Bence-Jones'i valk

Tervisliku inimese uriin ei sisalda Bence-Jonesi valku, mida esindavad immunoglobuliinide kerged ahelad, mis tuvastatakse pahaloomuliste kasvajaprotsesside tekke tagajärjel.

Spetsiifiliste madalmolekulaarsete valkude olemasolu laboratoorsed testid on vajalikud mitmete patoloogiliste seisundite (kõige sagedamini β-immuunsüsteemi probleemide) diagnoosimiseks, samuti kasutatava ravi efektiivsuse määramiseks.

Liigselt toodetakse Bence-Jonesi valku plasmarakkudes, see liigub vereringega ja eritub uriiniga. Just valgukehade viimane omadus võimaldab uriini uurimisel kahtlustada järgmisi haigusi:

• müeloom;
• osteosarkoom;
• plasmatsütoom;
• krooniline lümfotsütaarne leukeemia;
• lümfogranulomatoos;
• primaarne amüloidoos;
• makroglobulineemia;
• idiapaatiline monoklonaalne gammopaatia.

Kliiniliselt on kinnitust leidnud seos spetsiifilise valgu vabanemise ja sellele järgneva neerufunktsiooni häire vahel, mis on põhjustatud valgukehade toksilisest mõjust neerutuubulite epiteelistruktuuridele, mis omakorda põhjustab düstroofia, Fanconi sündroomi ja neeruamüloidoosi nähtust.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Bence Jonesi valk uriinis

Valgu esinemist uriinis nimetatakse proteinuuriaks. Prereenaalse proteinuuria all mõistetakse suure hulga madalmolekulaarse valgu esinemist uriinis. Sellisel juhul ei ole neerufilter ja -tuubulid kahjustatud ning normaalne neerufunktsioon ei suuda tagada valgukehade reabsorptsiooni. Ekstrarenaalne (vale) proteinuuria, st see, mis tekib ilma neerufunktsiooni kahjustuseta, näitab nakkusliku või pahaloomulise protsessi esinemist organismis. Proteinuuriat täheldatakse 60–90% müeloomiga patsientidest. Umbes 20% patoloogilistest seisunditest on Bence-Jonesi müeloom.

Bence-Jonesi valk uriinis eristub β-immuunsüsteemi humoraalsete nihete tõttu. Valgukehade ilmumine on seotud müeloomi patoloogia, paraproteineemiliste hemoblastooside, endotelioosi, Waldenströmi makroglobulineemia, lümfoidse leukeemia ja osteosarkoomidega. Bence-Jonesi valgu tuvastamine uriinis on oluline diagnostiline ja prognostiline samm. Oma madala molekulmassi tõttu eritub Bence-Jonesi valk uriiniga, kahjustades neerutuubulite epiteeli, mis on täis neerupuudulikkuse tekke ohtu, mis võib viia surmani. Samuti on oluline valgu õigeaegne klassifitseerimine tüübi järgi: λ-valgul on suurem nefrotoksiline toime kui κ-valgul.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Bence Jonesi valguanalüüs

Seerumist erinevate valgukehade olemasolu uriinis viitab lümfaatilisele leukeemiale, osteosarkoomile või müeloomile (luuüdi kasvajalised protsessid). Bence-Jonesi valk sadestub uriini filtraadi kuumutamisel temperatuurini 45–60 °C häguse sette kujul, mis settib katseklaasi seintele. Temperatuuri edasine tõus keemistemperatuurini lahustab eraldunud hägususe.

Bence Jonesi valgu kvantitatiivne analüüs viiakse läbi järgmiselt:

• kasutades reagendina osaliselt vett ja osaliselt lämmastikhapet;
• lämmastikhappe (0,5–1 ml) asetamine katseklaasi, mille kihistamiseks on vaja sama palju uuritavat uriini;
• tulemuse hindamine 2 minuti pärast (õhukese rõnga ilmumine vedela keskkonna piirile näitab 0,033% valgukehade olemasolu).

Keermekujulise rõnga vaatlemiseks tuleb uriini lahjendada veega suhtega 1:1, paksu rõnga ilmumine viitab vajadusele segada osa uriinist kolme osa veega ja kompaktse rõnga puhul lahjendatakse osa uriinist seitsme osa veega. Lisaks jätkatakse lahjendamist seni, kuni iseloomulik sete ilmub testi 2-3 minuti jooksul.

Sisalduva valgu kogus arvutatakse, korrutades 0,033% lahjendusväärtusega. Näiteks kui uriin lahjendati 10 korda, valgukehade rõngas ilmus uuringu 3. minuti lõpuks, arvutatakse valgu protsentuaalne sisaldus järgmiselt: 0,033x10=0,33.

Kui setteid pole, hinnatakse hägususe astet - väljendunud, nõrgad või vaevu eristatavad hägususe jäljed.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ]

Bence Jonesi valgu sekretsioon

Sõltuvalt sekreteeritava immunoglobuliini tüübist eristatakse:

• kerge ahela patoloogiad (Bence Jonesi valgu sekretsioon);
• glomerulopaatia (teiste immunoglobuliinide sekretsioon).

Võimalikud on ka mitmesugused neerukahjustuse kombinatsioonid. Nagu praktika näitab, on nefropaatia lümfoproliferatiivse patoloogia (hulgimüeloom, krooniline lümfotsütaarne leukeemia, Waldenströmi tõbi jne) tagajärg.

Nagu kõik kuni 40 kDa molekulmassiga valgud, mööduvad ka kerged ahelad vereringesse neerufiltrist ning lagunevad seejärel lüsosoomide kaudu oligopeptiidideks ja aminohapeteks. Liigsed kerged ahelad provotseerivad katabolismireaktsiooni häireid ja võimalikku lüsosomaalsete ensüümide vabanemist, mis omakorda põhjustab tubulaarse koe nekroosi. Valgukehad takistavad reabsorptsiooni ja kui monoklonaalsed kerged ahelad kombineeruvad Tamm-Horsfalli valguga, moodustuvad distaalsetes tubulites valgusilindrid.

Bence Jonesi valk müeloomihaiguses

Hulgimüeloom on patoloogiline seisund, mille korral organism toodab täisväärtuslike asemel kergeid immunoglobuliini ahelaid. Haiguse diagnoosimine ja seisundi jälgimine toimub uriini laboratoorsete testide abil, mis näitavad valgukehade kvantitatiivset sisaldust. Müeloomi alatüübi täpsustus põhineb vereseerumi analüüsil. Haiguse kliinilisteks tunnusteks on: luuvalu sündroom, urineerimishäired, teadmata päritoluga hematoomid, vedelikupeetus organismis.

Müeloomi korral tuvastatakse Bence-Jonesi valk standardsete testide abil, mis näitavad valgukehade kvantitatiivset sisaldust ja hindavad neerukahjustuse astet. Valgu tuvastamine uriinis selgitab epiteeli kahjustust neerustrooma skleroosiga, mis aja jooksul moodustab neerupuudulikkuse - müeloomi kahjustuse tagajärjel sagedane surmapõhjus (Bence-Jonesi valk ummistab täielikult neerutuubulid, takistades urineerimist).

Statistilised andmed näitavad, et müeloom esineb diferentseeritult üle 60-aastastel meestel, kellel on geneetiline eelsoodumus, kes kannatavad rasvumise ja immuunsupressiooni all ning on kokku puutunud mürgiste ja radioaktiivsete ainetega.

[ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Bence Jonesi valgu määramine

Spetsiifilise valgu eristamiseks viiakse läbi hommikuse uriini keskmise portsjoni laboratoorne uuring (vajalik on vähemalt 50 ml maht). Bence-Jonesi valgu olemasolu koos kvantitatiivse komponendi määramisega on võimalik immunofiksatsioonimeetodi abil. Valkude eraldamine toimub elektroforeesi teel, millele järgneb immunofiksatsioon spetsiaalsete seerumite abil. Valgu seondumisel immunoglobuliinide kergete ja raskete ahelate antikehadega tekivad immuunkompleksid, mida hinnatakse värvimise teel.

Tuleb märkida, et isegi minimaalne valgu kontsentratsioon tuvastatakse sulfosalitsüülhappe sadestumisreaktsiooni tõttu. Bence-Jonesi valk määratakse filtreeritud uriini (4 ml) ja atsetaatpuhvri (1 ml) kombineerimisel. Järgnev kuumutamine veevannis temperatuurini 60 °C ja hoidmine 15 minutit positiivse prooviga annab iseloomuliku sette. Seda meetodit peetakse kõige usaldusväärsemaks. Liiga happeline või aluseline keskkond ja uriini madal suhteline tihedus võivad analüüsi tulemusi negatiivselt mõjutada.

Uurimismeetodid, kus Bence-Jonesi valk lahustatakse kuumutamisel temperatuurini 100 °C või sadestatakse uuesti jahutamisel, on ebausaldusväärsed, kuna mitte kõigil valguelementidel pole vastavaid omadusi. Kuid indikaatorpaberi kasutamine on Bence-Jonesi valgu tuvastamiseks täiesti sobimatu.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]