Vereanalüüs vähirakkude olemasolu kohta organismis: nimi, kuidas seda teha

Tänapäeval puutub meditsiin üha enam kokku onkoloogiliste haigustega. Vaatamata vähkkasvajate laialdasele levikule on nende tekke ja leviku mehhanism endiselt uurimata. Onkoloogiliste haiguste levik toimub uskumatu kiirusega. Enamasti mõjutavad need haigused pensioniealisi inimesi. Aga kui varem peeti seda haigust peamiselt vanema põlvkonna haiguseks, siis tänapäeval on kalduvus haigestuda nooremasse põlvkonda. Noored, teismelised ja isegi väikesed lapsed on sellele haigusele vastuvõtlikud. Oht on selles, et vähkkasvajad võivad mõjutada absoluutselt iga organit. Nad kasvavad ja teatud hetkel rakk laguneb, satub teise koesse ja kinnitub. Selle tulemusena tekib uus kasvaja (metastaas). Kasvajate arengut ja metastaaside teket saab vältida, kui kasvaja avastatakse õigeaegselt ja võetakse vajalikud meetmed. Vähirakkude analüüsil on pahaloomuliste kasvajate varajases diagnoosimises juhtiv roll.

Testid võimaldavad kasvajat avastada, diagnoosida ja mis kõige tähtsam, õigeaegselt reageerida. Varajases staadiumis on arengut veel võimalik ennetada. Kuid enamasti avastatakse kasvajad hilises staadiumis, kui patsienti on sageli võimatu aidata. Diagnoosimise raskus seisneb selles, et varases staadiumis areneb kasvaja peaaegu asümptomaatiliselt ja seda saab tuvastada ainult ennetava läbivaatuse või laborikatsete käigus.

Milliseid teste tehakse vähirakkude tuvastamiseks?

Vähiuuringu läbiviimisel tehakse üldine objektiivne uuring, kasutades erinevaid instrumentaalseid meetodeid, ja kasutatakse ka laboratoorseid analüüse. Esmalt määratakse patsiendile standardsed kliinilised testid. Nende põhjal saab üldise ettekujutuse organismis toimuvatest protsessidest. Pahaloomulisi kasvajaid võib kaudselt näidata leukotsüütide arvu suurenemise ja ESR-i suurenemisega. Sellest teabest aga üksi ei piisa, kuna iga haiguse, nakkusliku või põletikulise protsessi korral need näitajad ka suurenevad. Vähki võib näidata ka hemoglobiini järsk langus, eriti kui võrrelda näitajaid dünaamikas. Selliste märkide avastamisel määratakse spetsiaalne uuring, mille eesmärk on vähirakkude avastamiseks.

Tehakse ulatuslik vereanalüüs, mille käigus määratakse spetsiifilised onkoloogilised markerid. Need markerid moodustuvad kohe, isegi kasvaja moodustumise staadiumis. Seega võimaldavad need tuvastada transformeerunud rakke ja vähkkasvajaid nende moodustumise algstaadiumis.

Diagnostilise meetodi põhimõte on see, et spetsiaalsed testimissüsteemid tuvastavad veres kasvaja markereid, mida toodavad vähkkasvajad. Mida raskem on haiguse staadium, seda suurem on nende kontsentratsioon veres. Terve inimese kehas kasvaja markereid ei tooda. Seega on nende olemasolu vähkkasvaja otsene kinnitus. Tulemuste põhjal saab hinnata kasvaja suurust, tüüpi ja lokaliseerimist.

Menetluse tähised vähirakkude analüüsiks

Vähirakkude testi tehakse vähi kahtluse korral, samuti ennetuslikel eesmärkidel vähkkasvajate varajaseks diagnoosimiseks. Testi peaksid perioodiliselt tegema ka üle 50-aastased inimesed, samuti need, kes kuuluvad vähkkasvajate tekke riskirühma. Test tehakse siis, kui avastatakse kasvaja, mille olemus on ebaselge. See võimaldab kindlaks teha, kas kasvaja on healoomuline või pahaloomuline. Testi tehakse ka vähihaigete tulemuste dünaamika jälgimiseks ja ravi efektiivsuse kontrollimiseks.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Ettevalmistus

Kasvajamarkerite analüüs ei vaja spetsiaalset ettevalmistust. Teil on vaja ainult arsti saatekirja. Seejärel pidage 2-3 päeva enne analüüsi kerget dieeti (ärge tarvitage alkoholi, vürtsikaid, rasvaseid, suitsutatud toite, vürtse). Analüüs tuleks teha tühja kõhuga. Viimane söögikord peaks olema 8 tundi enne testi. Te ei tohi hommikul juua ega suitsetada. Ärge koormake keha mitu päeva üle ja vältige füüsilist pingutust.

[ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Tehnika vähirakkude analüüsiks

Meetodeid on palju. Kõik sõltub uuringu tüübist. Kui kasvaja markerite määramiseks tehakse vereanalüüs, tehakse see ensüümimmunoanalüüsi meetodite abil. See meetod põhineb aglutinatsioonireaktsioonil, mille käigus toimib kasvaja marker organismile võõrkehana (antigeenina). Immuunsüsteem reageerib sellele kohe, tootes antikeha. Antikehade toime on suunatud võõrorganismi hävitamisele ja sellele järgnevale eemaldamisele. Antikeha leiab antigeeni, mis on vähi marker, ründab seda ja stimuleerib hävimist. Selle võitluse käigus antigeen ja antikeha ühinevad, tekib aglutinatsioonireaktsioon. Need kompleksid tuvastatakse analüüsi käigus, kui antikehad viiakse verre.

Selleks võetakse patsiendilt vajalik kogus verd. Hüübimise vältimiseks lisatakse paar tilka hepariini. Seejärel toimetatakse veri laborisse. Seal jagatakse veri fraktsioonideks. Vereseerum eraldatakse eraldi, kuna seerumis leidub kasvaja markereid. Selleks kasutatakse tsentrifuugimist. Spetsiaalse seadme - tsentrifuugi - abil pööratakse katseklaasis olevat verd suurel kiirusel. Selle tulemusel settivad kõik vere moodustunud elemendid põhja, katseklaas sisaldab ainult seerumit. Sellega tehakse edasisi manipulatsioone.

Võetakse spetsiaalne analüüsikomplekt (ELISA), raku põhja lisatakse teatud kogus vereseerumit. Lisatakse spetsiaalne vähivastane antikeha. Oodatakse mitu tundi. Kui toimub kompleksi moodustumise reaktsioon, mille käigus antikehad ja antigeenid ühinevad, siis on veres antigeen, mis toimib onkomarkerina, mis näitab vähi olemasolu. Antigeeni-antikeha komplekside moodustumist on näha palja silmaga, kuna katseklaasis ilmneb hägusus ja helveste kujul olev sete. Hägususe astme järgi saab hinnata onkomarkerite arvu. Kuid tulemuste täpsuse tagamiseks tehakse spetsiaalseid mõõtmisi. Kasutatakse rahvusvahelist hägususe standardit või spektrofotomeetrit, mis lahuse läbiva valguse murdumisnurga põhjal määrab selle kontsentratsiooni ja annab valmis tulemuse.

On veel üks meetod – verefraktsioonide immunomagnetiline diferentseerimine. Selleks kasutatakse spetsiaalset seadet, mis võimaldab vähirakke tuvastada, määrates kasvaja markereid, mis kinnituvad muutunud rakule ja muutuvad magnetväljas nähtavaks. Selle meetodi täpsus on üsna kõrge – isegi miljonist tervest rakust on võimalik tuvastada üks vähirakk.

Samuti on selliste analüüside abil võimalik kindlaks teha vähirakkude täpne arv, nende leviku kiirus ja ennustada kasvudünaamikat. Samuti on nende analüüside eeliseks see, et need võimaldavad jälgida ravikuuri, määrata ravi efektiivsust ning valida suure täpsusega ravimeid ja nende optimaalset annust. Annustamise täpsus ravi ajal mängib juhtivat rolli, kuna see võimaldab tõhusalt võidelda tüsistustega, vähendada vähirakkude arvu ja ennetada metastaaside teket. Lisaks vähendab selline õige annus ravimite toksilist toimet organismile.

Samuti on olemas biopsia uurimise meetod, mille puhul võetakse uurimiseks koetükk. Seejärel viiakse läbi tsütoloogiline ja histoloogiline uuring. Tsütoloogiline analüüs hõlmab saadud koeproovist mikropreparaadi valmistamist selle omaduste edasiseks uurimiseks mikroskoobi all. Uuritakse peamisi morfoloogilisi ja anatoomilisi omadusi. Terve koeproovist võetud mikropreparaat erineb teravalt vähkkasvaja omast. Esineb teatud erinevusi struktuuris, välimuses ja toimuvates rakusisestes protsessides. Spetsiifilised lisandid võivad samuti viidata vähkkasvajale.

Histoloogilise uuringu käigus külvatakse kude spetsiaalsele koekultuuri kasvatamiseks mõeldud söötmele. Külvi kultiveeritakse spetsiaalsetes tingimustes 7 päeva, mille järel jälgitakse kasvaja kasvu iseloomu, kiirust ja suunda. Sellel on oluline diagnostiline tähtsus.

Vereanalüüs vähi kasvajate suhtes

Kiireim viis onkoloogilise haiguse kindlakstegemiseks on vereanalüüs. Selline uuring viiakse läbi 1-2 päeva jooksul ja vajadusel saab kiireloomulisi tulemusi 3-4 tunni jooksul. See on ekspressmeetod, mis nõuab siiski täiendavaid selgitavaid uuringuid. Sellest aga piisab esialgse diagnoosi saamiseks ja kasvaja täpseks tuvastamiseks. Analüüs võimaldab määrata isegi kasvaja täpse asukoha ja onkoloogilise protsessi staadiumi.

Uurimismaterjaliks on patsiendi veri. Analüüs tehakse hommikul tühja kõhuga. Seda kasutatakse peamiselt diagnoosi kinnitamiseks või ümberlükkamiseks ning see võimaldab eristada healoomulist kasvajat pahaloomulisest. Seda kasutatakse ka näitajate dünaamiliseks jälgimiseks, et määrata ravi efektiivsust, jälgida kasvaja seisundit ja ennetada retsidiive.

Meetodi põhimõte on määrata peamised antigeenid, mida vähirakud toodavad kasvaja arengu ajal. Kui need avastatakse, on võimalik kindlalt öelda, et inimesel on vähk. Kui aga selliseid kasvaja markereid ei tuvastata, siis negatiivset tulemust ei anta. Sellisel juhul on ette nähtud täiendavad uuringud.

Kasvaja lokaliseerimist saab määrata kasvajamarkeri tüübi järgi. Kui patsiendi veres tuvastatakse antigeen CA19-9, võib see viidata kõhunäärmevähile. CEA marker näitab kasvaja lokaliseerumist soolestikus, maksas, neerudes, kopsudes ja teistes siseorganites. Kui tuvastatakse CA-125, viitab see onkoloogilisele protsessile munasarjades või manustes. PSA ja CA-15-3 markerid näitavad vastavalt eesnäärmevähki ja rinnavähki. CA72-3 näitab maovähki ja kopsuvähki, B-2-MG leukeemiat, leukeemiat, müeloomi. ACE ilmneb maksavähi ja metastaaside korral. Vereanalüüs ei ole ainus meetodit kinnitav tegur. Seda tuleks kasutada koos paljude teiste teguritega.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ]

Emakakaelavähi rakkude test

Emakakaelavähirakke saab tuvastada vereanalüüsiga, mille eesmärk on onkomarkeri tuvastamine. Reeglina tuvastatakse sellistel juhtudel CEA ehk kartsinoembrüoonne antigeen. Testimiseks võetakse ka tupe ja emakakaela määrdproov. Esmalt tehakse esialgne tsütoloogiline uuring. Tsütoloogilise analüüsi käigus saab tuvastada transformeerunud rakke ja spetsiifilisi inklusioone, mis viitavad onkoloogilistele protsessidele.

Pärast seda tehakse vajadusel biopsia, mille käigus võetakse uurimiseks koetükk. See külvatakse toitainekeskkonnale, inkubeeritakse ja seejärel uuritakse peamisi morfoloogilisi ja biokeemilisi omadusi. Saadud andmete põhjal tehakse järeldus kasvaja olemuse, arenguastme ja vähirakkude kontsentratsiooni kohta.

[ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Kartsinoembrüoonilise antigeeni test

See on antigeen, mida kasutatakse mao-, soolte-, pärasoole-, naiste suguelundite ja piimanäärmete vähi diagnoosimiseks ja raviks. Täiskasvanutel toodavad seda väikestes kogustes bronhid ja kopsud ning seda leidub paljudes bioloogilistes vedelikes ja eritistes. Selle kogus, mis onkoloogias järsult suureneb, on indikaator. Tuleb arvestada, et selle kogus võib olla suurenenud ka autoimmuunhaiguste, tuberkuloosi, healoomuliste kasvajate all kannatavatel inimestel ja isegi suitsetajatel. Seetõttu on nende markerite kõrge kontsentratsiooni (20 ng/ml ja üle selle) tuvastamine vaid kaudne vähi kinnitus ja on vaja läbi viia mitmeid täiendavaid uuringuid. Täielike järelduste tegemiseks tuleks ka seda indikaatorit dünaamiliselt jälgida. Uurimismaterjaliks on venoosne veri. Antigeen tuvastatakse vereseerumis.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ]

Vähirakkude mutatsiooni analüüs

Epidermaalse kasvufaktori retseptor on transmembraanne retseptor, mis interakteerub epidermaalse kasvufaktori rakuväliste ligandidega. See osaleb paljude organite vähkkasvajate moodustumisel, eriti on see usaldusväärne kopsuvähi märk. Fakt on see, et tavaliselt on peamiste geenide eesmärk tagada kontroll keharakkude kasvu ja paljunemise üle. Rakud kasvavad, paljunevad teatud piirini, mille järel geen annab signaali edasise paljunemise peatamiseks ja rakkude jagunemine peatub.

Geen kontrollib ka apoptoosi protsessi – vanade, vananenud rakkude õigeaegset surma. Kui geenides tekivad mutatsioonid, lakkavad need kontrollimast paljunemist (proliferatsiooni) ja surma (apoptoosi) ning annavad signaali pidevaks kasvuks, mille tulemusel rakud kasvavad piiramatult ja jagunevad pidevalt, kontrollimatult. See viib vähkkasvaja tekkeni, mida iseloomustab võime piiramatult kasvada. Oma kõige primitiivsemas vormis võib vähki ette kujutada kui raku kontrollimatut jagunemist ja surematust. Protsessi peetakse ka raku võimetuseks õigeaegselt surra.

Keemiaravi ja mitmesugused kasvajavastased ravimid on suunatud just selle geeni hävitamisele ja inaktiveerimisele. Kui selle aktiivsust saab pärssida, saab peatada ka vähi arengu. Kuid paljude aastate jooksul selliste sihipäraste ravimitega ravimisel on geen, nagu iga organism, kohanenud ja muutunud resistentseks mitmete ravimite suhtes.

Pärast seda ravimeid täiustati, nende valemit muudeti, need muutusid selle geeni suhtes taas aktiivseks. Kuid ka geen ise on täiustatud: see muteerus korduvalt, iga kord tekitades ravimiresistentsuse. Aastate jooksul on selle geeni mutatsioonide tüüpe kogunenud palju, üle 25. See toob kaasa spetsiifilise ravi ebaefektiivsuse. Et mitte raisata aega mõttetule ravile, mis ei ole efektiivne, tehakse selle geeni mutatsiooni kindlakstegemiseks analüüs.

Näiteks KRAS-geeni mutatsioonide tuvastamine näitab, et kopsu- ja käärsoolevähi ravi türosiinkinaasi inhibiitoritega on ebaefektiivne. Kui ALK- ja ROS1-geenides tuvastatakse mutatsioonid, siis on vaja välja kirjutada krizotinib, mis pärsib seda geeni kiiresti ja tõhusalt ning takistab kasvaja edasist arengut. BRAF-geen viib melanoomi tekkeni.

Tänapäeval on olemas ravimeid, mis suudavad selle geeni aktiivsust blokeerida ja muuta selle keskkonda piiramatuks kasvuks. See viib kasvaja kasvu aeglustumisele või peatumisele. Koos kasvajavastaste ravimitega on võimalik saavutada märkimisväärseid tulemusi ravis, sealhulgas kasvaja suuruse vähenemine.

[ 37 ], [ 38 ], [ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ]

Vähirakkude väljaheite analüüs

Tavaliselt on analüüsi eesmärk tuvastada väljaheites peidetud verd. See märk võib viidata onkoloogilise protsessi esinemisele käärsooles või pärasooles. Üle 45–50-aastased inimesed, kellel on suurim risk vähi tekkeks, peavad seda testi tegema igal aastal. See võib viidata ka teistele patoloogiatele, kuid siis on diferentsiaaldiagnostikaks vaja täiendavaid uuringuid. See on varajane diagnostiline meetod, mis võimaldab kasvajat avastada selle tekkejärgus ja võtta meetmeid raviks. Sageli saab selle meetodi abil avastada isegi vähieelset seisundit.

Vähirakkude biopsia

See on uuring, mis annab kõige täpsemad ja usaldusväärsemad tulemused. See koosneb kahest etapist. Esimeses etapis kogutakse edasiseks uurimiseks bioloogilist materjali. Materjal on koetükk, mis võetakse otse elundist, kus kasvaja asub. Tegelikult lõikab arst spetsiaalse varustuse ja instrumentide abil kasvajast tüki ja saadab selle edasiseks uurimiseks laborisse. Kogumine toimub tavaliselt kohaliku tuimestuse abil.

Teises etapis läbib bioloogiline materjal täiendava tsütoloogilise ja histoloogilise uuringu. Tsütoloogilise uuringu käigus valmistatakse mikropreparaat, mida uuritakse mikroskoobi all. Üldpildi, välimuse ja kaasatud moodustiste olemuse põhjal saab teha esialgse järelduse, kas kasvaja on healoomuline või pahaloomuline. See etapp ei kesta kauem kui 30 minutit.

Pärast seda leotatakse kude ja külvatakse spetsiaalsesse toitekeskkonda, mis sisaldab kõiki rakkude kasvu tingimusi. Kultuur asetatakse optimaalsetesse tingimustesse inkubaatorisse ja hoitakse kuu aega. Uuring on üsna pikk ja selle määrab rakkude kasvu kiirus. Kui tegemist on vähkkasvajaga, hakkab see aktiivselt kasvama. Healoomuline, terve kasvaja ei kasva. Kasvu kiirendamiseks võib lisada kasvufaktoreid, mis stimuleerivad kasvaja kasvu veelgi. Sellisel juhul saab tulemusi 7-10 päeva jooksul.

Kasvanud kasvajat uuritakse edasi biokeemiliselt ja mikroskoopiliselt ning lõpuks pannakse tulemus lõpliku diagnoosina, mis määrab kasvaja tüübi, staadiumi, levimuse ja kasvu suuna. See on tavaliselt lõplik versioon, mis annab tulemuse 100% täpsusega.

[ 43 ], [ 44 ], [ 45 ], [ 46 ]

Tavaline jõudlus

Kui tehakse analüüs kasvaja markerite määramiseks, on analüüsi dešifreerimine üsna lihtne. Onkoloogilise haiguse korral leitakse organismis kasvaja markereid. Terves organismis kasvaja markereid ei ole, kuna neid toodavad ainult vähirakud. Erandiks on vähi embrüonaalne antigeen, mida organismis tavaliselt minimaalses koguses leidub. Kontsentratsiooni kerge tõus võib viidata mitmesugustele somaatilistele patoloogiatele ja ainult järsk tõus, üle 20 ng/ml, näitab vähkkasvaja olemasolu. Lisaks saab selle järgi, milline antigeen tuvastatakse, hinnata kasvaja lokaliseerimist. Iga organ toodab oma tüüpi markereid.

Biopsia tulemuste dešifreerimine on veelgi lihtsam. Kui toitainekeskkonnas täheldatakse rakkude kasvu, on kasvaja pahaloomuline; kui kasvu ei ole, on see healoomuline.

Vähirakkude testi norm

Kõikidele vähitüüpidele ei ole üheselt mõistetavaid näitajaid. Igal konkreetsel kasvajamarkeril on oma normaalväärtused. Lisaks varieeruvad need oluliselt sõltuvalt inimese vanusest ja füsioloogilistest iseärasustest.

Üldiselt saab esitada järgmised näitajad:

• 0–1 ng/ml – normaalne;
• 1-20 – healoomuline kasvaja, vähieelne seisund, somaatilised patoloogiad;
• 20-30 – vähkkasvaja;
• Üle 30 – metastaasid.

Oluline on meeles pidada, et iga kasvaja, isegi healoomuline, võib areneda pahaloomuliseks. Kasvajamarkerite puudumine ei näita alati vähi puudumist. See on täiendavate uuringute põhjus.

[ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Analüüsseade

Analüüsi läbiviimiseks on vaja ulatuslikku tehnoloogilist laborivarustust. Kasvajamarkerite tuvastamiseks on vaja spetsiaalseid ensüümimmunoanalüüsi komplekte, laboriklaase, dosaatoreid, mikropipette, tsentrifuugi, inkubaatorit, kultivaatorit, spektrofotomeetrit või massispektromeetrit optilise tiheduse mõõtmiseks ja immunomagnetilist separaatorit.

Tsütoloogiliseks, mikroskoopiliseks ja histoloogiliseks uuringuks on vaja suure eraldusvõimega mikroskoopi. Histoloogia jaoks on vaja auruvanni, autoklaavi, kuivkuumutuskappi, termostaati, inkubaatorit, eksikaatorit ja tõmbekappi.

Kui kaua võtab aega vähirakkude testimine?

Kasvajamarkerite tuvastamine on ekspressmeetod, mis võimaldab teil saada esialgseid tulemusi ja kinnitada või ümber lükata diagnoosi. Seda tehakse üsna kiiresti - 1-2 päeva, vajadusel saab seda kiirendada 3-4 tunnini.

Vähirakkude kõige usaldusväärsem ja täpsem analüüs on biopsia, mis võimaldab lõplikku diagnoosi panna. Selline analüüs tehakse 14 kuni 28 päeva jooksul (sõltuvalt rakukultuuri kasvukiirusest). Vajadusel saab seda kiirendada 7-10 päevani, luues spetsiaalsed inkubatsioonitingimused ja lisades kasvufaktoreid.