50 korda, suureneb materjali hulk 100 korda. See tähendab, et patogeeni on palju lihtsam tuvastada.

Epsteini-Barri viiruse test lapsele

Nagu me juba teame, võib Epsteini-Barri viirus põhjustada paljude haiguste teket. Kui see inimkehasse siseneb, jääb see selle alaliseks elanikuks ja ainult immuunsüsteemi hästi koordineeritud töö ei võimalda tal rakkude sees aktiivselt parasiteerida.

Peaaegu 95% maailma täiskasvanud elanikkonnast elab EBV-ga ja enamik neist tutvus viirusega varases lapsepõlves. Mõned pärisid selle oma emalt, teised aga said viiruse vanematelt ja sugulastelt, kes tormasid lapse juurde suudlustega, või lasteaias või koolis õhus levivate piiskade kaudu (sealsed nakkushaigused omandavad tavaliselt "universaalsed" proportsioonid).

Väikesed lapsed kipuvad üldiselt kõike suhu panema ja kõige rohkem virioone leidub süljes. Ja kui lasteaias lakub sama mänguasja mitu last, samal ajal kui õpetajad on oma asjadega hõivatud, siis pole üllatav, et viirus levib suurtes lastegruppides nii aktiivselt.

EBV-d võib julgelt nimetada laste ja noorte haiguseks, sest noorukieas on pooltel lastest viirus juba organismis (ja 30. eluaastaks umbes 90%-l täiskasvanutest). Erinevas vanuses lapsed haigestuvad omal moel. Kuni aastani, kui laps aktiivselt inimestega ei suhtle, on tema haigestumise tõenäosus väike. Üle aasta vana laps, isegi kui ta pole lasteaias käinud, muutub seltskondlikumaks, mängib tänaval eakaaslastega, käib emaga aktiivselt poeskäigul jne ning viirusesse nakatumise tõenäosus muutub palju suuremaks.

Kuid see ei ole põhjus lapse nelja seina vahele lukustamiseks. 1-3-aastaselt kulgeb haigus enamikul juhtudel ilma sümptomiteta, välja arvatud ehk kerge palavik ja kerge nohu, mis meenutab külmetust. Selgub, et mida varem laps viirusega tutvub, seda lihtsam on selline tutvus.

Pole hea, kui laps haigestub ilma IgG VCA antikehade ilmnemiseta veres, mis võib viidata sellele, et viiruse suhtes immuunsust pole tekkinud ja viiruse taasaktiveerimine on võimalik kohe, kui immuunsüsteem nõrgeneb. Põhjuseks on kõige tõenäolisemalt väikelaste immuunsüsteemi ebatäiuslikkus, mis on kujunemisjärgus mitu aastat.

Koolielu pakub haiguse tekkeks veelgi rohkem eeldusi, eriti noorukieas, kui noored harrastavad aktiivselt suudlemist. Kuid üle 3-aastastel lastel kulgeb haigus harvemini asümptomaatiliselt. Enamasti puutuvad arstid kokku nakkusliku mononukleoosiga, millel on selle iseloomulikud sümptomid.

Hoolimata asjaolust, et patoloogial võib olla pikk kulg (umbes 2 kuud), pole see nii ohtlik ega vaja tõsiste ravimite kasutamist. Arstid määravad põletikuvastaseid ja viirusevastaseid ravimeid ning kui bakteriaalne infektsioon liitub, otsivad nad abi antibiootikumidest. Muide, penitsilliine sel juhul ei soovitata, kuna need võivad esile kutsuda nahalööbe.

Ärge arvake, et kui laps või teismeline haigestub nakkavasse mononukleoosi, tähendab see, et Epsteini-Barri viirus on tema kehasse elama asunud. Haigusel on ka teisi vähem levinud patogeene, näiteks tsütomegaloviirus (herpesviiruse tüüp 5). Et mõista, millega tegemist on, määravad arstid Epsteini-Barri viiruse testi ja vajadusel ka muid laborikatseid.

Samuti on tõsi, et nakkav mononukleoos ei ole EBV ainus ilming lapsepõlves. Selle patogeeniga on seotud ka teisi haigusi, kuid meie piirkonnas on need haruldased.

Seega leitakse Burkitti lümfoomi (millele EBV võlgneb oma avastamise) peamiselt Aafrika riikide lastel, väga harva Ameerikas ja veelgi harvemini Euroopas (ja seda ainult AIDSi taustal). Lõualuu kasvaja, mis kahjustab lümfisõlmi, neere ja teisi organeid, esineb 3-8-aastastel lastel.

Nina-neeluvähk, märkimisväärne osa teistest lümfoomidest, suu karvane leukoplaakia - kõik need on EBV ilmingud oluliselt vähenenud immuunsuse taustal, mis tekib HIV-nakkuse ja selle hilisema AIDS-i staadiumi korral.

Kaasasündinud immuunpuudulikkus ja Epsteini-Barri viiruse lisamine on ohtlik segu, mis võib viia lapse proliferatiivse sündroomi tekkeni. Sellisel juhul viib B-lümfotsüütide arvu suurenemine graanulite ilmnemiseni paljudes organites, mis takistab nende normaalset toimimist. See on kõrge suremuse määr, kuid see ei arene normaalse immuunsuse taustal.

Võib öelda, et lapsepõlves on Epsteini-Barri viirus ohtlik peamiselt immuunpuudulikkuse korral erinevate tüsistuste tekke tõttu. Enamasti piirdub kõik nakkusliku mononukleoosiga. Ja kuigi see ei vaja erilist ravi, eelistavad arstid siiski patogeeni olemuse kindlakstegemist, milleks lapsele määratakse üldine vereanalüüs, ensüümimmunoanalüüs ja PCR.

Kuna lapsepõlves esineb peamiselt primaarne infektsioon, on täiesti võimalik piirduda ainult täieliku vereanalüüsi ja PCR-iga, mis on haiguse esmasel avastamisel üsna informatiivne.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ]

Tavaline jõudlus

PCR-analüüsi tulemusi töödeldakse elektroforeesi teel või märgistatud "praimerite" abil. Viimasel juhul piisab lihtsalt reagendi (kromogeen) lisamisest ja värvi järgi määramisest, kas proovis on virioone. Elektroforeesi positiivne tulemus on näidustatud, kui uuritavas proovis tuvastatakse erineva pikkusega DNA-ahelaid.

Haiguse inkubatsiooniperioodil ja asümptomaatilise viiruskandluse korral annab PCR negatiivse tulemuse, samuti viiruse täieliku puudumise korral organismis. Primaarse infektsiooni alguses ja selle algstaadiumis võib PCR reaalajas anda nii positiivseid kui ka negatiivseid tulemusi, mis olukorda kuidagi ei selgita.

Kuid haiguse keskel (äge faas), selle kroonilises kulges või viiruse taasaktiveerumisel (ägenemine) ja atüüpiliste vormide korral on analüüs positiivne. Kui inimene on pikka aega haige olnud ja viirus tema kehas on inaktiivses olekus, annab PCR-analüüs negatiivse tulemuse, st selle analüüsi tegemine on samuti sobimatu, samuti haiguse liiga varajases staadiumis.

Tuleb öelda, et seda tüüpi laboriuuringute täpsed tulemused on võimalikud ainult primaarse nakkuse ja teiste viiruste virionide puudumise korral.

Nüüd Epsteini-Barri viiruse ensüümimmunoanalüüsi kohta. Sellel on samad nõuded. Herpesviiruse tüüpide 5 või 6, toksoplasmoosi ja HIV-nakkuse esinemine organismis võib tulemust moonutada samamoodi nagu hooletu suhtumine analüüsi või kasutatud reagentide halb kvaliteet. Sellisel juhul võib olla vaja täiendavaid uuringuid, võttes arvesse võimalikke patogeene.

Normaalsed testitulemused, mis näitavad viiruse puudumist organismis, loetakse kõigi nelja testi puhul negatiivseks tulemuseks: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA ja IgG EBNA. Jah, iga test tehakse eraldi, kuna antigeenid ilmuvad haiguse erinevatel perioodidel. Mõnikord võidakse määrata ainult üksikud testid, kuid enamasti tuleb teha kõik neli testi, kuid haiguse erinevatel perioodidel.

Näiteks haiguse inkubatsiooniperioodil, samuti nakkuse puudumisel, ei tuvastata veres ühtegi neljast antikehade tüübist. Sellist tulemust ei saa pidada piisavaks, sest see ei võimalda eristada esmakordselt haigestunud inimest tervest inimesest.

Primaarse haiguse alguses ilmuvad veres ainult IgM VCA antikehad. Haiguse algstaadiumis liituvad nendega IgG VCA.

Primaarse infektsiooni ägedas staadiumis tekivad kolme tüüpi antikehad: IgG VCA, IgM VCA ja IgG EA, kusjuures kõige rohkem IgG antikehi tuvastatakse kapsiidi antigeeni vastu. Sama antikehade koostis säilib kuus kuud pärast haiguse ägedat faasi, kuid IgM VCA hulk väheneb järk-järgult nullini.

Kuus kuud pärast haigestumist ilmuvad veres IgG EBNA antikehad, samal ajal kui IgG EA immunoglobuliine jääb aina vähemaks ja IgM VCA puuduvad täielikult.

Haiguse kroonilistel juhtudel või viiruse taasaktiveerumisel võivad olla erinevad näitajad. Enamasti leidub veres kõiki nelja tüüpi antikehi. Kuid on ka võimalik, et immunoglobuliine IgM VCA ja IgG EBNA ei tuvastata.

Viirusnakkuse tüsistus kasvajaprotsessidega tekib IgM VCA antikehade puudumisel ja IgG EBNA immunoglobuliine ei tuvastata kõigil juhtudel.

Kuid ensüümimmunoanalüüs määrab mitte ainult teatud antikehade olemasolu, vaid ka nende kontsentratsiooni, mis võimaldab meil täpsemalt hinnata patoloogia staadiumi ja selle võimalikke tagajärgi. Siin ei ole vaja rääkida konkreetsetest arvudest. Lõppude lõpuks viib iga labor analüüsi läbi ühel võimalikul viisil, kasutades erinevaid reagente, seega võivad erinevate laborite analüüsi tulemused digitaalsel kujul erineda.

Patsiendile tuleb anda vorm, mis näitab läviväärtusi (referentsväärtusi). Kui tulemus on alla läviväärtuse, loetakse seda normaalseks (negatiivseks) näitajaks. Kui määratud arv on üle referentsväärtuse, näitab kõik positiivset tulemust, mis tähendab, et viirus elab organismis. Määratud väärtuse väärtus näitab haiguse staadiumi ja organismi koloniseerimist EBV virionidega, st patoloogia raskusastet.

Kui ELISA test on negatiivne, tähendab see vaid seda, et inimesel pole varem EBV-ga kokkupuudet olnud. Kuid on võimatu kindlalt öelda, kas viirus on organismis praegu olemas. Negatiivse tulemuse võib põhjustada patogeeni inkubatsioon organismis ja asümptomaatiline viiruse kandlus. Mõnikord on vaja mõne aja pärast teha teine testide seeria, et veenduda, et organismis viirust ei esine.

Kui Epsteini-Barri viiruse ELISA tulemus ületab vaid veidi referentsväärtusi, peetakse tulemust küsitavaks. Põhjuseks on enamasti haiguse varajane staadium või mõne teise viiruse virionide olemasolu organismis. Sellisel juhul on soovitatav 2 nädala pärast teha korduv test EBV ja võimalusel ka teiste patogeenide suhtes.

[ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]

Mis puutub küsimusesse, kui kaua Epsteini-Barri viiruse testi tegemine aega võtab ja millal tulemusi oodata, siis erilisi raskusi pole oodata. Tõsises ja hästi varustatud laboris peate pärast biomaterjali esitamist ootama mitte rohkem kui 2 päeva. Kiireloomulistes analüüsides saab vastuse isegi paari tunni pärast.

Epsteini-Barri viiruse test tuleks teha usaldusväärses laboris, kus on nii kvaliteetsed reagendid kui ka kvalifitseeritud spetsialistid. Lõppude lõpuks maksab test raha (ja mitte vähe, ühe tüüpi antikehade test maksab umbes 150–170 UAH) ja ma ei tahaks saada vale tulemust ning seejärel võimalusel uuesti ühendust võtta, aga teise laborisse, et teha korduv test.

[ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ]